生药学实验指导

生药学实验指导内蒙古医学院药学院生药学教研室二00五年六月目录实验一生药中常见化学成分的理化鉴定(一)………………………(2)实验二生药中常见化学成分的理化鉴定(二)………………………(3)实验三根类生药黄芪………………………………………………(5)实验四根类生药甘草………………………………………………(6)实验五根类生药百部………………………………………………(7)实验六根茎类生药黄连…………………………………………(8)实验七根茎类生药大黄……………………………………………(9)实验八根茎类生药半夏……………………………………………(10)实验九茎木类生药关木通…………………………………………(11)实验十皮类生药肉桂……………………………………………(12)实验十一皮类生药黄柏…………………………………………(13)实验十二叶类生药大青叶………………………………………(14)实验十三花类生药金银花………………………………………(15)实验十四果实类生药小茴香………………………………………(16)实验十五种子类生药马钱子………………………………………(17)实验十六全草类生药麻黄…………………………………………(18)实验十七菌类生药茯苓……………………………………………(19)实验十八动物及矿物类生药………………………………………(20)附录1．常用试剂配制法……………………………………………………(21)2．常用商品酸碱浓度表………………………………………………(25)3层离法常用显色剂…………………………………………………(26)4．显微镜测量法…………………………………………………………(27)5．绘图注意事项…………………………………………………………(27)一、实验注意事项：1．根据教学进程，温习与本次实验有关的课堂讲授内容。2．仔细阅读本次实验的内容，要求弄懂实验的原理与方法。3．准备好各种自备的实验用品，如铅笔、橡皮、直尺、报告纸等。二、实验过程中的几点要求：1．遵守实验室规则，保持实验室安静。2．实验认真，观察仔细，观察应当与思考结合起来，应当手、眼、脑三者并用。3．由于实验时间有限，实验时应当善于安排自己的工作，注意力应当集中在主要问题上，不要用过多时间去钻研细小的次要问题，一时解决不了的次要问题，可留课外时间去解决o4．在实验过程中，应当随时注意观察到的现象，测量或称量的数据，计算结果等写在报告纸上，养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好习惯。5．实验进行过程中，必须注意听取教师的指导。6．实验桌前应随时保持整洁，非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。7．纸屑、废物应放人污物缸内，不得乱丢地上，污物缸内不得倒入液体。三、实验完毕时的几点要求:1．按照教师指定时间完成实验报告。2．把实验用仪器、用品等收拾干净，放在指定位置。发放给个人保管的可放抽屉或柜内。3．临时借用物品应及时归还。4．值日生负责最后清扫实验室卫生，并及时清除污物缸内的废弃物。5．实验结束后，检查门、窗、水、电，保证无安全隐患后方可离开实验室。实验一生药中常见化学成分的理化鉴定（一）一、实验目的要求：1．了解化学检出法在药材鉴定中的应用。2．熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。3．掌握生物碱，羟基蒽醌的理化性质和定性检识反应。二、实验主要材料、仪器及试剂：马钱子、黄柏(苦参)黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升华装置。，碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试液、浓硝酸、浓硫酸、5％NaOH、HCl、乙醚、氨水。三、实验内容：1．显微化学反应法：(1)将药材的切片或粉未置载玻片上，滴加适当试液，加盖玻片在显微镜下观察产生的颜色或结晶等，作为鉴别特征。’①取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片，加l％硫矾酸试剂l滴，镜检，观察结果。②另取一切片，加浓硝酸l滴，镜检，观察结果。