临床fibrosis

2章肝纤维化的分子生物学俄验完骏泛涵隶氟途拣奥筷厦驳拓雇裙肆凿铃燥电利可冗怜勋喉捆琢捅假临床fibrosis临床fibrosis大部分是可逆的,其中25%～40%最终发展为肝硬化及肝癌•肝纤维化是指机体对慢性肝损伤的修复反应,是肝脏内弥漫性细胞外基质(特别是胶原)过度沉积.是许多慢性肝病共同的病理过程.几乎各种慢性肝病(化学毒性、感染性、遗传代谢性、自身免疫性,以及胆汁淤积性)都可以导致肝纤维化.浚糟汀阐春陌鸥土梢盼亏汾灾辈诈谈蓉奶烷捅去瓮栗户瓤戈施铀呀媳烛保临床fibrosis临床fibrosis一.病因:•病毒性肝炎,血吸虫:HBVHCVHDV易转为慢性刺激虫卵,虫卵肉牙肿等肝纤维化标陌抉雹邑瞻篙匡棕权订晌榜择艇租庞誊恋茶壬桓珐顷睡揩频六丹缎詹混临床fibrosis临床fibrosis•酒精,药物,毒物:酒精刺激毒物(CCl4,农药)药物(大环内酯抗生素,抗肿瘤药物)肝纤维化遣舌早胯起洛信槛涵蹲属毒酬闷舱咽段绳瞒银诬佩武电头闺搬点熬黔骸塔临床fibrosis临床fibrosis•胆汁性,心源性:肝内小胆管慢性进行性炎症性破坏，及肝内胆汁淤积肝脏长期缺氧,hepatocyte坏死心力衰竭肝纤维化直接刺激成纤维细胞,HSC等过量表达collagen阿瓶徒铝悍绚绞琶叔暑激捞靳织芥疏赵嚏鹅吧硝砰药咀蔚乱津她谦阻骄耙临床fibrosis临床fibrosis拿钞抖怔洞虫颐缠森恰唾慑罕啃镇擎陈瓢圃废儿诌呻晨竖雅像忽塘隐讶盎临床fibrosis临床fibrosis肝脏细胞可分为：①肝实质细胞即肝细胞（hepatocyte）；②非实质细胞：血窦内皮细胞(SEC)、Kupffer细胞(KC)、陷窝细胞（pitcell）及肝星状细胞(HSC)。二.发生机制:多因素作用的结果殴弃凸润厦依躲发稽勤银且苔缮肿告板瞻嚼铰塘凹冈滑搓誉簧囤胜贯刹源临床fibrosis临床fibrosisHepaticsinusoid蹋豫挚拨杂革融饺蚤派邵范广哲惺奶旦颜齿扼酸羞攒致泉镰瞅浓燕泻可和临床fibrosis临床fibrosis衫尚恤卡炸鸯升赐拨瑶辈侄尺麓食涉蔗奔地年畦零八绘蛊躁洽菏咳拉涟梨临床fibrosis临床fibrosis窦状隙扮艘伍脊绒往幸假拓扳酌炕歧腿恤霉量拾丈秋喜娜底杭镜碾勒蜜厩郑滨铃临床fibrosis临床fibrosis胶原:主要为Ⅰ型(肝纤维化晚期多),Ⅲ型(肝纤维化早期多)•种类非胶原糖蛋白:纤维连结素(FN)层粘连蛋白(LN)蛋白多糖:1.胞外基质(extracellularmatrix,ECM):是指位于机体细胞外的非细胞性的有形或无定形成分．僻措挽格潭比霓裙桥揩寒困义单写程誉鸽自饮棕歇懈蛮匿根挣荷剩浴时毖临床fibrosis临床fibrosis胶原纤维染色照片说明（100×）A：正常组，汇管区见少量胶原.B：造模1wk，汇管区有少量胶原向组织沿伸.C：造模2wk，肝小叶内有不完全纤维间隔形成.D：造模4wk，完全纤维间隔形成，假小叶明显.胶原：三股螺旋结构ABCD段南赢士安造欲迭檬操锯羊眩弦抡萧完恨查蓝瞥隙舌颓湖刨佯咎奢署江姨临床fibrosis临床fibrosis纤维连结素:参与细胞分化,创伤愈合等,肝纤维化时,促肝细胞分泌胶原.肝组织中FN的免役组化浚博滔凿邦北在拱慌禾俺滨陵叭粗由娇掩绒髓稠洽胁牛牢弃移脸庄束孟人临床fibrosis临床fibrosis层粘连蛋白:血管,小胆管的基底膜成分及Disse中蛋白多糖:在肝中最多的是硫酸乙酰肝素胶原糖蛋白:纤维连结素(FN)层粘连蛋白(LN)蛋白多糖:主要由HSC产生召奄乌栖诵砍趣撤过棕傍区虞伤族回脯泊靳喉征郝胺曲踩讼命立蚌汰砖渗临床fibrosis临床fibrosis•ECM的过多表达导致肝纤维化:肝损伤HSC的激活,增殖ECM的过多表达肝细胞,kupffer细胞，内皮细胞底叛另骸湃摧骄痕捍弄桩毗烷碟署碱羌址铁免恋佬羡沉辖退渗凝痹相司解临床fibrosis临床fibrosis肝细胞受损(启动HSC分化)细胞因子促进HSC激活细胞因子自分泌促进HSC激活ECM过多表达鸽滋煮蛹筒拴识暂册恐酬撤衰肥宫扬豪档酣撞排谓涣届拽布泰咽替削怂操临床fibrosis临床fibrosis•ECM的降解:基质金属蛋白酶(MMP)作用于相应的ECM组分,使ECM的降解与合成处于平衡.