《机能实验学》手术操作(专科)

家兔实验的基本手术操作技术实验内容【实验目的和原理】机能学实验常用兔子作为实验对象。我们所要做的几个兔子实验都属于急性在体实验，即“活体解剖实验方法”。这类实验要对兔子进行麻醉，并经过一定的手术，手术的好坏直接影响实验效果。本实验的目的是进行兔实验的基本手术操作技术的练习，为后面几次实验打基础。动物实验常用的手术器械及使用方法P60动物实验常用的手术器械及使用方法﹠剪刀粗剪刀用于剪皮肤、毛发，以及较硬的骨骼等组织；手术剪刀有直、弯两型，又分圆头和尖头两种，用于剪肌膜、浅筋膜、神经和血管等软组织；眼科剪刀用于剪较小范围内的神经和血管等组织。正确的持剪方法是以拇指和无名指分别插入剪柄的两环，中指放在无名指的前外方剪柄上，食指轻压在剪柄和刀口交界的轴节处。P60动物实验常用的手术器械及使用方法﹠止血钳除用于止血外，有齿的用于提捏皮肤，无齿的分离皮下组织。蚊式止血钳适于分离小血管及小神经周围的结缔组织。执钳方法与持剪方法相同。关闭止血钳时，两手动作相同，但打开止血钳时则是用拇指和食指持住止血钳一个环口，中指和无名指持住另外一个环口，将拇指和无名指轻轻用力对顶一下即可打开。P60动物实验常用的手术器械及使用方法﹠手术刀由刀柄和刀片组成，用于切开皮肤和脏器。常用持刀法有持弓式、指压式、执笔式、反挑式等，如图。﹠镊子用于夹捏组织和牵提切口处的皮肤，眼科镊子用于夹捏细软组织。P60动物实验常用的手术器械及使用方法﹠探针﹠玻璃分针﹠蛙板﹠锌铜弓﹠蛙心夹﹠动脉夹﹠静脉夹﹠气管插管﹠血管插管﹠膀胱插管﹠颅骨钻﹠咬骨剪和咬骨钳P60家兔实验的基本手术操作方法【麻碎】(捉持→称重→进针、推药）【固定】【手术】(剪毛→切口与止血→神经和血管分离）【插管】(气管插管、膀胱插管、静脉插管、动脉插管）1、常用麻醉药的种类按其使用方法分为局部麻醉药与全身麻醉药两大类。【麻碎】2、麻醉方法可分为全身麻醉和局部麻醉两种。下面介绍氨基甲酸乙酯和戊巴比妥钠两种常用麻醉药。P55P56又名乌拉坦、乌来糖、尿酯。易溶于水可配成10-20%的溶液，静脉或腹腔注射。常用于兔、狗、猫等动物，特别是对兔的作用较强，是家兔实验常用的麻醉药。该药价廉，使用方便，麻醉速度快，作用较持久，且麻醉过程平稳，对动物呼吸、循环无明显影响但动物苏醒慢，麻醉深度和使用剂量较难掌握。可诱发大鼠和兔产生肿瘤，一般用于急性实验，需长期存活的慢性实验动物最好不用它麻醉。氨基甲酸乙酯P55适用于大多数动物。易溶于水，水溶液稳定，但久置易析出结晶，稍加碱性溶液可防止析出结晶。根据实验动物不同，可配制成1-5%的水溶液，由静脉或腹腔注射。一次给药的有效麻醉时间约3-4小时，如在实验过程中动物醒来或未达到麻醉效果时，可补注原剂量的1/5，切不可随意加药，麻醉过量可导致呼吸、循环抑制，甚至动物死亡。戊巴比妥钠P55﹡家兔静脉注射麻醉法10%乌拉坦10ml/kg或2.5%戊巴比妥钠2ml/kg耳缘静脉（耳背、薄侧）缓慢注射方法：﹠兔的捉持（见图）﹠称重（称的用法）﹠抽取麻醉药（见后页）﹠辨清耳缘静脉（兔耳或板图）﹠进针（见图）﹠推药并观察P56﹠兔的捉持一手抓住颈背部皮肤,轻轻提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势；或一手抓住颈背部皮肤，另一手托住兔体下方部，使兔呈平卧位姿势。切忌捉拿兔的双耳。P471、准备用品：麻醉药、针筒、头皮针、纱布、静脉夹。2、持针及抽药方法：3、排气方法：4、注意事项：（1）注意对药标（药物名称和浓度）。（2）注意抽药量。（2）小心拿、放针筒，防止内筒脱出。（3）手不要触及针筒内筒。（4）排气时药液不要喷到电脑。