福林酚法测定总酚含量-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican-Li

1福林酚法测定总酚含量-操作流程图2017.10【安全事项】本实验所用的福林酚试剂（或称Folin酚试剂、Folin-Ciocalteu试剂）有严重的腐蚀性。【测定方法与操作流程图】【文献】XicanLi,QiupingHu,ShuxiaJiang,FeiLi,JianLin,LuHan,YulingHong,WenbiaoLu,YaoxiangGao,DongfengChen.FlosChrysanthemiIndiciProtectsagainstHydroxyl-inducedDamagestoDNAandMSCsviaAntioxidantMechanism:AChemistryStudy.JournalofSaudiChemicalSociety,2015,19,454-460【溶液配制】(1)0.25mol/L福林酚试剂的配制：取原装的福林酚试剂（浓度为2mol/L）2毫升，加蒸馏水14毫升，充分混合，得0.25mol/L的福林酚试剂,共16毫升。(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3•10H2O溶3.0克，溶于20毫升水中，混匀即得。(3)连苯三酚1标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10毫克．用甲醇溶解并定容到50毫升，得0.2毫克/毫升的连苯三酚标准液。(4)样品液的的配制：精确称取待测样品10毫克．用甲醇2溶解并定容到10毫升，得1毫克/毫升的样品液。【连苯三酚标准曲线的绘制】0.2毫克/毫升样品液加样量(x毫升)甲醇(05-x)A760值A760平均值SD0.00000.500.030.0386670.0174421本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。2也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶解性而度。200.500.02300.500.0630.0040.010.490.150.1666670.0158610.010.490.1620.010.490.1880.0080.020.480.290.2946670.0036820.020.480.2990.020.480.2950.020.050.450.7490.7290.0167530.050.450.7080.050.450.730.0320.080.421.0881.0920.004320.080.421.090.080.421.0980.040.10.41.3931.3943330.0318570.10.41.3560.10.41.4340.0480.120.381.7471.6360.0923070.120.381.5210.120.381.640.060.150.351.9831.9276670.0415160.150.351.8830.150.351.917图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平行测三次）（以连苯三酚为例，A=32.16733*C+0.06012,R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06毫克/毫升，A值在0.039-1.928之间）。【说明】(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；(2)Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2mol/L。也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4·2H2O),25g钼酸钠(Na2MoO4·2H2O),700毫升蒸馏水，50毫升85%磷酸及100毫升浓盐酸装入带回流装置的2000毫升圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50毫升蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000毫升，过滤。滤液呈微绿色。置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。（钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂，都比较贵)