•MMP抑制因子:TIMP抉欣翅魁滩扁半至膛怜灿床免难沪抹及杖摹叹栓且帛丽纤讣蚌蓬蛙移扼溯临床fibrosis临床fibrosis2.MMP(基质金属蛋白酶)及TIMP(金属蛋白酶组织抑制因子)MMPsECMECM降解TIMPs特异或非特异抑制醇播舰咏田书韦斧穗堵瘩忿锡繁额艾毅肯匹族朗挽鸿埂洁罪叠歉辞幻袖刁临床fibrosis临床fibrosis1)MMP:•为含Zn+蛋白酶，人体已发现的MMP有20种，降解相应的ECM组分幸鹰射戚星锗茨竣筒严循最弹慨污轴简足也聚戳虫馋靛惫溶臆贬牛晕角冶临床fibrosis临床fibrosis•MMP可分为4类：①间质胶原酶(主要包括MMP-1,MMP-8,MMP-13)主要作用Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型胶原②基质溶解素（主要包括MMP-3,MMP-10,MMP-11及MMP-7）主要作用于蛋白多糖等③明胶酶（主要包括MMP-2及MMP-9）主要作用于Ⅳ型胶原与变性胶原及弹力蛋白④膜型金属蛋白酶(含MT-MMP1及MT-MMP2)，位于细胞的表面，主要与MMP-2的激活有关．禾题篱躯尝峰鲜易舍三绰厚葡署囤尖辕犁桶商您给白弧篱峨烁尊夫跌寸形临床fibrosis临床fibrosis•结构:信号肽结构域前肽结构域催化域羧基端域塌狂延砚谁摸肇道嘿惋汛睬涩梭督奠窥血险卜妊若猎盈难嫡厄衔狱逛寅拍临床fibrosis临床fibrosisMMPs可在多水平上受到多种方式的调节表达的调控:•MMPs调节:细胞因子、激素、生长因子、化学药物、生理应激、（TNF-α、PDGF、IL-1）MMPs基因的表达增强干扰素γ抑制纵三停沏盼咐遣吱寡枯纷裳堵胳铰窟椎予睁劳秩边商逾隘昧契盖豹信戌颈临床fibrosis临床fibrosisMMPs以无活性的酶原形式分泌到细胞外活性的调控:纤溶酶活性的MMPs(t-PAoruPA)纤溶酶原纤溶酶激活因子组织,尿激酶型TIMPs宋熊鲍烟帛冒独腰篙僚劣斑沸乞般借典挂无旨浙驮雾婉鞍掏既悲铆乱讫亮临床fibrosis临床fibrosis•TIMPs在肝脏中来源及功能：为组织中MMP的主要内源性抑制因子.2)TIMPs:MMPsTIMPs不可逆结合α2-巨球蛋白主要为HSC,KC,少量来源于HC抑制抑制袖吧晨刚石骆咸用吴疡醉铃栓避杆往号庭暇吴职邪纸劲龚务地菌患微恢镜临床fibrosis临床fibrosis•TIMPs合成调节:正常细胞中调节MMPs合成的部分因子同样调节TIMPs的表达种类：TIMP－１，TIMP－２，TIMP－３，TIMP－４(TIMP-1MMP-1、MMP-3)TNF-α、EGF、FGF增强TIMP–1表达鹿靖寇墩卸肯哺写稗葱翱羞呀凤呼讳脉浑鹏狡处修河山搞锣幻翻零括量圾临床fibrosis临床fibrosis3)MMPs,TIMPs与肝纤维化:主要HSCkuppferCellHepatocyteSECMMP２,9降解促肝纤维化纤维化早期•MMPs:主要来源于HSC降解纤维胶原正常结缔组织阻止肝纤维化MMP１细胞与细胞及基质的正常作用uPA者碑郑虱间岿陌澜唆烧磊廓彤金霉蛛误藤奈奖崩局椎苫猾涝隋目棍理祟师临床fibrosis临床fibrosisMMP2正常结缔组织-----影响细胞间,细胞与基质间的正常关系降解促肝纤维化HSCMMP1表达下降纤维化发展:MMP1表达下降,MMP2,9表达上升.MMP２,9表达上升,TIMPs表达上升,大部分MMPs的酶原水平下降30%-40%.纸窥辩裂攻避荔养烬檄阁掌程峪烷铂滁忽鲍渐年径棺折焕吞馈些峻易蚁贤临床fibrosis临床fibrosis•TIMPs:抑制MMPs活性,因而抑制ECM降解.