DH5a

DH5α感受态细胞Cat#：BSD02L1试剂盒组成（20T）ComponentAmountDH5α感受态细胞0.1ml×20支SOC培养基1ml×20支阳性质控品200ul说明书１份产品描述DH5α是世界上最常用的生物工程菌株之一，特别是在克隆应用方面。本产品为克隆转化专用的感受态大肠杆菌，该菌株经过特殊方法处理而获得的高活性感受态细胞。使用pUC18(2.7kb)检验可获得高达＞107cfu/ug。本产品在液氮中保存可在二个月内保持＞107cfu/ug的转化效率，-70℃保存可在一个月内保持＞106cfu/ug的转化效率。DH5α的基因型为:F-φ80lacZΔM15Δ(lacZYA-argF)U169deoRrecA1endA1hsdR17(rk-,mk+)phoAsupE44λ-thi-1gyrA96relA1。操作方法（以下操作均按无菌条件的标准进行）1.取感受态细胞室温下使其解冻,解冻后立即置冰上；2.向感受态细胞中加入目的DNA(含量不超过50ng,体积不超过10μl)，轻轻旋转离心管以混匀，冰上放置30分钟；3.将离心管置于42℃的水浴中放置60秒（时间必须准确控制）。然后快速将离心管转移到冰上，放置5分钟；4.向管中加入1ml培养基(不含Amp)，混匀后37℃水浴或振荡培养1小时，使细菌恢复正常生长状态，并表达质粒编码的抗生素抗性基因(Amp)；5.将上述菌液涂布于含Amp的筛选平板上（也可经过离心收集后再涂板），正面向上放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿，37℃培养16-24小时。重要提示1用于转化的连接产物或质粒的体积不能超过感受态细胞体积的15%；2质粒超过7.5kb后，随尺寸的增加转化效率会下降，质粒的尺寸超过10kb时，在大肠杆菌增殖过程中也可能会出现质粒缺失现象；3用于转化的质粒量在0.1pg~50ng间的效果最好，超过50ng则转化效率会下降；442℃热击时间与离心管的厚度、菌液的体积、转入片段的大小直接相关，一般建议热击60秒，热击时间不宜超过90秒，否则转化效率会下降很快；5本产品不能进行反复冻融和长期保存。DH5α感受态细胞Cat#：BSD02L1试剂盒组成（20T）ComponentAmountDH5α感受态细胞0.1ml×20支SOC培养基1ml×20支阳性质控品200ul说明书１份产品描述DH5α是世界上最常用的生物工程菌株之一，特别是在克隆应用方面。本产品为克隆转化专用的感受态大肠杆菌，该菌株经过特殊方法处理而获得的高活性感受态细胞。使用pUC18(2.7kb)检验可获得高达＞107cfu/ug。本产品在液氮中保存可在二个月内保持＞107cfu/ug的转化效率，-70℃保存可在一个月内保持＞106cfu/ug的转化效率。DH5α的基因型为:F-φ80lacZΔM15Δ(lacZYA-argF)U169deoRrecA1endA1hsdR17(rk-,mk+)phoAsupE44λ-thi-1gyrA96relA1。操作方法（以下操作均按无菌条件的标准进行）1.取感受态细胞室温下使其解冻,解冻后立即置冰上；2.向感受态细胞中加入目的DNA(含量不超过50ng,体积不超过10μl)，轻轻旋转离心管以混匀，冰上放置30分钟；3.将离心管置于42℃的水浴中放置60秒（时间必须准确控制）。然后快速将离心管转移到冰上，放置5分钟；4.向管中加入1ml培养基(不含Amp)，混匀后37℃水浴或振荡培养1小时，使细菌恢复正常生长状态，并表达质粒编码的抗生素抗性基因(Amp)；5.将上述菌液涂布于含Amp的筛选平板上（也可经过离心收集后再涂板），正面向上放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿，37℃培养16-24小时。重要提示1用于转化的连接产物或质粒的体积不能超过感受态细胞体积的15%；2质粒超过7.5kb后，随尺寸的增加转化效率会下降，质粒的尺寸超过10kb时，在大肠杆菌增殖过程中也可能会出现质粒缺失现象；3用于转化的质粒量在0.1pg~50ng间的效果最好，超过50ng则转化效率会下降；442℃热击时间与离心管的厚度、菌液的体积、转入片段的大小直接相关，一般建议热击60秒，热击时间不宜超过90秒，否则转化效率会下降很快；5本产品不能进行反复冻融和长期保存。