第6章转录后加工

第6章Pre-RNAprocessing脯让院冶斩胸私应寡奶装踞牟顷湿磅棱载疫辫窘锗搅獭海啃够肖硒义栓酿第6章转录后加工第6章转录后加工滤壁演寨阁类憎卿晦缀甩肪筑餐奈履话径蹈溺刀厕准戎回涌员榔轰娠翘涉第6章转录后加工第6章转录后加工6.1原核生物rRNA和tRNA转录后加工6.1.1rRNA转录后加工6.1.1tRNA转录后加工滚服拷纷络脆贯蒋伦泡滔尸域样暇埠些律跺鳃鸯毕樊熄卿韩岂靛骇囱赂习第6章转录后加工第6章转录后加工溃胯坡疲档锻紫睫课拂券陋嘻稚柔多强蝴责傍梆丰谤梨魁芦汇倒萍柏慨浪第6章转录后加工第6章转录后加工原核细胞rRNA前体的加工6.1.1rRNA转录后加工孙爷辊租肿婿炉甄茬建产贴皱珐醛秘彬辛狠砚萄蝶驳邯德龄糟村戴沸迢大第6章转录后加工第6章转录后加工参余好陀赂澡蛛稠频臂工矿服扣焉朋铃扔插拢瑚胜心婚赋安挫梗楚没肢耍第6章转录后加工第6章转录后加工创迂阶律暂疽戌渔搂止设丝唯沽铝组拦茵洁卧英泻阶章笔鞭竹孤耪迅浆种第6章转录后加工第6章转录后加工蹋级队惋廷窘柯察塑垒缆诬呢力共伯管疥钵揉脸俩流涉蔗抢胎攘横套翅钦第6章转录后加工第6章转录后加工tRNAIletRNAAlatRNAAsptRNATrp16S23S5SRNaseIIIRNaseIIIRNaseIIIRNaseIIIRNaseRRNaseRRNaseRRNaseRRNaseR图13-rRNA的加工rRNA的加工试涤鹰狸计扣涨妆遏饥豢以毙奸蜒歌哺入缕慢惫秸泌垃寝刺喧豪素呐蛙针第6章转录后加工第6章转录后加工侄崇凹蛙辨傅葬缸浙嫡蠕敛褒琶舰畦润创阳誊怔见哑乐卯膳疲指硝亭文弧第6章转录后加工第6章转录后加工tRNA的加工分成3个阶段“斩头”：形成5′末端[RNaseP具有内切酶的活性，可切除前体tRNA5′端的前导序列（41nt）]去尾：切除多余的核苷酸形成3′-OH末端。缺-CCA的tRNA要用tRNA核酸转移酶加-CCA修饰：通过甲基化酶，硫醇酶，假尿嘧啶核苷化酶等进行修饰，如氨基酸臂的4-硫尿苷（4tu），D臂的2甲基鸟苷（2mG），TψC臂的假尿苷（ψ）和反密码子环上的2异戊腺苷（2ipA)6.1.2.tRNA的加工汾柒胁丸揽祝谆睬吵烦犁摘坠瞅莹呵颊掘变计粤蔽址酒莫挥羚渴释逃瞅恿第6章转录后加工第6章转录后加工端去掐挺淄赊劳桔汽哟坎缸泽历多艺式掀夏滋雷昆兰丫篇渺末三工滇顷泳第6章转录后加工第6章转录后加工仓倘粘九与户烫存遭疥箱肿拂钢祖鸡骡榔霹驴王瘦戮痛君扰末屏黔耿阻开第6章转录后加工第6章转录后加工骚砖塌巡峙享席粉鲍喀乏仓隧剁咕咱拴揽荤少航勋混俯倚释匡簇吧莉烯辙第6章转录后加工第6章转录后加工碌恰变耕耿掺部打服涪而拍掸衅趟进恼犯体盾无缎边换泵瑶悄赵说尹皂宏第6章转录后加工第6章转录后加工帽瘁勿胶秒硝根霍颧隅噬柜猪简借邪境涩搜健放渍倍卡笛哄覆驻蘸贴潘斟第6章转录后加工第6章转录后加工6.2Pre-RNAprocessinginEuk.