药理学研究的科学训练分析

药理学研究的科学训练江西中医药大学余日跃219:38江西中医药大学科研全过程训练概况专业课程、专业外语、统计学、文献检索、常用软件应用（Word,Excel,PowerPoint,图表制作软件，Photoshop,SPSS,etc）阅读文献，确定课题（查阅文献能力）设计实验实验研究（取得初步结果，可以申请基金）统计分析资料；撰写论文答辩、会议报告（Chinese,English）319:38江西中医药大学一、药理学研究的类型根据研究目的分类基础研究：受体、递质、蛋白质、神经通路、信号转导、基因开发研究：围绕新药研发的药理学研究应用研究：提高治疗效果、减少不良反应的临床药理学419:38江西中医药大学一、药理学研究的类型根据研究内容分类药效及作用机制研究药动学研究根据研究方法分类实验研究整体动物实验离体器官、细胞实验临床研究519:38江西中医药大学二、对科研素养的要求独立研究工作的基本能力掌握信息,复习文献的能力科学实验设计能力科学实验操作能力科学论文撰写发表能力科学基金申请能力良好的素质，杜绝造假、剽窃文章的可信率、实验的可重复率掌握信息,复习文献的能力如何针对课题复习文献719:38江西中医药大学1.站在巨人肩上看世界知识爆炸时代:广博、交叉学科知识广博与深入、专业化间的矛盾〝开卷有益〞？819:38江西中医药大学2.按科研需要来复习文献充分占有文献〝方向〞─专业人员水平领域─专家水平课题─No.1专家水平919:38江西中医药大学2.按科研需要来复习文献文献分类书教科书:相关,交叉学科的基础知识专著编著(资料性)著作(文献性)(方向)(领域)综述资料性(方向)(领域)文献性(领域,课题)Originalpaper课题领域(个别)Datapaper快报摘要会议汇编自己定位不要变,别被文献牵着走1019:38江西中医药大学3.如何收集文献检索重要文献;实验室或学者追踪;确定本学科的重要(核心)期刊分层次收集资料课题有关文献;尽可能收集原著/快报;要新,全本领域非课题文献;新综述,影响大的原著本方向非本领域文献:经典专著/综述不同方向相关知识:专著,教科书1119:38江西中医药大学4.如何看文献精读与浏览看懂:问题的提出(Background)目的设计思想与依据研究对象与方法重要结果结论与启示熟悉程度方向:一般涉及;基础知识;学科水准;当前重大进展与趋势领域:了解焦点与热点;已/正/将进行的课题课题:(全面)历史现状展望；主要方法、手段1219:38江西中医药大学5.文献整理运用自己专业知识按照文献的热点与焦点参照相关综述模式例TGFβ在肾纤维化中的意义(作用)㈠背景知识①肾纤维化②TGFβ的理化特征③TGFβ的生成与代谢、组织分布等㈡肾纤维化病程中TGFβ的变化①血浆的和肾组织的，蛋白与基因表达②病程中的动态变化与临床病理生理表现的（相关）关系1319:38江西中医药大学5.文献整理参照相关综述模式㈢TGFβ的生物学（肾）效应：整体，器官，细胞及分子效应①外源或刺激内源TGFβ的效应（在正常和疾病条件）②拮抗或促失活的效应㈣TGFβ效应的机理受体及细胞内信号转导机理TGFβ的基因表达和细胞表型改变的机理㈤肾脏疾病的TGFβ高/低表达的机理㈥TGFβ与其他已知肾纤维化因子间的关系（包括遗传易感因素）1419:38江西中医药大学5.文献整理㈦TGFβ参与肾纤维化发病的临床意义：诊断，治疗，预防策略此外，常用方法学和技术的整理肾纤维化整体活离体模型；相关细胞的培养；细胞增殖表型转变；胶元测定；TGFβ受体表达与活性检测……1519:38江西中医药大学6.如何撰写文献综述目的学科带头人与学科骨干写科研工作人员开题前写科学情报人员写研究生毕业论文(?)基层人员为写而写文献性与资料性,大综述与小专论1619:38江西中医药大学6.