MCI资料大全-填料特性-使用方法及装柱等注意事项

MCI资料大全-MCI柱以及MCI填料MCIGEL是指中压色谱分离凝胶，是MiddleChromatogramIsolatedGel的缩写，一般是指聚合物基材的小粒径色谱填料(ChromatogramPolymer)，通称为MCIGELCHP填料，广泛的应用于天然产物和发酵产物、有机小分子的分离。常用的MCIGELCHP有聚苯乙烯/二乙烯基苯型(PS/DVB)和丙烯酸酯型两种聚合物类型的填料。化学结构支配着合成吸附剂的疏水性，吸附剂的疏水性是根据目标物化学性质来选择吸附剂类型的重要依据。一般而言，聚苯乙烯型聚合物填料适合于分离中等疏水性的化合物，由于具有苯环结构，所以与其他类型的反相填料相比，具有不同的分离选择性。聚甲基丙烯酸脂亲水性强，适合分离具有一定极性的物质。这类聚合物基材填料的优点是在pH1-14的范围均可使用。相对于硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的疏水性，与硅胶基材反相填料具有不同的分离选择性。聚合物基材的填料可以在极端的酸碱溶液（如1NNaoH、Hcl）和有机溶剂（包括甲醇，乙醇，丙酮，异丙醇，乙腈，四氢呋喃等）中都可保持球体结构和性能的稳定，有利于开发工艺和优化分离条件，从而达到高分辨率和高产品回收率。由于其化学稳定性，非常适用于FDA规定下CIP/SIP要求的清洗方案。聚合物基材填料可以制成不同的粒径供客户选择。当您分离纯化前考察填料对样品的选择性时，可以选择小粒径的填料制成的高压柱。50um左右粒径的填料可以在常压下使用，借助于中低压层析系统，分离效果更佳。同时，中压色谱分离凝胶相比高压色谱填料价格更便宜，对设备要求相对较低，更适合较大规模的工业纯化使用。由于中压色谱分离凝胶具有诸多优点，所以在天然产物和发酵产物、有机小分子的分离等领域具有广泛的应用。与此同时，专业的色谱器材供应商（如H&E）还开发了与此相配套使用的专用层析柱和层析系统，极大地提高了广大科研，生产用户的分离效率。分离原理：MCIGELCHP20p应该是吸附为主，其实同C18一样，只不过结构不同，但两者无法在同一个条件下进行比较。MCI是凝胶的一种，主要是反相和分子筛的原理。MCI的预处理：将MCI加入到烧杯中，加入适量甲醇，搅拌，使其浸泡30min，将甲醇倒出，加入蒸馏水充分搅拌，浸泡30min，准备装柱。装柱：搅拌使MCI混旋均匀，搅拌均匀后，缓缓将其倒入准备好的玻璃柱内，活塞打开，倒入速度稍微快一些，在倒入的过程中，要不断的在烧杯里轻轻搅动，以防止MCI沉降于底部，尽量不要中断，一次性倒入，可以很好地防止断层。当柱子装好后，用蒸馏水冲洗MCI柱。上样：用MCI柱分离物质时一般使用梯度乙醇或甲醇洗脱，因此上样时应样品应用水或低浓度的相应的醇溶解，然后将样品均匀的加到色谱柱上。洗脱：洗脱时采用梯度醇浓度由低到高洗脱，分别收集洗脱液，再生：洗脱完成后，用无水乙醇或甲醇冲洗MCI柱，若填料污染严重，用丙酮冲洗柱子，若还不行可考虑用一定浓度的酸或碱冲洗柱子，冲洗液的PH值应控制在1-13内，一般采用0.1mol/L的NaOH溶液冲洗。用酸或碱冲洗好后将柱子用蒸馏水洗至中性，然后再用甲醇洗脱两个柱体积，用甲醇保存柱子。相关说明：MCI系列精细分离填料是在三菱化学Diaion和Sepabeads大孔吸附树脂基础上设计的，因为基于现代的HPLC高压液相色谱分离技术，较小的颗粒有更高的色谱分离性能，广泛地用于分离天然产物和发酵产物的分离。其特点如下：1、卓越的性能，球型颗粒，颗粒尺寸分布很窄；2、用三菱化学的优良技术和严格的质量控制，提供高水平高质量MCIGEL系列填料；3、粒度范围广，从4μm到300μm，可应用于装填分析和制备柱；4、品种非常齐全，其中MCIGELCHP20P（75~150μm）是最为广泛使用的型号。