改良MTT法原代癌细胞培养药物敏感性试验的实验研究

改良MTT法原代癌细胞培养药物敏感性试验的实验研究作者：谢晓东，李小民，蒋芹，鲍华作者单位：江苏连云港市第一人民医院,刊名：陕西肿瘤医学英文刊名：SHANXIONCOLOGYMEDICINE年，卷(期)：2001，9(4)被引用次数：3次参考文献(10条)1.陈天泽肿瘤化疗药敏试验研究现况1990(05)2.BellamyWTPredictionofresponsetodrugtherapyofcaer:areviewofinvitroassays19923.贾庆瑞MTT比色分析法在白血病细胞药物敏感性测定中的应用1992(03)4.KusumotoT.SakaguchiY.MacharaYComparisonofinvitroanticancerchemosensitivitybetweenhumansquamouscellcarcinomaandadenocarcinoma19925.YamaueH.TanimuraH.TsunodaTChemosensitivitytestingwithhighlypurifiedfreshhumantumourcellswiththeMTTcolormetricassay19916.徐建明.汤仲明.宋三泰人乳腺癌原代培养体外药敏试验的评价1995(02)7.辛华雯.王润帮.杜光祖4种常用抗癌药物体外敏感性与临床相关性研究1994(12)8.韩晓冈.王燕婷.欧阳红荣MTT法体外药敏试验研究进展[期刊论文]-肿瘤1999(01)9.MosmannTRapidcolorimetrilassayforcellulargrowthandsurvival:applicationtoproliferationandcytotoxicityassays198310.司徒镇强细胞培养1996相似文献(10条)1.期刊论文黄洪柯.方玲胃、肠癌细胞MTT法药敏试验的研究-广西医科大学学报2002,19(3)目的:探讨临床常用化疗药物对胃癌、肠癌细胞的敏感性.方法:应用MTT分析法对人体原发性癌细胞标本(其中15例胃癌,13例肠癌)进行10种化疗药物的敏感性测定.结果:胃癌、肠癌细胞对10种化疗药物均敏感,其中以THP、DDP、MMC、5-Fu对胃癌、肠癌细胞的抑制率较高.结论:MTT法对临床化疗用药的选择有指导意义.2.期刊论文姚清深.俸小平.秦军.覃运荣.周林荣.陈春媚.覃欣.YaoQingshen.FengXiaoping.QinJun.QinYunrong.ZhouLinrong.ChenChunmei.QinXin大肠癌细胞的药敏试验结果分析及临床意义-肿瘤基础与临床2007,20(2)目的通过测定大肠癌患者对5-氟脲嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)、奥沙利伯(OXA)及联用化疗药物的体外敏感性试验,探讨肿瘤药敏试验对大肠癌个体化疗的应用价值.方法采用组织块培养-终点染色-计算机图像分析法(TECIA).结果36例大肠癌细胞对试验化疗药物的敏感性由高到低依次为OXA、F+M(5-Fu+MMC)、F+D(5-Fu+DDP)及DDP、5-Fu、O+F(5-Fu+OXA)、MMC、ADM.结论TECIA法的体外肿瘤药敏试验在大肠癌的临床用药及个体化化疗方面具有重要的指导意义.3.期刊论文姜淑青.张钢.乔珊珊.李尊爱.王雪艳小鼠肺腺癌细胞药敏试验中药物代谢酶的作用-卫生毒理学杂志2002,16(3)近年来,以抗肿瘤药物个体性治疗为目的的抗肿瘤药物敏感性试验研究愈来愈受到重视.根据体外药敏试验结果来筛选、指导临床用药可提高化疗的治疗效果,减少不必要的毒副作用,并可减少一些交叉耐药现象.因此进行体外药敏试验对指导临床化疗用药是十分重要的.但目前也有文献报道体外药敏试验与临床化疗药敏并不十分相符[1],这是因为体外药敏试验缺乏体内的代谢环境所致[2].