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•胚胎工程的概念:胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需要移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类各种需求。•操作对象:早期胚胎和配子•技术手段:胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等•理论基础:1.生殖细胞的形成:生殖细胞分别由原始性细胞经过减数分裂而成的。2.胚胎的发育:精子和卵细胞受精合成的受精卵是下一代新生命的开始。一.精子和卵子的发生(一)精子的发生(1)发生场所:睾丸(2)时间:初情期——生殖机能衰老1.精子的发生精原细胞有丝分裂初级精母细胞次级精母细胞精子细胞精子MⅠ第一阶段第二阶段第三阶段MⅡ精子发生的过程多个精原细胞染色体复制变形精子细胞变形中的主要变化:1.细胞核——2.高尔基体——3.中心体——4.线粒体——5.细胞内其他物质——精子头的主要部分头部的顶体精子的尾线粒体鞘膜(尾的基部)原生质滴(球状,最后脱落)(二)卵子的发生1、发生部位:卵巢和输卵管2、时间:卵原细胞和初级卵母细胞的形成在胚胎时期;(卵巢)减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成;(卵巢)减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程完成的。(输卵管)(放射冠)动物的胚胎在性别分化以后,雌性胎儿卵巢内的卵原细胞,通过有丝分裂增加其数量,演变为初级卵母细胞,被卵泡细胞包围形成卵泡。透明带:卵泡:卵母细胞+卵泡细胞卵母细胞与卵丘细胞间的1层厚膜(糖蛋白)卵丘:卵母细胞+卵丘细胞(属于卵泡细胞→放射冠)黄体:排卵后,由卵泡形成的富有血管的腺体样结构(分泌孕激素等)卵子的发生排“初级卵母细胞”或者“次级卵母细胞”排卵:卵子从卵泡排出,进入输卵管卵原细胞有丝分裂多个卵原细胞染色体复制初级卵母细胞MⅠ第一极体次级卵母细胞两个第二极体第二极体卵子退化消失卵子发生过程MⅡ在卵巢中,排卵前后完成进入输卵管,在受精过程完成被卵泡细胞包围,形成卵泡胎儿时期完成生长,形成透明带和卵黄膜1.一个卵泡中能形成几个成熟的卵子?2.排卵是指卵子从卵泡中排出,还是指卵泡从卵巢中排出?3.刚排出的卵是成熟的卵子吗?它在母体的什么部位与精子受精?答:刚排出的卵子尚未完全成熟,仅完成第一次减数分裂,需要在输卵管内进一步成熟,直到减数第二次分裂的中期才能与精子结合完成受精过程。排出的卵子是在输卵管内与精子受精的。答:正常情况下,一个卵泡只能形成一个成熟的卵子。答:是指卵子从卵泡中排出。卵子受精的标志:当在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时,说明卵子已经完成了受精。注意:1.区分受精的标志和受精完成的标志2.精子和卵子发生的区别雌雄原核融合,形成合子(即核融合形成受精卵)项目精子发生卵子发生区别场所时间过程特点结果相同点睾丸的曲细精管(场所唯一)卵巢(MⅠ)、输卵管(MⅡ)(场所不唯一)初情期性别分化后开始,卵泡的形成和在卵巢内的储备在出生前完成,减Ⅱ分裂在精子和卵子结合过程中完成①MⅠ和MⅡ是连续的,需变形成蝌蚪状精子②细胞质均等分配①MⅠ和MⅡ是不连续的,不需变形,卵子是球状的②细胞质不均等分配形成4个精子细胞形成1个卵细胞和3个极体①原始生殖细胞的增殖为有丝分裂②生殖细胞的成熟为减数分裂③成熟过程均经一次复制和两次分裂④子细胞中的染色体数目减半巩固练习1.下列不属于胚胎工程的是:()A.体外受精B.胚胎分割、胚胎移植C.胚胎干细胞培养D.转基因鲤鱼的培育2.有一个卵原细胞中含有A与A’、B与B’两对同源染色体,它形成的含有AB的配子有()A.1个B.0或1个C.2个D.4个DB3、排卵时,排出的细胞是()A.卵原细胞B.初级卵母细胞C.成熟卵细胞D.初级卵母细胞或次级卵母细胞4、卵子的成熟部位和受精部位分别是()A.卵巢、卵巢B.卵巢、输卵管C.输卵管、输卵管D.输卵管、子宫DC二、受精(一)受精的概念:是精子和卵子结合形成合子(即受精卵)的过程。(二)场所:输卵管。是不是所有动物的受精过程都发生在输卵管中?3、过程精卵识别精子附着于卵膜精卵质膜融合同种动物精子、卵细胞表面有特异性相互识别的蛋白,这是同种动物精卵才能结合的原因之一。