MCIGEL适用于从分析制备到工业规模纯化填料类型产品型号粒径分布平均粒径比表面积细孔容积最频度半径MCIGELCHP10M4μm4μm640m2/g1.45ml/g14.0nmMCIGELCHP5C9~11μm10μm540m2/g1.39ml/g14.0nmMCIGELCHP55A15~20μm18μm580m2/g1.54ml/g14.0nmMCIGELCHP55Y25~35μm30μm590m2/g1.55ml/g14.0nmMCIGELCHP20Y25~35μm30μm560m2/g1.67ml/g22.0nmMCIGELCHP20P37~75μm，75~150μm55μm520m2/g1.17ml/g30.0nm聚苯乙烯型MCIGELCHP20SS63~150μm100μm540m2/g1.35ml/g29.0nmMCIGELCHP2MGM4μm4μm460m2/g1.09ml/g27.0nmMCIGELCHP2MG9~11μm10μm590m2/g1.13ml/g20.0nm甲基丙烯酸酯型MCIGELCHP2MGY25~35μm31μm510m2/g1.15ml/g23.0nm用于除叶绿素效果很好，至于分离原理目前为止还不是很透彻；MCIGEL只是个品牌，大家说的应该是CHP20P75～150um，这个东西是聚苯乙烯基的反相树脂填料，不推荐用石油醚做洗脱剂，这样会弄坏这个树脂。听说MCI柱只能用甲醇-水系统过柱，最后用丙酮洗。所以只能用于能溶于甲醇-水的样品了。而且MCI柱是反复使用的，所以上样之前要先过滤，甲醇-水不能溶的都不能上柱。一般用来分中等极性到大极性的东西,如果丙酮不能洗脱的东西上上去,对柱子伤害很大。MCI一般用来去处极性小的成分中的叶绿素，对石油醚部分和氯仿部分去处叶绿素的效果很好,我们过柱的一般方法见上所述。应用领域：SBCMCIGEL可以替代ODS-C18键合硅球固定相用于反相色谱法分离，它比C18硅胶具有更高的化学稳定性，可以在强酸、强碱介质下使用，可以用多种有机溶剂作为洗脱剂，可以在较高的浓度下使用，寿命非常长。SciBioChemMCIGEL与相同粒径的C18固定相的柱效相当，无论对极性或非极性样品，几乎无不可逆吸附，非常适用于制备色谱分离纯化微量物质。SBCMCIGEL反相色谱填料吸附量高，颗粒均匀，机械强度好，不易破碎，残留物少，预处理方便。提供的粒径从20um到150um，用于生物，制药，环保，食品等领域的研究和工业化制备纯化。主要技术指标如下:化学性质:交联高分子聚合物，表面非极性和弱极性两种型号规格。分为F型和R型两种规格:F型相当于C18硅胶，R型相当于C8硅胶。外观:白色超纯微球。孔特征:比表面积550m2/g，平均孔径120A。粒度范围:75-150u、50-70u、30-50u、20-30u四种规格耐压性:2-3Mpa下长期使用。分离性能：柱效能：1.以番茄红素试液进行色谱性能测试，每米塔片数＞10000N。2.分离紫杉醇浸膏：每米塔片数＞10000N，紫杉醇/三尖杉宁碱的分离系数大于1.3。化学稳定性:pH值1～14稳定，在＜10％NaOH、10％HCL、10％H2SO4、10％H3PO4溶液中稳定:在乙醇、甲醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氢呋喃、溶剂油、苯、甲苯、吡啶等有机溶剂或水溶液介质中长期稳定热稳定性:空气介质150℃以下使用；有机溶剂介质80℃以下使用附：使用方法：1．将色谱填料浸泡在丙酮或乙醇中。2．充分搅拌成匀浆装柱，用选定的上述溶剂冲洗压缩柱床层。3．用2-3倍柱体积的上述溶剂冲洗柱，至填料中的交联剂洗脱干净，检测标准为滴加至自来水中不出现浑浊，或HPLC检测不出峰。4．用选定的洗脱液平衡色谱柱，备用。另：层析流动相选择可以将HPLC或反相TLC的条件套用。流动相选择适用于所有乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等等。所有酸、碱、盐水溶液配比的溶液。[疑难求助]MCI-gelCHP-20P的使用方法大孔型MCI树脂有两种填料：苯乙烯和丙烯酸型，聚苯乙烯型的树脂粒经范围为4μm-100μm,甲基丙烯酸酯型树脂的粒经范围为4μm－31μm。