消毒灭菌效果监测方法(部分)

医院感染微生物学检测前言随着现代化医学科学的发展，诊断和治疗手法不断提高，新技术、新疗法不断推陈出新，导管、插管、内镜等侵袭性操作不断增加和抗生素的广泛使用等，使医院感染在当前世界各国的医院中均有不同程度的发生，并呈日益增多的趋势。前言医院感染的预防与控制是当今医疗机构面临的重大挑战，关系到医疗质量和病人的安全，已成为全球关注的突出的公共卫生课题。医院感染管理是医院管理的重要组成部分，体现医疗机构的管理水平，受到国内外医院管理者和广大医务人员的高度重视和关注。医院感染的定义是指住院病人在医院内获得的感染，包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染，但不包括入院前已开始或者入院时已处于潜伏期的感染。医院工作人员在医院内获得的感染也属医院感染。医院感染的分类1、内源性感染（自身感染）：指免疫机能低下病人由自身正常菌群引起的感染。即病人在发生医院感染之前已是病原携带者，当机体抵抗力降低时引起自身感染。2、外源性感染：指由环境或他人处（病人、带菌者、工作人员、探视者、陪护者）获得而引起的直接感染。环境感染由污染的环境（空气、水、医疗用具及其他物品造成的感染。如手术室空气污染造成病人术后切口感染，注射器灭菌不严格引起的乙型肝炎流行等。医院感染监测内容♦医院空气微生物学监测♦物体表面微生物学监测♦消毒剂微生物学监测♦医务人员手微生物学监测♦灭菌效果生物监测♦医疗器械消毒效果监测♦医疗用水的微生物学检测医院空气微生物学监测采样时间消毒后操作前1、采用洁净技术净化空气的房间（Ⅰ）洁净系统自净后、操作前2、未采用洁净技术净化空气的房间（Ⅱ、Ⅲ）消毒、通风换气后、操作前3、怀疑空气与医院感染暴发有关时采样高度与地面垂直高度80－150cm距墙1米布点方法室内面积≤30m2设内、外、中对角线3点内、外点距离墙壁1m处室内面积＞30m2设四角（东、西、南、北）及中央共5点四角距离墙壁1m处●●●●●●●●室内面积≤30m2室内面积＞30m2操作方法将平皿（直径9cm）放置在采样点处采样高度距离地面80-150cm采样时将平皿盖打开、扣放于平板旁正确操作错误操作放置时间未采用洁净技术净化空气的房间Ⅱ类环境暴露15minⅢ类环境暴露5min采用洁净技术净化空气的房间暴露30min采样后盖好平皿盖子记录科室、房间、采样人、采样时间将平皿倒置放于托盘内（附化验单）采样平皿尽快送至实验室培养若怀疑与医院感染有关时进行目标微生物检测正确放置方法错误放置方法平板暴露法采样注意事项采样前关闭门窗无人走动的情况下静止10分钟后采样放置培养皿时应从最里面的房间或房间的最里面开始布点依次向外、最后人员撤出收集培养皿时从最外面的房间或房间的最外面开始、最先布的点最后收对采样人员的要求着无菌的工作服、戴口罩、帽子操作前洗手或手卫生所带物品清洁后方可带入手臂及头部不可越过打开的培养皿上方行动及放置动作要轻尽量减少对空气流动状态的影响每次采样人员不得超过2人医院物体表面消毒效果的监测采样时间消毒后1、消毒处理后2、怀疑与医院感染暴发有关时采样面积被采表面100cm2，取全部表面被采表面≥100cm2，取100cm2采样方法用5cm×5cm灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂擦5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积（被采表面＜100cm2取全部面积，被采样表面≥100cm2取100cm2），剪去手接触部分，将棉拭子投入装有10ml无菌检测用洗脱液的试管中送检。门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样。记录(检验申请单）记录科室、房间、何种物体表面、何种消毒剂、采样人、采样时间采样结束后送至实验室合格标准、Ⅱ类区域：细菌菌落总数≤5cfu/cm2Ⅲ类区域：细菌菌落总数≤10cfu/cm2不得检出致病微生物怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测消毒液染菌量监测采样方法用无菌注射器吸取消毒液1ml，加入9ml相应中和剂中，充分振荡混匀。注明科室、何种消毒剂、开启日期、批号、采样人以及采样日期采样结束后送至实验室中和剂醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和。