（2）取药材粗粉加适当试剂浸出，将浸出液滴于载玻片上，滴加适当试剂，加盖玻片，镜检观察反应结果。取黄连乙醇液1滴，加浓HN031滴，镜检，观察结果。(3)取药材的切片或粉末滴加适当试剂，直接观察皇现的种种颜色作为鉴别特征。取大黄饮片，加5％NaOHl~2滴，出现什么颜色?再加稀HCl1~2滴，又出现什么颜色?2．微量升华法：是利用药材中所含的某些成分，在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察其形状，颜色及化学反应，作为鉴别特征。具体方法：取金属片，安放在有圆孔(直径约2cm)的石棉板上，金属片上放一小金属圈(高度约0.8cm)，对准石棉板上的圆孔，圈内加药材粉末一薄层，圈上放一载玻片，在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热(火焰距板约4cm)数分钟，至粉末开始变焦，并有气化物发生，去火待冷，则有结晶状升华物附着于覆盖的载片上，将载玻片取下反转，在显微镜下观察结晶形状，并可加化学试液，观察其变化。取大黄粉未，进行如上操作，观察反应结果o3．荧光分析法：将药材切片或粉末或提取液等，在荧光灯下观察荧光，有些药材不产生荧光，如以酸碱处理或其他化学方法处理后，可使其中某些成分在荧光灯下产生荧光，以便鉴别。2如取黄连饮片、浙贝母粉末或秦皮水浸液，在紫外灯下观察荧光颜色。．‘4．层析法：‘分为纸层析、柱层析、薄层层析等(略)。’5．化学定性检查：药材中的化学成分可利用其能与某些试剂产生特殊的颜色、沉淀反应来进行鉴别。(1)生物碱的检出：沉淀反应取黄连，马钱子，黄柏(苦参)粉未各2g，分别盛入锥形瓶中，各加水l5ml，浓HClO．5ml，60℃水浴上温浸30分钟，时时振摇，取滤液备用。．各取2ml滤液于试管中，分别加下列试液2—3滴，观察有何现象？碘化铋钾试液碘化汞钾试液碘一碘化钾试液黄连马钱子黄柏(苦参)(2)羟基功醌的检出：Bomtrǎger反应取大黄粉未0.2g，置试管中加入5％NaOH试液4ml，在小火上煮沸，取滤液加HCl呈酸性后，再加乙醚5ml，振摇，分取醚层，于醚层中加入等量氨试液，振摇，观察反应现象。四、作业：简要记录各反应的实验步骤和结果。五、思考题：1．显微化学反应法有几种操作方法?2．微量升华法用于生药鉴别有何特点?3．含何类成分的生药常会产生荧光?4．生物碱常甩的沉淀试剂有哪些?Bornträger反应过程的原理是什么?实验二生药中常见化学成分的理化鉴定(二)一、实验目的要求：．掌握香豆精类，强心苷类、皂苷类、鞣质类、氰苷类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。二、实验主要材料、仪器及试剂：秦皮、桔梗、穿山龙、五倍子、儿茶、苦杏仁、洋地黄叶、黄芩(槐米水浴锅蒸发皿锥形瓶盐酸羟胺甲醇液、l0％氢氧化钾甲醇液、乙醚、氯仿、盐酸、l％三氯化铁乙醇液、2％红血球悬浮液、1％盐酸奎宁试液、明胶液、铁铵矾试液、三氯化铁试液、冰醋酸、浓硫酸、镁粉。三、实验内容：1．化学定性检查3(1)香豆精类的检出：异羟肟酸铁反应取秦皮粗粉0.2g，置具塞试管中，加乙醚3ml，浸渍5~10分钟，时加振摇，放置，吸取上清液(或滤过)于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液2~3滴，l0％氢氧化钾甲醇溶液2~3滴，水浴温热1~2分钟，冷后加l0％盐酸，使pH为3~4，再加l％三氯化铁乙醇溶液1~2滴，两液混合面或溶液应显什么颜色?（2)强心苷的检出：三氯化铁一冰醋酸反应取洋地黄叶粉末0.5g，加水5ml，水浴加热20分钟，滤液加3mlCHCl3，振摇萃取后，再加乙醚3ml，待分层，用吸管吸取取下层，将CHCl3层转于蒸发皿中蒸干，放冷，加冰醋酸lml使残渣溶解，移人试管中，加三氯化铁溶液1滴，并沿管壁缓缓注入浓H2S04l5~20滴，观察上层液及界面的颜色变化。(3)皂苷的检出：①泡沫反应取桔梗粉末0.2g，加水5ml，加热煮沸，过滤，滤液在试管中强烈振摇，注意是否产生大量持久性泡沫。②溶血试验取穿山龙的l％生理盐水溶液lml和l％生理盐水lml，分别置试管中，各加2％红血球悬浮液0.3ml，摇匀后放置，注意观察哪支试管溶液变清而透明。