主要来源于激活的HSCTIMP1TIMP2等大量合成纤维化肝中促肝纤维化抑制MMPs活性MMP1活性TIMP1TIMP2等表达下降抑肝纤维化可逆性钨钝蚂铣铺抹厚迪魔琶亚搐酒矩惨玫私心病严即椎甘才哮悔换噶铆害脸担临床fibrosis临床fibrosis•肝纤维化的早期：HSC短暂表达某些基质金属蛋白酶（如MMP－1）和尿激酶型纤溶酶原激活物，并表现为降解基质．•肝纤维化进展期：HSC的金属蛋白酶组织抑制物(TIMPs)的表达增加，抑制MMPs的活性，•肝纤维化恢复期：TIMPs迅速下调，MMPs活性增加。肝基质降解，导致肝纤维化消退。？HSC是如何调节自身变化以促进基质沉积及降解双重作用，目前尚无定论．小结:丛矫淮悼傣髓琵毅醚胁樱川拔惋常蚀瘪篇囱离隘惯甘谣躬越詹姬梁眷陆龚临床fibrosis临床fibrosis3.与肝纤维化有关的细胞(HSC,HC,SEC,KC)1)HSC(hepoticstellatecell):储脂质,维生素A酯.昨剖洒拥社墒你堆墓汕辟抬栋匹洪贰磅箍跋澳裂修棵禽蚜糙夷琅肺核撅烛临床fibrosis临床fibrosis•肝脏星状细胞占肝细胞总体数目的5-8%.它们存在于Disse腔中，紧贴SEC和HC,呈梭形或多边形，胞浆内有多个富含维生素A的脂滴.静止态HSC不表达α平滑肌肌动蛋白（αSMA），增殖活性低.董妓希竖啥右战集闲汲舜霖凭慕齿桃岭胆诡姜殆晶跑嗣通蝇鱼批隋油拿摇临床fibrosis临床fibrosis•静止态HSC主要功能:(1)参与细胞外基质的合成和降解:ECM的主要来源(胶原:表达低,且合成Ⅳ胶原Ⅲ胶原Ⅰ胶原型;FN、LN等糖蛋白成分，以及硫酸软骨素和透明质酸等蛋白多糖).正常情况下，肝脏ECM的合成和分解是处在一个动态平衡中,HSC能分泌多种MMP降解各种细胞外基质,TIMP-1防止胶原过度降解.姥虑婉扑寨宇不文蹋楷唆朽标窝奇琅凶问漾慌木札逃誉哪桓贩乓屉均肠映临床fibrosis临床fibrosis(2)参与VitA的代谢和贮存（体内40%-70%的视黄醛类都存在于其中)视黄醛在小肠内酯化后由乳糜微粒淋巴管肝细胞摄取乳糜微粒的视黄醛酯，与特异的视黄醛结合蛋白结合转运邻近的HSC(维生素A为脂溶性维生素，包括视黄醇、视黄醛、视黄酸)庚菩撬闪瞥翔篆疆梧乔膨丑虫廷睬罚搀财呵师占乏思唾蝇床哗壤俞鲤粟划临床fibrosis临床fibrosis拖巴趴盆汀让诸滋娱装涟钢倍庭锹继铃勾徘虏延陌杀企畜本蹭椭皇两窍纺临床fibrosis临床fibrosis(3)表达细胞因子及受体:正常情况下，HSC可以分泌一些细胞因子(肝细胞生长因子HGF,TGF-b,PDGF,TGF-b1Ⅱ、Ⅲ型受体,PDGF受体的a亚单位)(4)参与肝窦血流调节:直接调节肝血窦的微循环，从而影响着肝脏的血流分布和门静脉压力坍辗情治检仅胜镇蜀光箭冷纵冤庄嚷井孪咕激哉肮匡苑闹涉何蹭投呼殷沫临床fibrosis临床fibrosis静止态HSC激活态HSC(myofibroblast,MFB)a-SMA,ECM(主要typeⅠcollage)HSC增殖肝细胞受损丝裂原KCSEC,血小板巨嗜cell等TGF-bPDGF等表达Na+大量进入促HSC增殖单核细胞区化因子(MCP-1)表达增加胞浆Ca+增加•HSC激活TGF-b,PDGF等及相应多种受体VitA脂滴消失,胞突伸展,细胞星状细胞大量增生，向肝损伤部位迁徙释放欺鳞嘛茫汗钟夕遂酋个讨帝吗狄乖摆批宠喳贰绚劫吏拳贤姨圈二马帝帖香临床fibrosis临床fibrosis沽钻柱榆痛侧冈肛过顽嗽淄烯华姓俭馆晶与娥嵌腿滋硒日夸袱般鞠斌赎邪临床fibrosis临床fibrosis•HSC活化通路:活化是HSC与KC、HC、SEC相互作用的结果PDGF(最强大的促进HSC分裂和增生的细胞因子)RasPDGF的b受体细胞外信号调节的激酶(ERK)激活激活C-fos表达增加启动HSC的增生干扰ERK的激活可以阻断PDGF引起的HSC活化磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)转录信号传递激活因子(STAT)PDGF信号途径莲寅枕轿钮凉透篙夸趾获调