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1生物小高考实验总结一.检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质1.实验原理:(葡萄糖、果糖、麦芽糖)+斐林试剂———砖红色沉淀(50℃-60℃水浴加热约2分钟)脂肪+苏丹Ⅲ染液-----橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ染液-----红色蛋白质+双缩脲试剂---紫色淀粉+碘---蓝色2.实验材料用具与方法步骤、实验结果分析(1)还原糖的检测①材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。②试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。③步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)★模拟尿糖的检测1.取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2.检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸3.结果:(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。4.分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。(2)脂肪的检测①材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。②步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央↓染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)↓制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)↓镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)(3)蛋白质的检测①试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)②步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)注意:A、还原糖鉴定所需材料为苹果或梨匀浆,也可用白色甘蓝叶或白萝卜(原因:还原糖含量高,颜色为白色或近于无色)不能用西瓜、韭菜、胡萝卜,也不能用甘蔗。B、斐林试剂由甲液(0.1g/ml的NaOH溶液)乙液(0.05g/ml的CuSO4溶液)使用时,甲乙等量混合均匀后再注入(现配现用),需水浴加热,故要用到酒精灯、三脚架、石棉网灯。C、脂肪的鉴定,制作子叶临时切片用显微镜观察,故要用到显微镜、载玻片、盖玻片,还2需用50%的酒精,作用是洗去浮色,因为苏丹Ⅲ(Ⅳ)溶于酒精。观察时,先低倍镜后高倍镜(在低倍镜下找到花生子叶最薄处,移到视野的中央,再转动转换器,换上高倍镜,调光圈,使视野变亮,调细准焦螺旋使清晰)D、双缩脲试剂由A液(0.1g/mlNaOH溶液)和B液(0.01g/mlCuSO4溶液)组成,使用时先注入A液1ml,摇匀后再注入4滴B液摇匀。注意B液不能过量,而且不需加热。考点提示:(1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些?葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。(2)还原性糖植物组织取材条件?含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。(3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。(4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用?混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。(5)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为:浅蓝色棕色砖红色(6)花生种子切片为何要薄?只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。(7)转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?切片的厚薄不均匀。(8)脂肪鉴定中乙醇作用?洗去浮色。(9)双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?先加A液的目的。怎样通过对比看颜色变化?不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。二.观察植物细胞的质壁分离和复原实验原理:成熟植物细胞原生质层(细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质)相当于一层半透膜,水分子可以自由通过,而蔗糖分子不能自由透过,细胞膜具有一定浓度,能够渗透吸水和失水材料用具:紫色的洋葱鳞片叶(紫色是液泡中花青素的颜色,便于观察);制片临时装片,所以要用刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片等,要放在显微镜下观察,所以要用显微镜;要用吸水纸吸引,清水或蔗糖溶液;④取蔗糖溶液浓度为0.3g/ml,大于此浓度(如0.5g/ml)细胞会过度失水死亡,而只出现质壁分离,加清水后不会复原方法步骤:(本实验因洋葱鳞片叶较大,故只需低倍镜观察即可)制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片→低倍镜观察(中央液泡的大小,原生质层的位置)→盖玻片一侧滴入蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引,重复几次→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引,重复几次→观察(质壁分离复原)实验结果分析:现象:蔗糖溶液中,中央液泡变小,颜色变深,原生质层脱离细胞壁(质壁分离)。清水中,中央液泡恢复原来大小,颜色变浅,原生质层恢复原来位置(质壁分离复原)。结论:①植物细胞的原生质层相当于一层半透膜。②当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,细胞失水,发生质壁分离。③当外界溶液浓度小于细胞液浓度时,细胞吸水,质壁分离细胞发生质壁分离的复原3现象。注意:①本实验还可证明细胞的死活(本实验要出现质壁分离或复原现象,细胞必须是活的);可大致测细胞液的浓度;证明原生质层的伸缩性大于细胞壁;证明原生质层是选择透过性的,细胞壁是全透性的。②本实验的材料:洋葱鳞片叶表皮细胞不能用于观察有丝分裂。