4、结果:受精卵形成一)受精前的准备阶段:1)精子获能:精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后,才获得受精能力的生理现象.2)卵子的准备:在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期,才具有与精子受精的能力二)受精阶段:1)精子穿越放射冠和透明带顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障2)精子进入卵黄膜卵黄膜封闭作用是防止多精入卵受精的第二道屏障3)原核形成:雄原核形成和雌原核形成4)配子结合:雌雄原核融合形成合子(受精卵)穿过放射冠:在卵子外围集聚有几十个精子,它们首先穿放射冠。几个精子同时分解透明带,但只有一个精子能穿过透明带进入卵子内,当第一个精子进入后,透明带的穿透性就立即发生变化,从而阻止其他精子穿越透明带。穿过透明带:精子进入卵子后,其细胞核变大到和卵子细胞核相似,精子细胞核(雄原核)和卵子细胞核(雌原核)同时向细胞中部靠拢,并相互融合成一个细胞核,这时称受精卵。形成受精卵:精、卵相遇顶体反应顶体酶释放顶体酶溶解透明带接触透明带穿越放射冠溶解卵丘细胞(放射冠)穿越透明带接触卵黄膜产生透明带反应形成第一道屏障(作用)精子被微绒毛抱合精子外膜与卵黄膜融合精子进入卵防止多个精子进入透明带精子进入卵后变化①变化②变化③产生卵黄膜封闭作用形成第二道屏障(作用?)尾部脱离核膜破裂形成雄原核形成雌原核激活卵子完成减数第二次分裂,排出第二极体发育移动接触合并形成受精卵防止多精入卵3、意义对于进行有性生殖的生物来说,通过减数分裂和受精作用可以维持每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定;这对于生物的遗传和变异十分重要。思考:你认为受精卵中的遗传物质来自什么?1、下列说法正确的是()A.成熟精子遇到卵子便可发生受精作用B.排出成熟卵子细胞的过程即为排卵C.卵子形成时的分裂过程均在卵巢内完成D.卵子发生中的减数第二次分裂是在精子和卵子的结合过程中完成的2、下列有关排卵的叙述,正确的是()A.排卵是指卵泡从卵巢中排出B.精子和卵子受精后发生排卵C.排卵时已完成减数分裂,因此,排出的卵子仅含体细胞一半的遗传物质D.排卵后卵子进入输卵管,准备与精子受精DA受精后8天。受精卵完成着陆,微微嵌入子宫内膜。此时它分裂发育为几百个细胞。三、胚胎发育受精后6星期,人形已隐约可见。这时,胚胎的心跳每分钟140—150下.是母亲心跳的两倍。人类胚胎第8周时在子宫内的照片此时胎儿已长到20周,他移动手臂,把手指放在唇边,这可以促进它对吮吸的反映。1、个体发育的起点——受精卵受精卵一形成就在输卵管内进行有丝分裂。2、卵裂期——输卵管分裂方式:有丝分裂;细胞数目:细胞体积:胚胎总体积:增加变小基本不变受精卵在卵膜内完成发育,所需营养来自受精卵本身,故发育过程早期胚胎体积基本无变化1、合子形成后开始发育,下列说法错误的是()A.在输卵管内进行有丝分裂B.卵裂期细胞数目增加C.卵裂期胚胎的总体积不增加D.卵裂期每个细胞的体积不变2、下列有关胚胎发育卵裂期的特点,描述正确的是()A.细胞进行有丝分裂,所有细胞均具有全能性B.每个细胞体积有所减小,胚胎的总体积增加C.胚胎有机物总量增加,细胞核DNA量不断减少D.所有细胞的相对表面积减小DA3、桑葚胚细胞数目:32个左右;细胞特点:每个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能,属于全能性细胞。囊胚期滋养层:发育成胚胎的附属结构或胚外结构,胚胎可通过这些组织从母体中获得正常发育所需的氧气和营养物质内细胞团细胞:即胚胎干细胞,是一种未分化的细胞,具有全能性,能发育成完整的胚胎滋养层内细胞团囊胚的形成——细胞开始分化受精卵第一次卵裂第二次卵裂第三次卵裂桑椹胚囊胚囊胚腔原肠腔原肠胚外胚层中胚层内胚层———————内胚层——中胚层——原肠胚胚的发育:按照一定的次序向内运动受精卵——卵裂——囊胚原肠胚的形成受精卵卵裂期桑椹胚囊胚(内含囊胚腔)原肠胚(内含原肠腔)胎儿形成:在透明带内进行有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎总体积并不增加,或略有减少。:由具有全能性细胞构成,细胞数在32个左右,排列紧密,形似桑椹内细胞团:发育成胎儿各组织滋养层细胞:发育成胎膜和胎盘:最初发育在输卵管进行有丝分裂三.