如何撰写文献综述小专论内容审定好内容与题目(如上述例子)要有思路，有观点，提炼科学问题，要告诉读者什么？概述问题的提出--研究的历史与背景--本问题(课题)的意义背景知识及相关基本知识（不要写成教科书或讲义）本专论要论述的主要内容,注意从课题与背景联系的学科高度分析小结存在的问题与今后的方向1719:38江西中医药大学6.如何撰写文献综述资料处理按专业知识列好提纲;文献(作的摘要)编号后按提纲归类背景材料,基础知识,立论依据;权威甚或经典;“教科书式或讲义式”语言不同意见,学术观点与资料如何处理资料的准确性,尤其是翻译,讲不清楚不如不讲老课题文献多,新课题文献太少1819:38江西中医药大学6.如何撰写文献综述如何表达自己的学术观点:评述?自引?逻辑分析内容集中,目标明确,不要广证博引(与研究生论文不同)参考文献:新(5年内2/3);背景材料,立论依据;权威经典;专论内容:新,反映进展,可引会议,摘要及个人咨询,准确发表:刊登进展/综述的专业杂志(如“进展”“国外医学”);专业论文杂志;查阅国内类似综述有无,避免重复.按杂志稿约修改(留底)科学实验设计能力2019:38江西中医药大学1.实验设计的三个基本原则随机原则排除实验者的主观性，使每个实验单位都有同等机会被分配到实验组和对照组。重复原则实验的取样例数或实验次数2119:38江西中医药大学1.实验设计的三个基本原则对照原则并行对照配对对照自身对照前后对照2219:38江西中医药大学2.研究元素要准确处理因素（自变量）试验对象（人、动物；器官、组织、细胞、分子）试验效应（因变量）药物、方法和模型的关系2319:38江西中医药大学3.课题目标要明确原则:目标明确;构思新颖;立论依据充分;实验方法恰当选题(科研目标,目的)目标具体:用实验手段解决科学问题,问题是什么,攻关，攀科学高峰，“关”、“高峰”是什么,在哪里?(目的与手段,工具的关系)射箭中的,忌打哪儿指哪儿，看看有什么变化，研究甚少，填补空白等。“三定”基础上明确该课题的学科地位(与原创新关系);注意工作的积累和发展;可参考文献整理中发现的和未解决的问题；将确定的目标逐字推敲写下来。2419:38江西中医药大学4.实验方法的选择方法恰当(不是越新越好)方法选择：目的决定方法选择；实验条件选方法；工作者熟练程度选方法；假设全部顺利，所得结果能否达到设计目标？动物的选择：注意种属、品系、性别差异给药方法：试药的溶解性、给药途径实验水平：整体必做！正常动物与模型动物经典与新建；是否需与人一致或接近；可行性；模型与分组适合研究目的为原则预防与治疗实验：尽可能做治疗实验2519:38江西中医药大学4.实验方法的选择比较实验：选阳性药做量-效关系，证实方法和模型可靠。药效评价标准量-效关系：量反应、质反应、时反应（潜伏期、持续时间）时-效关系：药效难测时可用时-量代替药-靶关系：药-配体、受体动力学、酶-底物、药-蛋白相互作用观察指标多（广）或少（精）好？明确每个指标的原理和意义背景指标如证实疾病模型复制成功的指标；反映质控的指标；反映阴性或阳性的对照指标等→必须是肯定的结果探索性指标前瞻性指标2619:38江西中医药大学5.影响实验样本数的因素药物效果生物差异实验技术统计处理两组例数相等;计量资料与计数资料；同体、配对、前后对比实验；特殊设计：拉丁方、正交、交叉设计样本数估计的原理2212221//-X()(,t222121）则XXsstnnSnSX6.1)S(6.15%805.1)S(21%904.1)S(26%95221221221XXnXXnXXn把握度时：把握度时：把握度时：2719:38江西中医药大学6.实验剂量的确定最佳剂量的探索安全剂量的探索由已知药物的效价比值来推算。