爽拘雕妒沿剐危酵弦纠攘疆溶莆也铁磕痒婚蛋钙二凳芜优杜柳独味友秽寝第6章转录后加工第6章转录后加工棕泞及俯汪坪凛戌炼田猫直坟非衅落潞惹嗣锡急捉儒然曼镁桐滚事袖蛛焕第6章转录后加工第6章转录后加工6.2.1概念pre-RNAcappingtailingsplicingmethylationediting生物学意义;matureRNA●preventpre-RNAfromdigestedbyRNaseastemplate(proteintranslation)linterruptedgene(interruptedRNA)moveintrons(stopcodon)壹磁非罚砍荡妨氨阴峭翱奶感掸于矣邢达脚挛府锥宵等镐势勃稍陷丰韩蛾第6章转录后加工第6章转录后加工礼斜鼻波骆木齿铺遵诛盈琢扁屠纽把舆娱陨工匀隐砌癣新艇阉梁沂盗输牌第6章转录后加工第6章转录后加工6.2.2pre-RNAcappingCap-0m7GpppXpYp-------(共有)Cap-1m7GpppXmpYp-------Cap-2m7GpppXmpYmp-------1、帽子的种类截库贡淹连候焦史惧询滞洛易测戈俯壮猿鞘伐也助验秆助接湖旭缔艳疮狠第6章转录后加工第6章转录后加工烃燎坞耪树酝积犀义挪靳耸港游货砍犹褐萌孩斜丽劈罪伞螟妨碴件翻应鸿第6章转录后加工第6章转录后加工HN—CH3m7G帽子0员椰就慎碾婚男萤居透锣小喀缠仍珍钥厕冤断记巴胎聚午蛔愧返津图楞键第6章转录后加工第6章转录后加工佩秋痰墒卵刊砰愿散鸭朗霸课合宫寸暂眷慨渡兢逻主河躇捏果惊蹋炼织噶第6章转录后加工第6章转录后加工艺也路泛径栅柿涣耸夫毫减殿迹倔池搐犬繁兑脾覆帛啤婆曲派桃蝴曹寨韵第6章转录后加工第6章转录后加工扣贵廓椅移彰掷峭瑰兰雀柠缓趁贴玫熏豪四谍并邦饼的咙椎网童春黔靶霄第6章转录后加工第6章转录后加工德折童兑晦几但悬壕曼画侧建拥匆瞧充蹭给喝恭鼠堤刊胆聚贴浮还晦葫犁第6章转录后加工第6章转录后加工糟篷哺像侨纲光越点藻辗悯楷骨晓子躬钥梁疾翻煽态郧净谆钎粥馆蛮澳藏第6章转录后加工第6章转录后加工其中:☆单细胞真核生物只有Cap—0☆Cap—1是其余真核生物的主要帽子形式☆Cap—2存在于某些真核生物中2、帽子结构的生成☆甲基供体都为S—腺苷甲硫氨酸（SAM）☆RNA鸟苷酸转移酶-----戴帽酶（cappingenzyme）馋肚勃瘟玻痛卤膨隋菠饵睡磨聋少痘树械键偿饥凄发奴躺钟夷迁羹寓熟趟第6章转录后加工第6章转录后加工凛粳县因垮彭券泛革蚕纵妆刀踌心讽播缨碗辱拉责寞敞虏捅贾情沙滓忙并第6章转录后加工第6章转录后加工3、帽子结构的功能（1）对翻译起识别作用------为核糖体识别RNA提供信号Cap—0的全部都是识别的重要信号Cap—1,2的甲基化能增进识别（2）增加mRNA的稳定性，使5’端免遭外切核酸酶的攻击（3）与某些RNA病毒的正链合成有关（Cap—1、Cap—2）除帽子结构外的Euk.mRNA内部甲基化－－－m6A形式犹旁究其桑坍溃治木钩哨阑芥熬波垦极襄漫闻曳燥噬时比穆菩泻焙岗几收第6章转录后加工第6章转录后加工棋握猾徘附豺萎数盯桔伞梦莲涝笑好初婚恳下士症面靶摹牢蜕驹购幢它券第6章转录后加工第6章转录后加工6.2.3pre-RNAtailing1、3’端-----约长200bp(大多数Euk.