胚胎发育外胚层中胚层内胚层原肠腔1、下列关于胚胎发育的叙述,正确的是()A.胚胎发育早期随细胞不断分裂体积增大B.在桑椹胚阶段,胚胎内部出现空腔C.原肠胚阶段的每一细胞都属于全能细胞D.原肠胚阶段出现胚层分化2、下列叙述正确的是(多选)()A.胚胎发育的早期有一段时间是在透明带内进行的B.内细胞团将来发育成胎盘和胎膜C.哺乳动物早期胚胎在一定时间内不与母体子宫建立组织上的联系D.早期胚胎发育到一定阶段才可从培养液取出向受体移植DACD3、右图表示蛙的受精卵发育至囊胚过程中的某一变化,若横坐标表示时间,则纵坐标可表示()A.有机物总量B.每个细胞DNA含量C.所有细胞体积之和D.所有细胞表面积总和与体积总和的比值4、下图表示蛙的受精卵发育至囊胚过程中,各种量的变化趋势,其中正确的是()(多选)时间DNA总量时间每个细胞体积胚胎体积有机物总量时间时间CABC二、体外受精和胚胎体外培养•体外受精概念:采取雌性动物的卵细胞和雄性动物的精子,使其在试管受精。过程:(1)精子的收集和获能;(2)卵母细胞的收集和培养;(3)获能精子和卵细胞的受精。“试管动物”在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。•体外受精胚胎体外培养概念:将受精卵在人工环境下培养成早期胚胎。培养液:(不同时期成分不同)水、无机盐、有机物、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。胚胎培养比组织、细胞培养要难。其他方式试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。不同动物胚胎移植时间不同桑椹胚阶段:牛、羊8个或16细胞胚阶段:小鼠、家兔4个细胞胚阶段:试管婴儿目前由于无法进行全体外胚胎培养,胚胎移植成为胚胎工程中获得后代的唯一方法。(P74)胚胎工程中通过、和等技术获得的胚胎,都必须才能获得后代。因此,技术是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”。转基因核移植体外受精移植给母体胚胎移植一、胚胎移植1.概念:将雌性动物的,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到的、的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。同种生理状态相同早期胚胎胚胎的来源:雌性动物的早期胚胎或体外受精及其他方式得到的胚胎。供体:提供胚胎的个体。受体:接受胚胎的个体。受体的条件:同种、生理状态相同。胚胎移植的意义⑴加速育种工作和品种改良;⑵大量节省购买种畜的费用;⑶一胎多产;⑷保存品种资源和濒危物种;⑸可充分发挥优秀个体的繁殖潜能缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量。供体和受体共同繁殖后代有什么好处?可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力供体的主要职能:只产生具有优良遗传特性的胚胎,大大缩短了供体本身的繁殖周期,增加了供体一生繁殖的后代数量。受体的职能:担任繁重而漫长的妊娠和育仔的任务1、供、受体的选择和处理(使用激素进行同期发情处理、超数排卵处理)2、配种或人工授精;3、胚胎收集(冲卵)、检查(胚胎发育到桑椹胚或囊胚)、培养或保存(-196OC的液氮)4、胚胎移植:手术法(引出子宫和卵巢将其注入)、非手术法(用移植管将其送入子宫)5、对受体母畜进行是否妊娠的检查。胚胎移植的基本程序(1)对供体、受体进行选择供体:遗传性能和生产性能优秀的个体;受体:健康和正常繁殖能力的个体处理:同期发情具体做法:注射相关激素。同期发情技术:主要是借助外源激素剌激卵巢,使其按照预定的要求发生变化,使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同阶段,从而达到同期发情。(2)采集卵母细胞方法:超数排卵具体做法:注射促性腺激素(3)配种或人工受精精子来源:同种优良的雄性动物。(4)胚胎的收集在配种或输精后第7天,用特制的冲卵装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗
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