本实验利用药物代谢酶对小鼠实体瘤细胞进行体外抗肿瘤药敏试验研究,旨在为人类实体瘤体外药敏试验提供可借鉴的方法,使体外药敏试验更好指导临床化疗.4.学位论文王威进展期胃癌原发灶、转移灶及外周血淋巴细胞体外药敏相关性研究2007目的：我国胃癌死亡率居恶性肿瘤之首，胃癌淋巴结转移是影响预后的重要因素，根治术后仍有部分复发和死亡的病例，淋巴结转移是主要的原因之一。化疗作为肿瘤术后最有效的辅助治疗手段，在防治肿瘤的复发与转移方面有着举足轻重作用。虽然目前胃癌的化疗方案不断完善，但由于不同的肿瘤药物敏感性不同，不同的肿瘤患者即便为同一种病理类型对抗癌药物的敏感性也可有显著差异，甚至同～患者在不同阶段对抗癌药物的敏感性也不相同。故临床上很难针对不同患者选择相应的方案，这无疑是导致化疗失败的重要原因之一。因此个体化化疗逐渐成为肿瘤化疗研究的热点。目前国内外的有关肿瘤的体外药物敏感性实验研究大多只限于原发的肿瘤病灶、癌性胸腹水，其标本来源的相对单一性使得临床上一大部分失去手术机会的肿瘤患者、术后化疗耐药的患者、术前新辅助化疗的患者等无法获得肿瘤组织的患者不可能利用原发灶癌细胞进行化疗药敏试验，导致这部分患者的疗效无法得到改善。因此，寻找一种能有效替代原发灶癌细胞药物敏感试验的标本具有重要的实际意义。目前，对于肿瘤的转移灶的药敏试验的研究报道较少，尤其是对于临床治疗有着极大指导意义的淋巴结转移灶的药敏试验研究国内尚无相关报道。而且对于已切除原发病灶的肿瘤患者，化疗的重点应该是转移灶尤其是转移淋巴结，而并非原发灶，这样才更具科学性。本研究对胃癌原发灶(癌细胞)、转移灶(转移淋巴结癌细胞)和外周血淋巴细胞的体外化疗药物敏感性进行研究，并探讨其三者之间的相关性，旨在利用转移淋巴结癌细胞或外周血淋巴细胞替代原发灶癌细胞进行化疗药敏检测。方法：将取自河北医科大学第四医院外三科手术切除的36例胃癌患者癌组织、转移淋巴结(均经病理证实为转移淋巴结、)和外周血标本，分别采用机械法从新鲜胃癌组织、转移淋巴结标本中获得癌细胞单细胞悬液，用淋巴细胞分离液从新鲜的外周血标本中获得外周血淋巴细胞，采用MTT法分别检测5-FU、CDDP、L-OHP、CPT-11、5-FU+CDDP和5-FU+L-OHP六种方案对胃癌细胞、转移淋巴结癌细胞和外周血淋巴细胞OD值(吸光度)并计算出CI值(抑制率)。结果：1不同胃癌患者的化疗药物敏感性存在明显的个体差异，胃癌原发灶癌细胞、转移淋巴结癌细胞和外周血淋巴细胞等三种不同来源细胞对每种药物及药物组合的平均抑制率极差均较大，原发灶癌细胞为(20.7～29.1)、转移淋巴结癌细胞为(22.7～57)、外周血淋巴细胞为(21.8～30.1)。2不同化疗药物及药物组合对于胃癌患者原发灶癌细胞、转移淋巴结癌细胞和外周血淋巴细胞的平均抑制率从高到低依次为：原发灶癌细胞5-FU+CDDP5-FU+L-OHPCDDPL-OHPCPT-115-Fu；转移淋巴结癌细胞5-FU+L-OttP5-FU+CDDPL-OHPCPT-115-FuCDDP；外周血淋巴细胞为：5-FU+L-OHP5-FU+CDDPL-OHPCDDPCPT-115-Fu。3胃癌原发灶癌细胞和转移淋巴结癌细胞对于5-FU、L-OHP、CPT-11、5-FU+CDDP和5-FU+L-OHP3种化疗药物及2种药物组合的敏感性差异无显著性(P0.05)，而仅对于CDDP敏感性差异有显著性(P0.05)。相反外周血淋巴细胞与原发灶癌细胞及转移淋巴结癌细胞相比较，对于大部分化疗方案的敏感性差异有显著性(P0.05)。外周血淋巴细胞的敏感性均低于原发灶癌细胞和转移淋巴结癌细胞。4胃癌原发灶癌细胞与转移淋巴结癌细胞对于5种化疗方案(5-FU、CDDP、L-OHP、CPT-11和5-FU+L-OHP)的化疗药物敏感结果均呈正相关(P0.05)，而转移淋巴结癌细胞与外周血淋巴细胞以及原发灶癌细胞与外周血淋巴细胞对于大部分化疗方案药敏结果均无相关性(P0.05)。