﹠抽取麻醉药﹠兔耳缘静脉注射法辨清耳缘静脉（耳背薄侧外侧缘）→拔去或剪去被毛→轻弹或轻揉兔耳→压迫耳根部耳缘静脉以阻断血液回流，使血管充分扩张→左手食指和中指夹住静脉近心端，拇指和小指夹住耳廓末端，并使其拉直→P56﹠兔耳缘静脉注射法→右手持注射器由静脉末端向心端方向刺入→顺血管平行进针约1～1.5cm，放松左手拇指和食指对血管的压迫，右手试推注射器（静脉夹夹住）。判断针是否进入静脉管腔：①见静脉血回流②推药顺畅③局部无肿胀P56﹠兔耳缘静脉注射法若注射阻力较大或出现局部肿胀，说明针头没有刺入静脉，应立即拔出针头重刺；若推注阻力不大，可将药物缓慢注入。注射完毕拔出针头后，随即用纱布压迫针眼，以防止出血；注射器及时用清水冲洗。P56﹠兔耳缘静脉注射法最佳麻醉深度指标：皮肤夹捏反应消失，头颈、四肢及腹壁肌肉松驰，呼吸深慢而平稳，瞳孔缩小，角膜反射消失。P571、不同个体对麻醉药的耐受性是不同的。因此，在麻醉过程中，除参照一般药物用量标准外，还必须密切注意动物的状态，以决定麻药的用量。若已达到所需的麻醉深度，应立即停止给药，不必全部给完所有药量。2、进针部位应尽量靠静脉远心端，以备进针不成功时可再次进行。3、注意药物是否推入血管内。麻醉注意事项P574、推药时开始可稍快，过半剂量后一定要缓慢注入，并注意观察动物状况（先快后慢）。5、实验过程中如麻醉过浅，可临时补充麻醉药，但一次注射剂量不宜超过总量的1/5，且须经一定时间后才能补充。6、因麻醉药的作用，可使动物体温缓慢下降，所以，特别是寒冷季节应注意动物保温。麻醉注意事项P57--四肢及两只上门牙固定【兔仰卧位固定法】将缚绳打活结→绑在兔前肢腕关节上部和后肢踝关节上部→将两后肢分开拉直，用缚绳缠绕固定于手术台后缘的钩上→将两前肢平直放在两侧，绑两前肢的左右绳子从家兔的背部交叉穿过压住对侧前肢分别绑在手术台对侧的钩上→用一根棉绳勾住兔两颗上门齿，将兔头拉直后用棉绳在手术台的固定柱上绕两圈后打结固定。P47【颈部手术】1、剪毛：用粗剪刀--范围大于切口--平贴皮肤，逆毛的朝向剪--不要把毛提起来剪--剪下的毛放入盛水的杯中浸湿。于喉头下方至胸骨上缘之间作颈正中切口4-5cm。2、颈正中线切口：P62【颈部手术】切口方法及注意事项：＆根据实验需要确定切口的位置和大小必要时要作出标志。切口大小以便于手术操作为宜。＆用拇指和食指绷紧皮肤，另一手持手术刀以适当力量一次切开皮肤及皮下组织，直到肌层。肌层可用组织剪先剪一小口，再顺肌纤维用组织钳钝性分离。P62【颈部手术】＆各层切口大小要一样。＆注意解剖结构特点，以少切断血管、神经为原则因而尽可能使切口与各层组织纤维走向一致。＆手术过程中必须及时止血，保持手术野清晰。＆颈部切口位置不要太低，以防气胸。P62切口方法及注意事项：止血：＆出血的处理应视血管大小而定。微血管渗血，可用温热盐水纱布轻轻按压止血较大血管出血，先用止血钳夹住出血点及周围少许组织，再用线结扎止血；肌肉血管丰富，出血时要与肌组织一起结扎。＆在实验暂歇期间，应将切口暂时闭合用温盐水纱布盖好，以防组织干燥和体热散失。3、神经和血管的分离【颈部手术】＆应特别注意保持局部的自然解剖位置和比邻关系。＆遵循先神经后血管、先细后粗的原则。P62--迷走神经、颈总动脉、颈总静脉【颈部手术】用左手拇指、食指捏住颈部皮肤切口缘和部分肌肉向外侧牵拉，中指和无名指从外面将背侧皮肤向腹侧轻轻顶起，以显露颈总动脉及伴行的迷走神经、交感神经和减压神经。其中迷走神经最粗，交感神经次之，减压神经最细（细如兔毛），且常于交感神经或迷走神经紧贴。3、神经和血管的分离迷走神经、颈总动脉的分离（右侧）：P62【颈部手术】在各神经、血管下方穿以浸透生理盐水的不同颜色的细线做标记（神经用丝线，血管用黑线），以备刺激时提起或结扎之用（穿线备用，不能打结）。