因为,该细胞为成熟细胞,不分裂,故看不到染色体。考点提示:(1)洋葱为何要选紫色的?若紫色过淡怎么办?紫色的洋葱有紫色的大液泡,便于观察液泡的大小变化;缩小光圈,使视野变暗些。(2)洋葱表皮应撕还是削?为何?表皮应撕不能削,因为削的表皮往往太厚。(3)植物细胞为何会出现质壁分离?动物细胞会吗?当细胞失去水分时,其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性;动物细胞不会发生质壁分离,因为动物细胞没有细胞壁。(4)质壁分离时,液泡大小和颜色的变化?复原时呢?细胞发生质壁分离时,液泡变小,紫色加深;当细胞质壁分离复原时,液泡变大,紫色变浅。(5)若发生质壁分离后的细胞,不能发生质壁分离复原,其原因是什么?细胞已经死亡(可能是外界溶液浓度过大,细胞失水过多或质壁分离时间过长)(6)高倍镜使用前,装片如何移动?若要把视野中上方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向左方移动,因为显微镜视野中看到的是倒像。(7)换高倍物镜后,怎样使物像清晰?视野明暗度会怎样变化?如何调亮?换高倍物镜后,应调节细准焦螺旋使物像变得清晰;视野会变暗,可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。(8)所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系?目镜越长,放大倍数越小;物镜越长,放大倍数越大。(9)物像清晰后,物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系?物镜与载玻片之间的距离越小,放大倍数越大。(10)总放大倍数的计算方法?放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数?总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积;放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。(11)放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系?放大倍数越大,视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。(12)更换目镜,若异物消失,则异物在目镜上;更换物镜,若异物消失,则异物在物镜上、移动载玻片,若异物移动,则异物在载玻片上。(13)怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度?①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。三.探究影响酶活性的因素原理:细胞中几乎所有的化学反应都是由酶催化的。酶对化学反应的催化效率称为酶活性。细胞都生活在一定的环境中,环境条件的改变会不会影响细胞内酶的活性呢?实验材料用具:试管、过氧化氢溶液、缓冲液(pH5.0、pH6.0、pH7.0、pH8.0)酵4母菌液。淀粉溶液、唾液、37℃温水、沸水、冰块、碘液。(1)探究酶的活性与温度的关系:实验方法步骤:实验结果分析:说明温度过高和过低均不利于酶活性的发挥,在适宜温度下酶的活性才最高。(2)探究酶的活性与pH的关系实验方法步骤:实验结果分析:产生气泡多的试管中酶活性越高。只有在适宜PH条件下酶的活性才最高。考点提示:(1)实验过程为什么要选择37℃恒温?在该实验中,只有在恒温的条件下,才能排除温度因素对结果的干扰;37℃是唾液淀粉酶起催化作用的适宜温度(2)3号试管加碘液后出现橙黄色,说明什么?淀粉已完全水解(3)如果反应速度过快,应当对唾液做怎样的调整?提高唾液的稀释倍数(4)该实验得出的结论是什么?唾液淀粉酶的最适pH值是6.8,高于或低于此pH值时,酶的活性逐渐降低。四.叶绿体中色素的提取和分离1.实验原理:(1)提取原理:绿叶中色素能够溶解在有机溶剂(无水乙醇、丙酮、汽油);用无水乙醇提取绿叶中的色素(2)分离原理:(纸层析法)各种色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸条上扩散的快,反之则慢。从而使各种色素随之分离。2.实验材料用具、实验方法步骤(1)提取色素①称取绿叶:选材要求:鲜嫩、颜色深的绿叶(原因:保证含有较多的色素)5②剪碎:便于研磨③研磨:加SiO2——研磨充分;加CaCO3——防止色素分子被破坏;加10ml无水乙醇;溶解色素要求:迅速(无水乙醇具有挥发性)充分(使色素从叶绿体中充分释放,保证提取较多的色素)④过滤:漏斗基部放一块单层尼龙布(不能用滤纸,色素会吸附在滤纸上)⑤收集滤液:滤液收集到小试管中,及时用棉塞将试管口塞住(防止滤液挥发)(2)制备滤纸条①将干燥的定性滤纸剪成长和宽略小于试管长与宽的滤纸条,在一端剪去两角(防止两侧色素随层析液扩散速度过快)②在距离剪去两角的一端1cm处画铅笔线(不能用钢笔或圆珠笔,因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素影响色素分离结果)。(3)画滤液细线①沿铅笔线画一条细且均匀的滤液细线(要求:细、直使各色素扩散的起点相同)②待滤液干后,再画二、三次(干后再画:如不,滤液细线会过粗,画线上色素含量低;素在叶绿体的四种色素中含量最少。再画二、三次:增加色素的含量)(4)色素分离:将滤纸条插入有3ml层析液的试管中,有滤液细线的一端朝下①滤液细线不要触及层析液,否则细线上的色素就会溶解于层析液中,就不会再滤纸上扩散开来,滤纸条上得不到色素带②试管口用棉塞塞紧,层析液具有挥发性(5)观察结果:滤纸条上从上到下色素带依次是胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色);相距间距最大的是胡萝卜素和叶黄素,色素带最窄的是胡萝卜素带,因为胡萝卜五.探究酵母菌的呼吸方式1.实验原理:酵母菌是一种真菌,在有氧和无氧的条件下都能生存,属于兼性厌氧菌2.实验设计:装置如教材图所示(P92)6(1)配制酵母菌培养液:20g新鲜食用酵母菌+240ml质量分数为5%的葡萄糖溶液分别放入锥形瓶A和B(培养液加葡萄糖是保证酵母菌在整个过程中能正常生活)(2)检验CO2的产生:①将装置甲连接橡皮球,让空气间断而持续的依次通过3个锥形瓶,即保证了O2的充分供应,又使进入A瓶的空气先经过NaOH的锥形瓶,以洗除空气中的CO2,保证第三个锥形瓶中的澄清石灰水变浑浊是由于酵母菌有氧呼吸产生的CO2所致。②B瓶应封口放置一段时间,待酵母菌将B瓶中的氧气耗完,再连接盛有澄清石灰水的锥形瓶,确保是无氧呼吸产生的CO2通入澄清石灰水。(3)检测酒精的产生:自A、B中各取2ml酵母菌培养液的溶液,分别注入1号、2号干净的试管中,在1号、2号试管中各滴加0.5ml溶有0.1g重铬酸钾的浓硫酸溶液,并轻轻振荡,观察试管中溶液的颜色变化。3.实验结果及分析:(1)现象:甲、乙装
本文标题:江苏省生物小高考实验总结
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