含氯、碘和过氧化物消毒剂用0.1%硫代硫酸钠中和剂。洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂。醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂。含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%。合格标准灭菌剂染菌量0cfu/ml皮肤黏膜消毒剂染菌≤10cfu/ml消毒剂染菌量≤100cfu/ml怀疑与医院感染暴发相关时进行目标微生物检测医务人员手卫生效果的监测遵循WS/T313中华人民共和国卫生部行业标准《医务人员手卫生规范》采样时间手卫生后接触病人或诊疗操作之前采样方法棉拭子法:1、被检人员将双手伸出，五指并拢。2、检查者取2支无菌棉试纸，并浸沾于含相应中和剂的无菌洗脱液中。3、取一支棉拭子在一只手手指屈面，从指根到指端往返涂擦2次（一只手的涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子；按同样方法用另一支棉拭子涂擦另一只手。4、剪去操作者手接触的部位，将2支棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。化验单书写：科室、采样地点、被采人、采样人，采样时间。采样步骤用棉拭子蘸取相应中和剂双手的屈指面，从指跟到指端；往返涂擦2次，同时转动棉签.（一只手一支棉试纸）将手接触的部分折断，投入10ml含相应中和剂的试管中合格标准卫生手消毒：细菌菌落总数≤10cfu/cm2外科手消毒：细菌菌落总数≤5cfu/cm2不得检出致病微生物压力蒸汽灭菌效果的生物监测监测时间：每周一次指示菌株：嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC7953或SSIK31株）培养基：溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基若指示菌片中的细菌未被杀灭，可分解培养基中的葡萄糖产酸，使指示剂溴甲酚紫由原来的紫色变成黄色，对照管为黄色。灭菌合格仍为淡蓝色灭菌不合格为黄色结果判断灭菌合格：检测管培养阴性阳性对照管培养阳性阴性对照管培养阴性灭菌不合格：检测管培养阳性阳性对照管培养阳性阴性对照管培养阴性将常规生物监测包放在灭菌器最难灭菌的部位同时设阴、阳性对照灭菌周期完成后立即将生物指示剂取出将灭菌方法、锅次、灭菌员、器械的去向以及灭菌时间填写清楚送细菌室医疗器械消毒效果监测高度危险性医疗器械：进入正常无菌组织、脉管系统或有无菌体液（如血液）流过，若被微生物污染将导致极高感染危险的器材如手术器械；穿刺针；腹腔镜；活检钳；牙科手机及其配套器械；心导管；植入物等消毒水平：达到灭菌消毒效果：应无菌生长中度危险性医疗器械：直接、间接接触粘膜的器材如胃肠道内镜；气管镜；喉镜；体温表（口腔测温表，肛门测温表）；呼吸机管道；麻醉剂管道；压舌板；肛门直肠压力测量导管等消毒水平：高水平消毒或中水平消毒消毒效果：菌落数应≤20cfu/件、g或100cm2氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等宜采用高水平消毒低度危险性医疗器械：仅与完整皮肤接触而不与粘膜接触的器材如听诊器；血压计袖带；病床围栏、床面以及床头柜、被褥；墙面；痰盂、尿壶、便器等消毒水平：中水平消毒或低水平消毒或保持日常清洁消毒效果：菌落数应≤200cfu/件、g或100cm2采样时间在消毒或灭菌处理后存放有效期内采样内窥镜消毒灭菌效果的生物监测采样时间消毒灭菌后使用前采样方法监测部位为内镜的内腔面用无菌注射器抽取10ml含有相应中和剂的洗脱液从待检内镜的活检口注入内镜（使用蠕动泵）用无菌试管从活检出口收集注入的液体2h内送检合格标准消毒内镜细菌总数≤20cfu/件灭菌内镜无任何细菌检出呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测采样时间消毒后使用前采样方法用蘸有相应中和剂的长柄棉签，在被检螺纹管内面反复涂擦并同时转动棉签，剪去手接触的部位，将棉签投入10ml含相应中和剂的无菌生理盐水试管，立即送检。