药理学实验指导

1药理学实验指导主编：秦大莲副主编：陈美娟肖顺汉黄爱平编写人员肖顺汉黄爱平吴章怀秦大莲陈美娟李万平李晓冰刘明华黄新武熊玉霞章卓张红李亮李华刘剑顾立泸州医学院药理学教研室2006.04PDFcreatedwithpdfFactoryProtrialversion前言药理学是一门以实验为基础的医学桥梁学科。药理实验是药理教学中不可缺少的组成部分，对学习和掌握药理学知识具有重要作用。通过药理实验既可以验证药理学理论，促进理论与实践相结合，加深学生对理论知识的理解，同时也有助于培养学生动手能力及严谨的工作态度和科学的思维方法，为将来的工作和科研奠定基础。实验教材是实施实验教学的重要依据，也是提高实验教学质量的重要保证。为适应药理实验教学改革的需要，提高教学质量，我们根据多年药理实验教学的经验，参考多本药理学实验教材，编写了本书。本教材有选择地介绍了常用的动物实验基本知识和技术，并安排了实验基本技能训练。内容较广泛，重点较突出，实验项目难易兼顾，既有传统的定性实验，也有定量实验；既有整体实验，也有离体实验，使学生对药理实验的方法有初步了解。同时也编写了处方与制剂，并增加了常用药物英文名称，使学生了解处方的开写方法及注意事项，掌握一些常用药物的英文名称。本书的每个实验都包括实验目的、原理、材料、方法、结果，对实验的指导主要放在“注意事项”上，并列出了复习思考题。选编的实验数量超过了实验学时数，目的是留有选择余地。有关临床前毒理学的知识在本书也作了介绍。因此，本书不仅可用作在校学生的药理学实验教材和从事药理学教学老师的参考书，同时也可为医药战线上的科技工作者提供参考。由于我们水平有限，书中一定有不妥和错误之处，真诚希望广大教师、学生和读者批评指正。（秦大莲）PDFcreatedwithpdfFactoryProtrialversion目录第一章药理学实验教学的基本要求………………………………………4第二章常用实验动物操作基本技术实验2.1常用实验动物捉拿、固定………………………………………6实验2.2实验动物的编号和分组…………………………………………7实验2.3实验动物的给药方法……………………………………………8实验2.4实验动物用药量的确定及计算方法……………………………10实验2.5常用实验动物的采血及处死方法………………………………10第三章药理学总论实验实验3.1药物半数致死量（LD50））的测定………………………………14实验3.2药代动力学参数的测定…………………………………………15实验3.3药物血浆半衰期的测定…………………………………………16实验3.4阿托品对乙酰胆碱的竞争性拮抗作用及pA2值测定…………18第四章传出神经系统药理实验实验4.1传出神经系统药物对麻醉犬血压的影响………………………21实验4.2传出神经系统药物对麻醉兔血压的影响………………………22附血压测定法………………………………………………………23实验4.3传出神经系统药物对离体肠肌的作用…………………………26第五章中枢神经系统药理实验实验5.1药物的镇痛作用…………………………………………………27实验5.2药物对小鼠自发活动的影响……………………………………29第六章心血管系统药理实验及利尿药实验实验6.1强心苷对离体蛙心的作用………………………………………29实验6.2呋塞米对家兔的利尿作用………………………………………31第七章抗炎药药理实验实验7.0地塞米松对蛋清诱发大鼠足跖肿的影响………………………33第八章抗微生物药理实验实验8.0链霉素的毒性反应及解救………………………………………35第九章设计性实验………………………………………………………36第十章临床用药病例讨论………………………………………………38第十一章处方与制剂………………………………………………………44附录1BL-420智能型生物信号显示与处理系统………………………49附录2实验动物组织标本的制备………………………………………52附表1常用实验动物的主要生理生化常数表…………………………55附表2常用抗凝剂浓度及用法表………………………………………57附表3常用非挥发性麻醉药的用法及剂量表…………………………58附表4常用生理溶液的成分和配制……………………………………62附表5人和动物间按体表面积折算的等效剂量比率表………………63PDFcreatedwithpdfFactoryProtrialversion第一章药理学实验教学的基本要求一、药理学实验课的目的药理学实验是药理学教学的一个重要组成部分。实验课目的：（1）通过实验，使学生掌握药理学实验的基本操作技能和基本实验方法，了解获得药理学知识的科学途径；（2）验证药理学中的某些重要的基本理论，巩固和加强对理论知识的理解，更牢固地掌握药理的基本概念。(3)培养学生的科学思维方法、严谨的科学工作态度和实事求是的作风，训练学生能客观地对事物进行观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力。二、药理学实验课的要求药理学实验课包括实验操作、观察与记录、结果的整理和实验报告的撰写等环节。为了提高实验教学效果，要求做到以下几点：⒈重视预习实验前应仔细阅读实验指导，明确实验目的，领会实验原理，熟悉实验方法、步骤及实验仪器的操作，做到心中有数，避免实验中出现忙乱和差错。⒉认真对待实验全过程实验时严格要求，加强基本技能训练，培养独立操作能力。克服依赖性和“君子动口不动手”等不良现象。严格按照实验步骤进行操作，准确计算给药量，认真仔细地观察实验过程中动物出现的各种反应，客观记录药物出现反应的时间、表现和转归，理论联系实际进行思考。通过实验，要求掌握动物的捉持方法、常用的给药方法、剂量换算及观察和记录主要的药理、生理或生化指标；掌握常见的实验方法如血压的测量和常用的实验设备如注射器、天平、生物信息处理系统软件的使用等。⒊实验结果的整理药理学实验结果有计量资料如血压、心率、心收缩力、自主活动次数等数据；计数资料如动物存活数、阳性或阴性反应数等数据；生物信息处理软件记录的曲线等。根据不同的资料选择相应的统计学方法，常用的统计学方法有两组间t检验和x2检验、方差分析等。生物信息处理软件记录的曲线和图形要进行剪辑，取其精华汇总打印，并注明动物的种类、体重、性别、日期、实验题目、给药剂量和途径等。