由剂量折算系数法计算出最大耐受量的等效剂量剂量递增方案2819:38江西中医药大学实验次数递增方案所用剂量（mg/kg）实际例子(D=20mg/kg)较前增长值较前增长率（%）1D20--22D4020100（20/20）33.3D662665(26/40)45D1003450(34/66)57D1404040(40/100)69D1804029(40/140)712D2406033(60/180)816D3208033(80/240)以后均按增长率30%～33%递增剂量递增方案2919:38江西中医药大学多剂量实验中剂量间距的确定整体动物：1：3：9/1：2：4：8离体实验：1：10：100：10001：3：10：30：100计算LD50或ED50的实验0%及100%之间有3～6个剂量质反应一般取1：0.6～1：0.85最反应取1：0.1～1：0.53019:38江西中医药大学剂量换算不同种属动物的剂量换算）（ABAkdkdB3119:38江西中医药大学5.实验方法要规范建立操作程序落实每个方法预试成熟，建立程序设计实验记录与观察内容实验记录表；单项归纳表；汇总表No.ControlGroup1Group212343219:38江西中医药大学6.实验结果要有预期预期结果阴性或阳性的解释与再证实；审定设计能否达到目标预期结果追踪深入研究的方向和可行性预期结果图表设计（发表是否单薄）预期结果的学术价值和地位（写论文的Introduction,M&M）3319:38江西中医药大学怎样写好实验记录3519:38江西中医药大学1.基本要求一般要求记录本应事先印有页码，不得撕掉或挪作他用，即使写错了亦应如此。封面或首页应写明科研课题名称，开始工作年、月、日，工作者姓名，每本记录前1～2页应留作写实验目录及页次之用，便于查阅。所有数据，必须立即用不掉色的笔直接清晰地记录在记录本上，严禁用铅笔记录，因为容易退色和被涂改。如有写错不得涂改擦抹，必须改正时，可在错误处画道线或打×，然后写上正确数据，并由课题负责人签字，防止弄虚做假。电脑测得的数据应输入电脑，自动打印，贮存，最好拷贝一份，以防丢失或损坏。3619:38江西中医药大学2.认真、客观、全面认真、客观、全面的记录。格式和内容实验方法试剂称量配制时间气候仪器设备动物结果3719:38江西中医药大学3.立即、直接、清晰写记录的要求立即不能先记在心上，实验后补写记录，因为记忆有时不可靠。直接要直接写在记录本上，不能先写在纸条上，然后重抄，因为重抄有时抄错，有时甚至把纸条丢掉。清晰字体清楚，不要潦草，不要词不达意，自己能看懂，别人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自动仪器打印的数据、结果、图谱等必须将原件依顺序贴在记录本上，有条件的还可输入电脑保存。3819:38江西中医药大学4.基本内容记录的内容年、月、日。有的实验还应注明室温实验名称目的材料实验方法，应注明引用参考文献；结果：包括原始数据，图，表，统计方法讨论或小结药物效应的测量4019:38江西中医药大学1.药物-受体相互作用的测定生化结合研究（全部受体）功能研究（部分受体）realtimemeasurementstoptimemeasurement1种配体与3种不同受体群的相互作用配体与受体结合的特异性是相对的，与药物浓度有关4219:38江西中医药大学2.放射受体结合研究20世纪60年代，125I-ACTH、125I-血管紧张素;基本原理：配基与受体特异性结合，以放射性强弱表示结合容量。与放免分析相似（1955年发明，Yalow）放射配基结合过程图解4419:38江西中医药大学已知药物浓度，可得到受体结合剂量-反应曲线加入大剂量非标记配基，封闭受体，得到非特异性结合相应公式计算非特异性结合、总结合固定配基浓度，改变受体量符合一级动力学：随时间增加，结合达最大值；能被无药物介质逆转受体结合研