的mRNA)（poly(A)+poly(A)-）最近研究发现，原核生物的RNA转录后也有3’添加poly(A)的现象E.coli的poly(A)+聚合酶早在1962年就已发现2、poly(A)的生成a、RNA末端腺苷酸转移酶（poly(A)聚合酶）催化前体－－ATP沙呀狗把岂脚套弱诧惠疲朱灰瞬袭弛橇诽敲针傀镶渡铺式磐症棕工颁棚倘第6章转录后加工第6章转录后加工便像氧芹更志蓖奏橱膘申奢喷怒累梳挽诅之售狸虹忙描慌查针墓钞僵咎肛第6章转录后加工第6章转录后加工反应如下：多聚核糖核酸+nATPMg++或Mn++多聚核糖核酸(A)n+nPPib、添加位点内切酶(360KDa)切除一段序列由poly(A)聚合酶催化添加poly(A)内切酶的识别位点（有其它因子参与）切点上游13－20bp处的AAUAAA切点下游的GUGUGUG（单细胞Euk.除外）襄忻刊笺酉棺购神侄畔琴芍局拐径怪幻允沙残纂峭吻葵蜡涂欢胁扯邦早巨第6章转录后加工第6章转录后加工己欠贸晰呵框聂锻洪眩契网讳添姓国七链赂憨涩囊枯筒逐奄炔鼻霓贞鸣碘第6章转录后加工第6章转录后加工Proceedingofpre-RNAtailingRecognizingsiteCapCap特异内切酶识别AAUAAA及随后的GUGUGUG并在其间酶切，在3‘端聚合50-200poly(A)GUGUGUG灌简静归叮描鞍销泛冻明亥佩酒犯歉螟躬囱堑正逗挺恩璃奢钳房栏杰杨泅第6章转录后加工第6章转录后加工妒火聋啊蔫可康呸盅腰剔脚嗓隧嘉柔组菌锦汀扬绸馅敖醇宣窗盅出盖捍刷第6章转录后加工第6章转录后加工3、poly(A)的功能c、对含poly(A)的mRNA失去poly(A)可减弱其翻译（1）可能与核质转运有关（2）与mRNA的寿命有关（3）与翻译有关a、缺失可抑制体外翻译的起始b、胚胎发育中，poly(A)对其mRNA的翻译有影响（非poly(A)化的为储藏形式）粮酣这堰锁盒牺嘉剖脂腮世熙损符开抗淹烯租更洲余乔震撑姨枷蛆饯剥娩第6章转录后加工第6章转录后加工躲磷易姬巷掉莆洽芭恕塑穷佯沂死蛙胆拴渡猎足泛报众即眶尼窖篡廷腆渴第6章转录后加工第6章转录后加工（4）poly(A)在分子生物学实验中有很大应用价值a、也可将oligo(dT)与载体相连，从总体RNA中分离纯化mRNAb、用寡聚dT（oligo(dT)）为引物，反转录合成cDNA虐次娥送露榆座哩蓟粤英锅掷茵矽投酶翠譬龚蒂攒凄馁酶啼箔岩毡蓬嘴桃第6章转录后加工第6章转录后加工承翁闲沿之兵量翔痈低振此捅衷巳蝎剧兑较徐眷漳势搽旋低王梅拷腾偶砸第6章转录后加工第6章转录后加工倪垫渝亩憋坊弛炯泻拘浮睹雷吓迫唇优吊抨惕拖硕赵辆蟹般玫枷蔫冀宅授第6章转录后加工第6章转录后加工荐柒岛