影响酶活性的因素实验设计

影响酶活性的因素设计性实验唾液淀粉酶对淀粉的消化一、目的1、了解酶的特异性。2、了解温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素对酶反应速度的影响。3、掌握检查酶的特异性，酶的激活剂和抑制剂影响酶反应速度的方法及原理。二、原理酶是生物体中具有催化功能的蛋白质，因此也叫生物催生剂。生物体内存在多种多样的酶，从而使生物体在温和的条件下能迅速完成复杂的生物化学反应。特异性酶具高度的特异性。所谓特异性是指一种酶能对一种化合物或一类化合物起催化作用，而不能对别的物质发生催化反应。淀粉和蔗糖无还原性。唾液淀粉酶水解溶粉生成有还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性的葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉水解，用Benedict试剂检查糖的还原性。温度和pH温度和pH对酶的活性有显著的影响，使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。大多数动物酶的最适温度为37℃~40℃，植物酶的最适温度为50℃~60℃能使酶表现其活性最高时的pH值称为该酶的最适pH值，不同酶的最适pH值不同。酶的抑制剂与激活剂酶的活性常受某些物质的影响，能使酶活性增加的物质称为酶的激活剂，能使酶的活性降低的物质称为酶的抑制剂。氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。三、材料、试剂与器具（一）试剂蒸馏水1%淀粉液1%蔗糖液0.1%尿素液大豆尿素酶溶液0.1%CuSO40.1%HgCl20.1%NaCl1MNaOH0.5MH2SO4纳氏试剂班氏试剂碘液各种pH缓冲液：5.0；6.8；8.0（二）器具控温水浴锅（每个实验室3个）制冰机电磁灶不锈钢锅白瓷板试管、滴管、移液管（1-2ml）四、操作步骤（一）酶的特异性管号1231%淀粉（滴）1010—1%蔗糖（滴）——10稀释唾液（滴）5—5煮沸过稀释唾液（滴）—5—PH6.8缓冲液（滴）101010各管混匀，置37℃水10minBenedicty试剂（滴）202020取试管3支，编号，按下表进行操作将上述各试管放沸水中煮3-5min观察并记录现象解释结果（二）酶的激活剂及抑制剂取试管3支，编号，按下表进行操作管号1231%淀粉（滴）101010稀释唾液（滴）1010101%硫酸铜溶液5——1%氯化钠溶液—5—蒸馏水101010各管混匀，置37℃水10min碘化钾——碘溶液（滴）333观察并记录现象解释结果（四）pH对酶活性的影响取3支试管，按下表编号后进行实验。管号1231%淀粉（滴）101010PH5缓冲液10__PH6.8缓冲液_10_PH8.0缓冲液__10稀释唾液（滴）101010（1）摇匀后，将各管置于37℃水浴中处理（2）每隔1min从pH6.8的试管中取出1滴,反应液滴于预先滴加稀碘液的白瓷板上，观察其颜色变化。（3）待颜色呈棕色时，向各管中加稀碘液1-3滴。观察各管颜色，比较各管中淀粉水解的程度，解释pH对酶活性的影响观察并记录现象解释结果