肿瘤标志物检测注意事项及临床意义

肿瘤标志物检测肿瘤标志物（tumormaker，TM）是指在肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞合成、分泌或是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。一般存在于血液、尿液、其他体液、细胞和组织中，可通过生物化学、免疫学及分子生物学等方法进行定性或定量检测，在肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、治疗监测及疗效评估、预后判断、复发监测及高危人群随访观察等方面都具有相应的应用价值。甲胎蛋白甲胎蛋白（alphafetoprotein，AFP），按照其余LCA（小扁豆凝集素）亲和力大小分为AFP-L1、AFP-L2和AFP-L3三种异质体。其中AFP-L1主要存在于良性肝脏疾病，AFP-L2多由卵黄囊肿瘤产生，亦可见于孕妇血清中，AFP-L3为肝癌细胞所特有，与LCA亲和力最强。甲胎蛋白ELISA法可用血清、含EDTA、柠檬酸或肝素的血浆标本，待测标本不可用NaN3防腐，检测前应充分离心标本。ECLIA（电化学发光法）对于接受高剂量生物素（5mg/d）治疗的患者，必须在末次生物素治疗8小时后才能采血；检测结果不受类风湿因子影响（RF＜1500IU/ml）。甲胎蛋白主要用于原发性肝癌（HCC）的辅助诊断，血清含量大于400ng/ml为诊断阈值，其诊断原发性肝癌的阳性率可达60%~80%，但AFP阴性不能排除肝癌；AFP的浓度与HCC分化有关，HCC分化接近正常或分化极低时、AFP常较低或测不出来，分化程度为Ⅱ、Ⅲ级时AFP浓度最高，肝坏死严重者AFP亦低。AFP浓度还与HCC大小有关，肝癌小于3cm者AFP阳性率为25%~50%，4cm者AFP多达400ng/ml以上，5cm时AFP常升高至700~1000ng/ml，为此AFP在HCC的诊断中强调动态观察，小肝癌应辅以其他HCC标志物及超声检测。甲胎蛋白可用于肝癌高危人群的筛查，尤其是乙型肝炎性肝硬化患者；AFP还可用于肝癌治疗效果及预后评估，如果AFP＞500ng/ml，提示患者存活期短；若手术切除肝癌后AFP下降，1周内可降至正常，提示预后好；若术后AFP＞200ng/ml，提示肝癌有残留或有转移；若下降后又升高则提示肝癌可能复发。肝良性病变和妊娠，AFP亦升高，但一般在400ng/ml以下。甲胎蛋白内胚层分化器官的良性疾病如酒精性肝炎、肝硬化、急性病毒性肝炎、慢性活动性肝炎、肠炎及遗传性酪氨酸血症等AFP也可呈中、低水平和暂时性或反复性升高，需加以鉴别伴有早期癌的肝病活动。其他疾病如胃癌或胰腺癌和结直肠癌等AFP亦可呈中、低水平和暂时性升高。甲胎蛋白胎儿出生12~18个月后外周血中AFP浓度小于10μg/L，，正常人肝细胞几乎不产生AFP。当胎儿患低氧症、宫内死亡、遗传缺陷、先天性神经管畸形、无脑儿和脊柱裂等疾病时，母体血清AFP异常增高。若胎儿有先天性肾病综合征、先天性食管及十二指肠闭锁、性染色体异常、脑积水、法洛四联症等时，羊水中AFP亦明显升高。甲胎蛋白血清AFP结合β-hCG还可用于生殖细胞瘤的鉴别诊断。生殖细胞瘤病理学上主要分为精原细胞瘤和非精原细胞生殖细胞瘤。精原细胞瘤β-hCG升高，AFP不升高。80%~85%的非精原细胞生殖细胞瘤AFP和β-hCG升高。当精原细胞瘤出现AFP升高时，应考虑存在非精原细胞生殖细胞瘤。血清AFP水平检测有助于精原细胞瘤和非精原细胞生殖细胞瘤的治疗方案选择。甲胎蛋白AFP-L3（甲胎蛋白异质体，alpha-fetoproteinvariant），亲和交叉免疫电泳法亲和电泳免疫印迹法均要求待测血清或其他体液避免溶血、脂血或微生物污染，亲和吸附离心管法血清要求清亮。甲胎蛋白AFP-L3在HCC诊断中特异性高于AFP，但敏感性与总AFP无明显差异；与其他指标如AFP、AFPmRNA或α-L-岩藻糖苷酶（AFU）等联合检测，可提高对HCC诊断的准确率。