因此MCI树脂不仅可以用来粗分，也可以用来精细分离，你可以选取合适粒度的树脂；象4μm的树脂已经可用于HPLC分离。同时由于MCI大孔型的树脂有两种：即苯乙烯和丙烯酸型，所以可以分离的化合物极性范围是很广的。此外MCI系列调料不仅有大孔型的树脂，还有阴离子型及阳离子型等型号树脂。由于进口的很贵，象MCICHP20P（75－150微米）大概市场报价在每升8000RMB左右，太贵，所以没有用过，但是我和国内的树脂研究单位联系让他给我合成过小样试了试，感觉效果还可以。大量分离和重现性都没有做过。MCI-gelCHP-20P的使用方法，它的75-150um粒径使用得多还是35-75um粒径的使用得多？如何选择？谢谢各位指教最通用的是75-150um粒径的MCI。MCI在使用前先用甲醇，水，丙酮分别洗一遍（干净就好）。最后用水平衡。把你要过柱的样品用小体积的甲醇（如果溶解度不好导致体积较大，可用吡啶或用MCI拌样）溶解，上柱，用水洗脱将甲醇带出，然后用甲醇水洗（可以梯度洗脱，如果只是除叶绿素的话可以直接用90%甲醇洗脱）。自己想要的样品洗脱完毕，一定要用丙酮洗几个柱体积，再生填料。当然，如果你上样的样品是极性较大的部分，就不用丙酮了，呵呵。MCIgel是一种很好的分离中大极性化合物的填料，我用了感觉效果很好。MCI填料不适合细分（因为一般颗粒较粗）较适合粗分，即使是十几克的浸膏也可以上柱，我就经常用100克MCI柱粗分10g左右的粗品。但是千万注意不要分极性较小的样品（氯仿就可以展到头的那种），否则肯定死吸附，丙酮也冲不下来，填料就可能报废。正如上面的网友所说，MCI脱叶绿素非常好，洗脱时可以牢固的吸附在柱头，最后用乙醇洗下来。一般色素并不能全部脱掉，但是它脱色素的效果和反相有差别，可以交叉配合使用。拌样就不要了，据说伤填料。如果你是想将粗品按极性划段，最好不要用MCI，因为它的分离原理不是按极性的。洗脱系统一般为乙醇水，可以用20，30，40％等等乙醇：水洗脱直至乙醇，每个配比洗脱4，5个柱体积，点板发现没有新的点就可以换下一个配比了。不必要用甲醇，因为本来就是粗分嘛，大量使用有毒的甲醇也不好，最多使用丙酮水，但不能多用，据说伤填料，极性再小的溶剂就不要使用了。MCI分离化合物的机理还不是很清楚，所以往往不能用来细分，因为没办法定条件，往往60％乙醇馏分还有大极性成分，20％馏分里还有中小极性成分，MCI可以把Rf距离很近的点轻而易举的分开（而Rf相差很远的往往却分不开），我就经常发现几个Rf一样的不同显色的点被MCI分开了。它最大的好处就是提供了不同于硅胶，凝胶，反相ODS填料的一种分离方式。有的样品如果经过硅胶，凝胶，反相ODS填料都没有分纯，也可以用MCI细分，不过就是定条件很麻烦，因为化合物的极性与MCI没有必然联系，我得经验极性在氯仿到氯仿：甲醇8：2这个极性段的样品在40％－60％甲醇水找条件比较合适，保险的做法就是先从40左右洗脱，没洗下来就加7%甲醇洗脱，一步一步摸索，直到样品洗脱下来为止。极性再大的就把甲醇减少MCIGELCHP系列主要就用于抗生素的提纯，所以溶剂残留非常的低。但是MCIGEL不光只有alex2000说的粒径较大的型号如CHP20P，还有粒径较小的CHP55Y，以及聚甲基丙烯酸酯型的CHP2MG系列，我这里有MCIGELCHP55Y等分离绿茶提取物，以及番泻叶提取物的图谱，可惜没扫描。另外，价格上MCIGELCHP20P（75～150um）慧德易只卖6000多啊，比起ODS要耐用多了。momo2004wrote:大孔型MCI树脂有两种填料：苯乙烯和丙烯酸型，聚苯乙烯型的树脂粒经范围为4μm-100μm,甲基丙烯酸酯型树脂的粒经范围为4μm－31μm。从上面的介绍就可以看出MCI树脂不仅可以用来粗分，也可以用来精细分离，你可以选取合适粒度的树脂；象4μm的树脂已经可用于HPLC分离。同时由于MCI大孔型的树脂有两种：即苯乙烯和丙烯酸型，所以可以分离的化合物极性范围是很广的。此外MCI系列调