3、神经和血管的分离P62迷走神经、颈总动脉的分离（右侧）：颈总静脉分布很浅，位于颈部左、右两侧皮下。操作时用左手拇指、食指捏起颈部切口皮缘，向外侧牵拉，中指和无名指从外面将颈外侧皮肤向腹侧轻顶，使其稍微外翻，右手用玻璃分针将颈部肌肉推向内侧，即可清晰显露附着于皮肤的颈总静脉（紫蓝色，较粗）。用玻璃分针或蚊式止血钳钝性分离颈总静脉周围结缔组织，游离颈总静脉2～3cm，在其下方穿2根黑丝线备用（板图示）P64【颈部手术】颈总静脉的分离（左侧）：注意事项：①颈总静脉与皮肤粘连较紧密分离时应仔细、耐心，以防撕裂血管。②导管顶部不宜过尖，以防刺破血管壁。③插管过程用手牵拉、轻顶切口皮肤时不要太紧。否则，阻断静脉回流，不易看清颈总静脉。颈总静脉的分离（左侧）：P64【颈部手术】【气管插管】颈正中切口→游离气管→穿线备用→喉头下2-3厘米的气管两软骨环间“┸”型切口→气管插管（向肺端插入）→固定（打死结，并再绕在气管插管叉上结扎固定）。喉头处容易出血，如气管内有出血或分泌物，应用棉球插净后再行插管P63之后用生理盐水纱布覆盖切口，防止组织干燥剪毛→耻骨联合上方正中线皮肤切口3-5cm→止血钳夹持提起腹白线两侧腹壁→经腹白线剪开腹壁0.5cm，进入腹腔→沿腹白线向上和向下剪开腹壁3～5cm→用手将膀胱翻至体外→在膀胱底部左右侧仔细辨认输尿管（注意围绕输尿管横向走行的白色管，为输精管，与膀胱无联系；输尿管略呈粉红色，自膀胱底部向腹腔深部延伸）→【膀胱插管】P65在输尿管下方穿线→将膀胱上翻→结扎尿道（结扎前请老师确认）→然后在膀胱顶部血管较少处剪一小口→将充满水的膀胱插管（有凹陷的一端）插入→用线将膀胱壁结扎在膀胱插管凹陷处并固定→插管的另一端固定在铁支架受滴棒上方，让插管中流出的尿液能正好滴在受滴棒上。注意受滴棒的两电极不要相碰，引流管下置一培养皿收集尿液。【膀胱插管】P65【血管插管】耳缘静脉注射肝素1ml/只→颈总动脉远心端牢固结扎，近心端夹闭→近结扎处的下侧将颈总动脉剪一小口（约为血管径的1/3-1/2）→向心脏方向插入动脉插管→牢固结扎，并再将线固定在插管胶布圈上→松开动脉夹（见插管内液体随心跳而搏动）→打开三通管。1、右颈总动脉插管P62【血管插管】1、右颈总动脉插管如有渗血说明结扎不牢固，应再次用动脉夹夹闭血管近心端，重新结扎或加固。注意动作要轻柔；结扎要牢固；血管剪口尽量靠远心端；注意三通管的开与关（先关后开）.P62【血管插管】颈总静脉远心端牢固结扎，近心端可不夹闭→提起结扎线，用眼科剪于近结扎处的下侧将颈总静脉剪一小口→将静脉导管向心脏方向插入颈总静脉约2cm→牢固结扎→并再将线固定在插管胶布圈上。2、左颈总静脉插管P63【仪器连接】动脉插管--压力换能器→描记血压；静脉插管--输液管→输液；膀胱插管--尿滴棒→记录尿滴。【实验动物的处死】急性动物实验结束后，应将动物及时处死处死动物的原则是使动物迅速死亡。对狗和猫常用处死方法是用注射器向静脉或心脏内注入大量空气，造成空气栓塞，动物可立即痉挛、死亡；也可结扎气管，使其迅速窒息死亡。对兔、大鼠和豚鼠除上述处死方法外，可从颈总动脉放血或倒提起动物，用木棒用力敲击其后脑致死。小鼠处死可用左手拇指、食指捏住头部，右手抓住尾部或身体用力后拉，可使其颈椎脱臼致死。P66【实验要求】1、爱护动物和器械；2、入实验室后要清点器械及用品，不足或损坏的及时报告实验员；3、同组同学分工协作，轮流操作；4、实验结束后，兔子颈部血管结扎--解开连接管及固定带--放血--兔子放在水桶中，不得带走--清洁、整理、清点器械及用品（三通管不要学生清洗）--值日生搞卫生。注：不做实验项目，不写实验报告。预习下次课内容：呼吸运动调节的影响因素和急性呼吸功能不全