甲胎蛋白AFP-L3值与总AFP值无相关性，是独立于总AFP值得肝癌辅助诊断指标。AFP-L3≮10%应高度怀疑肝癌的存在；AFP-L3为低值时也不能否定肝癌的存在，因为约有15%~30%的AFP阳性肝癌患者AFP-L3＜10%.此外，某些肝脏良性疾病如急性肝炎、暴发性或重症肝炎、自身免疫性肝炎等也可能出现AFP-L3的升高，建议与其他检查手段联合使用，综合判断。甲胎蛋白AFP-L3可区别原发性肝细胞癌与非原发性肝细胞癌、或者良性肝病引起的AFP升高；目前认为AFP-L3＞25%提示为原发性肝细胞癌。甲胎蛋白通过动态分析AFP-L3的比率或绝对值变化，有助于HCC治疗疗效、复发转移的监测和预后的判断（只有当待测标本中AFP-L3的含量≮1000ng/ml时，可直接用AFP-L3绝对值的变化进行监测）。癌胚抗原癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA）属于非器官特异性肿瘤相关抗原。常用的检测方法有ELISA、CLIA、ECLIA、金标记免疫渗滤层析、RIA、时间分辨荧光免疫分析法及流式荧光免疫检测技术、其中以ELISA法最为常用。癌胚抗原生理条件下，小肠、肝脏和胰腺细胞在胎儿早期合成CEA的能力较强，CEA浓度较高。胎龄6个月后，其合成CEA能力逐步减弱，CEA分泌量逐渐减少，出生后即与成人水平一致（＜5μg/L，吸烟者为15~20μg/L，6.5%的吸烟者可达20~40μg/L），正常情况下CEA经由胃肠代谢消除。病理条件下，位于胃肠道、呼吸道、泌尿道等空腔脏器部位的肿瘤大量分泌CEA，这些CEA随即进入血和淋巴系统循环，引起血清CEA水平异常升高，血清CEA水平检测结果呈阳性。癌胚抗原CEA属于非器官特异性肿瘤相关抗原，血清CEA升高主要见于：70%~90%的结肠癌患者CEA阳性，在其他恶性肿瘤中的阳性率顺序为胃癌、胰腺癌、小肠腺癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、泌尿系癌肿。在妇科恶性肿瘤中，卵巢黏液行囊腺癌CEA阳性率最高，其次是Brenner瘤；子宫内膜样癌及透明细胞癌也有较高的CEA表达，浆液性肿瘤阳性率相对较低。癌胚抗原良性肿瘤、炎症和退行性疾病（例如胆汁淤积、结肠息肉、酒精性肝硬化患者、慢性肝炎、胰腺炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病、肺气肿）CEA含量会轻度或中度上升，但通常不超过10ng/ml。吸烟者中约有30%CEA大于5ng/ml。CEA可作为良性与恶性肿瘤的鉴别诊断依据。癌胚抗原CEA测定主要用于指导肿瘤治疗及随访。能对病情判断、预后及疗效观察提供重要的依据。CEA的检测对肿瘤术后复发的敏感度极高，可达80%以上，往往早于临床、病理检查及X线检查半年。CEA正常不能排除恶性肿瘤疾病存在的可能。与CEA发生反应的抗体与胎粪抗原（NCA2）也能反应。CA19-9CA19-9（carbohydrateantigen19-9）是一种与胰腺癌、胆囊癌、结直肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物，又称胃肠癌相关抗原，与CEA的抗原决定簇相似。CA19-9常用检测方法有ELISA法、CLIA法（直接化学发光技术）、ECLIA（电化学发光技术）法。采用CLIA法若标本或系统一次性器材受到唾液或气雾（例如打喷嚏引起）的污染，可能会造成CA19-9值得假性升高。处理标本、样品杯、反应杯和软盖时，应佩戴手套。建议佩戴面罩。CA19-9CA19-9是细胞膜上的糖脂质，在血清中以唾液黏蛋白形式存在，主要分布于胎儿胰腺、胆囊、肝脏及肠等部位和正常成年人胰腺、胆管上皮等处。其在正常人血清中含量较低。CA19-9CA19-9是一种胃肠道肿瘤相关抗原，在胰腺癌和胆管癌中阳性率最高。