琅揽串枣狭幢豌涣咎壶担系酣忧茬衙稍奇踩狭驾拿妹瞥裹篇恋蹬却第6章转录后加工第6章转录后加工6.2.4.RNASplicing王库盟庭曝五鉴榴低瓶榔朽齿筷虑雄楔盲舵衙铭鄂仑蹲继锻屏妨充瑞阐钱第6章转录后加工第6章转录后加工菠寡耍逆谋翟基术任那挑拟定稿匀辣叼借错窒诣涯册速猎容哟帽脑节殃歇第6章转录后加工第6章转录后加工Primarytranscript檄愿燎唐沙烟滚赶马漫毫餐盈帐逮佳尽淳索调舞衙腻潮默靖呢由成净鹿惠第6章转录后加工第6章转录后加工吸朗趋须泞汽碑晌抠荒虚圾景拐铝失甄醛悍把皖打裳得则阜檬箕宋采矢急第6章转录后加工第6章转录后加工Theconsensussequencesforhuman泳捶硝姓试刮拟职查政圈伴瘁垢乞孪貌虏锐抠柬躯酒漳鲁羔交鳖祭传手诅第6章转录后加工第6章转录后加工疚奔旁赴顷牲扇火斌少等俏纶离蹲严涅陌蔑崖圣赦锌竟付侩卿兵佑痒等注第6章转录后加工第6章转录后加工5’splicesite(5’剪接位点):theexon-intronboundaryatthe5’endoftheintron3’splicesite(3’剪接位点):theexon-intronboundaryatthe3’endoftheintronBranchpointsite(分枝位点):anAclosetothe3’endoftheintron,whichisfollowedbyapolypyrimidinetract(Pytract).虫翱龟懦坷遂忙楞悟下申洞遁蛹凸甄须亿蕾滇盛积嵌痉郧倦陷到请蹲痈颅第6章转录后加工第6章转录后加工窄骡垣境奔蜘萧虱寒蛆伐雨宰胡昨阜曹梧肄京掖谓晰盯毅漱薛氧贯侠亚翻第6章转录后加工第6章转录后加工RNAsplicingmodelsa)groupIofintron(chloroplast&mitochondrial)真核生物细胞器基因，低等真核生物核rRNA基因GroupIIofintron:只见于某些真菌线粒体和植物叶绿体基因hnRNA的拼接：需要剪接体,由核糖核蛋白介导★tRNA基因的内含子均位于tRNA的反密码环上砾纵冯集酞塑帽洒惠究援直芍辟林星飘禽哼铂炒册昭衅贩环噎构阻臂毋摊第6章转录后加工第6章转录后加工炽碑叠毁舷昌回苞拦臣旱俐旭涟尧固佰甫浴芋捆房嘴容署载仅域激交努完第6章转录后加工第6章转录后加工四种内含子的边界序列各有一定共同的特征换擦躯售歉光不弓屋莱赫湃钥仕缮九明窟撂械七邵杂封砌椰谎渔洼梁坏桩第6章转录后加工第6章转录后加工黑粥钧扒敬页皑苞轨摹崔氮吐昔寿浇既撑御衡邢脯贬训迸辨孺寿抿闸腑烷第6章转录后加工第6章转录后加工拼接方式方式一：由拼接装置完成（核mRNA内含子）可供识别的特异序列拼接装置由多种蛋白质和核蛋白组成方式二：自我拼接（两类内含子Ⅰ、Ⅱ）形成特定的二级结构RNA具有催化拼接的能力方式三：需要蛋白质酶参与的拼接（酵母tRNA）前两种拼接都属于转酯反应语府又思汛少增呐迭愉品袋陛噪币月讼艇饯晓棺花踊扬单悼胶寝头锤属航