测量资料和计数资料应列表填入，使结果一目了然。⒋实验报告的撰写实验报告是培养学生分析和综合概括问题的能力，也是文字表达能力的一种训练。每次实验结束后要求用统一的实验报告本或纸写报告，交给带教老师评阅。实验报告内容包括：①实验题目②实验目的③实验方法：简述，即用简练的文字写明大体操作步骤，着重说明所用动物或标本、给药剂量及途径、如何观察和记录实验结果等。④实验结果：将实验所得数据如实记录，必要时填入表中，如为图形资料，应作好标记及剪贴。⑤分析讨论：针对实验中的现象和结果进行分析推理，逐步推导出结论，不可离开实验结果空谈理论。实验中如得不到预期结果或与其它组实验结果不一致，则仔细分析其原因。⑥结论：从实验结果归纳而得的概括性判断，应与实验目的相对应，文字简练、明确、严谨，不可超出本实验结果所说明的问题。实验报告要注意科学性和逻辑性，文字要简练、整洁，杜绝互相抄袭现象。PDFcreatedwithpdfFactoryProtrialversion三、遵守实验室规则⒈实验室保持安静、整洁，不得喧哗，营造良好的学习环境。⒉各组实验前、后应清点器材和仪器，不得随意与别组调换，以免混乱，如有损坏的器材向带教老师或实验室技术人员报告，及时更换。⒊实验要认真，分工合作，有条不紊地进行。⒋厉行节约各种实验材料。如按实验所需选取动物，不得浪费；对动物要爱护，实验完毕放回指定的笼内，死亡动物和废物丢入指定场所；玻璃仪器应轻取轻放；药品按使用量吸取，不得污染。实验完毕要整理器材，洗净擦干，妥善安放；如有破损应报告带教老师，按有关规定处理。⒌注意安全，严防触电、火灾、动物咬伤及中毒等事故发生。⒍实验完毕，安排值自生搞好清洁卫生和关好门窗。四、实验动物的要求⒈动物的选择常用的实验动物有小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、狗等。首先要求选用健康的正常的动物。实验动物等级分为普通（CV）、清洁（CL）、无特殊病原体（SPF）、无菌（GF）和悉生（GN）四个等级，根据不同要求选用不同的实验动物。例如：降血脂—选用鹌鹑、兔、大鼠等；测血压—用猫、狗、大鼠、家兔等；镇痛（热板法）—用雌性小鼠；抗炎—用雄性小鼠或大鼠等等。⒉动物实验分为整体和离体实验整体实验：观察药物对某些系统或器官的作用和药物在机体中吸收、分布、转化及排泄过程；离体实验：用动物器官、组织、细胞等在体外进行。五、实验设计原则⒈随机原则按照机遇均等的原则进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少，而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。⒉对照原则空白对照（指在不加任何处理的条件下进行观察对照）；阴性对照也称假处理对照（给予生理盐水或不含药物的溶媒）；阳性对照也称标准对照（指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照）。⒊重复原则能在类似的条件下，把实验结果重复出来，才能算是可靠的实验，重复实验除增加可靠性外，也可以了解实验变异情况。（秦大莲）PDFcreatedwithpdfFactoryProtrialversion常用实验动物捉拿、固定及给药方法在进行实验时，为了不损伤动物的健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，首先要限制动物的活动，使动物处于安静状态，工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴，不能恐吓动物，同时，要爱惜动物，使动物少受痛苦。一、小鼠小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定，如尾静脉注射架或专用小鼠固定筒。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作，如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。二、大鼠大鼠的门齿很长，在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤，所以，不要突然袭击式地去抓它，取用时应轻轻抓住其尾巴后提起，置于实验台上，用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内，这样即可进行尾静脉取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃等操作时，实验者应戴上棉纱手套(有经验者也可不戴)，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾巴尖端皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。三、家兔家兔比较驯服，不会咬人，但脚爪较尖，应避免家兔在挣扎时抓伤皮肤。常用的抓取方法是先轻轻打开笼门，勿使其受惊，随后手伸入笼内，从头前阻拦它跑动。然后一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一只手托其臀，或用手抓住背部皮肤提起来，放在实验台上，即可进行采血、注射等操作。因家兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，或有人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。在实验工作中常用兔耳作采血、静脉注射等用，所以家兔的两耳应尽量保持不受损伤。家兔的固定方法有盒式固定和台式固定。盒式固定适用于采血和耳部血管注射，台式固定适用于测量血压、呼吸和进行手术操作等。四、豚鼠豚鼠胆小易惊，抓取时必须稳、准、迅速。先用手掌扣住鼠背，抓住其肩胛上方，将手张开，用手指环握颈部，另一只手托住其臀部，即可轻轻提起、固定。五、青蛙和蟾蜍通常以左手握持，用食指和中指夹住左前肢，用拇指压住右前肢，将下肢拉直，用无名指及小指夹住。抓取蟾蜍时，可先在蟾蜍体部包一