(示溶血现象)（4)鞣质的检出：显色及沉淀反应取五倍子，儿茶粉末各0.5g，分别置于锥形瓶中，加25ml水，水浴加热，过滤备用。各取滤液2ml，分别加下列试剂，观察反应现象。1％盐酸奎宁试液明胶液铁铵矾试液、五倍子儿茶(5)氰苷类的检出：苦味酸钠反应取苦杏仁一粒捣碎，用水湿润置试管中，试管中悬挂用NaHC03饱和溶液湿润的苦味酸试纸一条，用软木塞塞紧，置40—50○C水浴中，观察试纸颜色变化。(6)黄酮苷的检出：盐酸镁粉反应取黄芩(槐米)粉末约0.2g，加乙醇5ml，水浴温热约5分钟，滤过，取滤液2ml，加镁粉少量，混匀，滴加盐酸数滴，注意有气泡产生，同时观察呈现什么颜色。四、作业：简要记录各反应的实验步骤和结果。五、思考题：1、香豆精苷，强心苷，氰苷，黄酮苷及鞣质的反应机理是什么？2、黄酮类成分遇盐酸一镁粉是否都显红色?如不显红色是否可以否定黄酮成分的存在?4实验三根类生药黄芪RabixAstragali一、实验目的：l、掌握黄芪生药性状。2、掌握黄芪横切面组织特征和粉末显微特征。二、实验主要仪器及试剂：显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛溶液。三、实验材料：．蒙古黄芪AstragalismembranaceusBgc．Var．mongholieus(Bgc．)Hsiao原植物标本、生物、组织横切片及粉末。四、实验内容及步骤：l、观察蒙古黄芪的原植物标本，注意其属于豆科植物的形态特征。2、性状鉴定观察黄芪生药，注意其表面色泽，皮孔形状，栓皮有无剥落；折断面是否呈纤维状，横断面形成层环是否明显?观察皮部与木部的色泽，尝味。3、显微鉴定(1)镜检黄芪根的横切片，自外至内观察其组织特征?①木栓层为数列木细胞。②栓内层由数列薄壁细胞组成。③韧皮部纤维群与筛管群交互排列，射线弯曲。④形成层成环，束内形成层明显。⑤木质部导管单个散在或2~3个相聚，直径l8~l60微米，木纤维成束，木薄壁细胞少数壁稍厚，具多数单纹孔；木射线发达。(2)镜检黄芪粉末，分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片，注意以下特征：①纤维众多，成束，细长，直径9~36μｍ，壁厚，非木化，孔沟不明显。另取黄芪生药，刮取少量纤维(粉末)，透化后装片，注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。②导管主为具缘纹孔导管，纹孔呈椭圆形，类方类或斜方形。③木栓细胞表面观呈多角形或类方形。④淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形，直径3~13μｍ，复粒由2~4分粒组成。五、作业：1、绘黄芪横切面组织简图。2、绘黄芪粉末特征图，示纤维，导管，木栓细胞与淀粉粒。六、思考题：l、黄芪为什么不易折断?2、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末?5实验四根类生药甘草RadixClycyrrbizae一、实验目的：l、掌握甘草生药性状特点。2、掌握甘草根横切面组织和粉末显微特征。二、实验主要仪器及试剂：显微镜、临时装片用具、白瓷板、蒸发皿、蒸馏水、水合氯醛试液、80％硫酸。三、实验材料：甘草clycyrrbizauralensisFisch.原植物标本、生药、饮片、组织横切片和粉末。四、实验内容及步骤：l、观察甘草植物腊叶标本，注意根茎和根的形态，复叶上的小叶数和花序或果实形状等。2、性状鉴定观察甘草生药，注意其表面色泽，有无纵皱及横向皮孔？断面色泽与特征、质地如何?将它折断，有无粉尘飞扬?尝味。3、显微鉴定(1)镜检甘草根横切片，自外向内观察其组织特征：①木栓层数列至20~30列木栓细胞，红棕色，排列整齐。②皮层较窄，为数列薄壁细胞，有纤维群散在。③韧皮部韧皮纤维与韧皮薄壁细胞及筛管群相问排列，靠外方的筛管组织常被挤压而颓废成条状；韧皮纤维壁厚，微木化，其周围薄壁细胞中多含草酸钙方晶；韧皮射线广，多弯曲；常有裂隙。④形成层束内形成层明显，为数列扁平细胞，束间形成层不明显o⑤木质部导管较大，直径约至l6μｍ，常单个或2~3个相聚；木纤雏多成群，其周围薄壁细胞中也含草酸钙方晶；木射线较平直，宽3~5列细胞。⑥髓部根中心无髓。根茎中心有髓。髓由薄壁细胞组成，．近木质部处偶见有些细胞含红棕色物质。⑦薄