结论：1不同胃癌患者之间无论原发灶癌细胞、转移淋巴结癌细胞还是外周血淋巴细胞对相同化疗药物或药物组合化疗药物敏感性均不相同，存在明显的个体差异。2胃癌患者的原发灶癌细胞和转移淋巴结癌细胞对于相同的化疗药物敏感性无显著性差异；而转移淋巴结癌细胞与外周血淋巴细胞以及原发灶癌细胞与外周血淋巴细胞对于相同化疗药的化疗药物敏感性有显著性差异。外周血淋巴细胞的敏感性均低于原发灶癌细胞和转移淋巴结癌细胞。3胃癌患者的原发灶癌细胞和转移淋巴结癌细胞的化疗药物敏感性有相关关系，且呈正相关；而转移淋巴结癌细胞与外周血淋巴细胞以及原发灶癌细胞与外周血淋巴细胞之间的化疗药物敏感性无相关性。4目前尚不能以外周血淋巴细胞替代原发灶癌细胞或转移淋巴结癌细胞的来筛选敏感的化疗药物，但可根据其与其他两种组织的药敏结果选择对外周血淋巴细胞抑制率低而对原发灶及转移灶抑制率高的化疗药物，以减轻化疗过程中对患者外周血淋巴细胞的抑制作用。5对于胃癌术后病人，尤其对于临床上常见的无法性根治性手术的中晚期胃癌患者，有望通过转移淋巴结的体外药敏试验替代原发灶癌细胞的药敏试验筛选化疗用药，从而更有效的预防胃癌术后的复发、转移。6对于那些没有获得阳性转移淋巴结标本但极有可能存在微转移灶的患者，根据手术切除的原发灶癌细胞的体外药敏结果做为指导筛选化疗用药，以预防术后复发、转移亦可能获得相同效果。7对于失去手术机会的晚期胃癌患者，可尝试通过对经淋巴结活检证实呈阳性的远隔淋巴结细胞行体外肿瘤药敏试验来筛选化疗用药。5.期刊论文刘海红.谢晓东.蒋芹.匡久树.李小民梯度离心法在肿瘤药敏试验中的应用及临床相关性研究-现代肿瘤医学2004,12(6)目的研究梯度离心法在肿瘤药敏试验中的应用及肿瘤药敏试验与临床个体化化疗的相关性.方法取46例肿瘤患者新鲜癌细胞,梯度离心后用MTT法检测癌细胞对8种常用抗癌药的敏感性;根据药敏结果对患者进行化疗,无敏感药物者按经验方案化疗,观察实验与临床疗效的相关性.结果改良法癌细胞获得百分率为94.65±28.47,与传统方法比较差异有显著性(P＜0.01);药敏试验阳性者25例,阴性者21例.实验提示敏感药物化疗者的有效率为76%(19/25);耐药者按经验方案化疗,有效率为28.6%(6/21).P＜0.01,差异有显著性;实验与临床符合率达73.9%(34/46).结论梯度离心MTT法体外癌细胞药敏试验能更好的指导临床个体化治疗,具有预见癌症患者临床个体化化疗疗效的重要价值.6.期刊论文蒋芹.匡久树.黄小明.李小民.谢晓东MTT法体外检测癌细胞药敏试验及临床相关性研究-实用癌症杂志2001,16(1)目的研究MTT法检测癌细胞对抗癌药物的敏感性与临床个体化化疗的相关性.方法取57例癌症患者新鲜癌细胞,采用MTT法检测癌细胞对8种常用抗癌药的敏感性,成功46例,根据药敏结果对患者进行化疗,无敏感药物者按经验方案化疗,观察实验与临床结果的相关性.结果药敏试验阳性者25例,阴性者21例.实验提示敏感药物化疗者的有效率为76.0%(19/25),耐药者按经验方案化疗,其有效率仅为28.6%(6/21),两者有非常显著性差异,P＜0.01.实验与临床符合率达73.9%(34/46);说明MTT法对癌症患者临床个体化化疗效果有预见价值.结论MTT法体外癌细胞药敏试验可以指导临床个体化治疗.7.期刊论文邓伟力.刘玉福.张爱萍原代喉癌细胞药敏实验研究-长春中医学院学报2002,18(3)目的：化疗前进行肿瘤细胞药敏试验，以提高疗效。方法：应用MTT比色法和流式细胞术对手术切除的喉癌组织制备单细胞悬液，体外培养，进行4种抗癌药物敏感性试验和细胞周期检测。结果：5-FU、MTX对喉癌细胞敏感性强，流式细胞仪检测，喉癌细胞G1期细胞增多，S期细胞减少。结论：在化疗前进行肿瘤细胞药敏试验，选择高效药物用于同一患者，对于提高喉癌的疗效，减少毒副作用的产生具有重要意义和实际应用价值。8.学位论文程晓放人口腔鳞癌和腺癌细胞对顺铂及其联合化冶药敏试验的研究