CA19-9的检测值可以帮助鉴别诊断胰腺癌，敏感性达到70%~87%，但其检测值高低与肿瘤大小无相互关系，不能作为胰腺癌的早期检查指标。其检测值升高主要见于胰腺癌、胆管癌、结肠癌和胃癌等恶性消化道肿瘤，诊断胆管癌CA19-9的敏感性约为50%~75%。卵巢上皮性肿瘤，50%表达CA19-9.卵巢黏液行囊腺癌，CA19-9阳性率可达76%，浆液性肿瘤为27%。子宫内膜癌及宫颈管腺癌也有一定阳性表达。CA19-9良性疾病如慢性胰腺炎、胆石症、肝炎及肝硬化等也有一定程度增高，但往往为一过性增高，且其浓度多低于120U/ml，必须加以鉴别。CA19-9CA19-9可用于病程评估、预后判断和转移复发监测，若手术治疗后2~4周CA19-9不能将至正常常提示手术失败；若降低后又升高者预示肿瘤复发；当CA19-9＞1000U/ml时，几乎均存在外周转移。与AFP、CEA联合检测可提高胃肠道肿瘤的检出率。CA125CA125主要存在于胎儿体腔上皮分化而来的心包膜、腹膜和胸膜等组织，在正常女性输卵管、子宫内膜和子宫颈上皮细胞中亦可见表达，CA125高水平表达主要见于上皮卵巢癌组织及其患者血清中。CA125对来源于上皮细胞的非黏液性卵巢肿瘤患者血清中有很高的检测率，而正常卵巢（成人及胎儿）的上皮细胞则不表达。CA125存在于卵巢、输卵管、子宫内膜和子宫颈的上皮细胞中，是诊断卵巢癌并检测其复发最敏感的指标，是上皮性卵巢癌与子宫内膜癌的良好肿瘤标志物，可用于卵巢包块的良恶性鉴别。动态监测其水平有助于卵巢癌的预后分析及治疗控制。卵巢癌经治疗有效者CA125很快下降；复发时，CA125升高可先于临床症状出现。CA125联合CA19-9可用于子宫内膜癌的病情评估。CA125CA125升高还可见于卵巢囊肿、卵巢化生、子宫内膜异位、子宫肌瘤和子宫颈炎、乳腺癌、胃肠道癌和其他恶性肿瘤，怀孕初期和一些良性疾病（如急、慢性胰腺炎、良性胃肠道疾病、肾衰竭、自身免疫疾病等）CA125也会轻度升高，良性肝脏疾病（如肝硬化、肝炎）CA125会中度升高。各种恶性肿瘤引起的腹水也可见CA125升高。CA125升高还可见于多种妇科良性疾病，如卵巢囊肿、子宫内膜病、宫颈炎及子宫肌瘤等。CA15-3CA15-3是一种由腺体分泌的多形态上皮糖蛋白，在多种腺癌（乳腺癌、肺腺癌、胰腺癌等）细胞中表达。CA15-3可用于判断乳腺癌的进展、转移及疗效监测，它对转移性乳腺癌的敏感性和特异性高于CEA，可作为诊断转移性乳腺癌的首选指标。30%~50%乳腺癌患者CA15-3增高，有转移灶者增高可达80%，发现癌转移的敏感性比癌胚抗原和组织多肽抗原高，且早于临床发现转移。CA15-3亦是检测乳腺癌术后复发情况及转移的重要指标，血清CA15-3水平增高，提示乳腺癌的局部或全身复发，且增高早于核素检查和临床检查。CA15-3与CA125联合检查，用于卵巢癌复发的早期诊断。CA15-3与CEA联合检测时，可提高乳腺癌早期诊断的敏感性和特异性。但对早期肿瘤阳性检出率低，不宜作为早期筛查指标。CA15-3CA15-3血清增高亦可见于肺癌、卵巢癌、结肠癌、肝癌等其它恶性肿瘤。某些良性乳腺疾病，卵巢疾病等非恶性肿瘤疾病亦可引起CA15-3水平的增高。CA242CA242(carbohydrateanigen242)水平在正常人和良性肿瘤患者中很低，但在消化道等多种器官恶性肿瘤患者中CA242的水平很高，特别是胰腺癌、结直肠肿瘤中呈高表达，因此对胰腺和结直肠癌具有很高的特异性和灵敏度，是胰腺癌和结直肠癌的第三代肿瘤标志物。CA242对胰腺癌的诊断，CA242优于CA19-9，敏感性可达66%~100%，对大肠癌的敏感性也达60%~72%.与CEA、CA19-9联合应用可以提高胰腺癌、结、直肠癌诊断的敏感性。CA242是肺癌、胃癌等恶性肿瘤的辅助诊断标志物。CA242可用于正常人群的肿瘤早期筛查。CA72-4CA72-4（carbohydrateantigen72-4）是一种对胃癌具有较高敏感性和特异性的血清肿瘤标志物，它可以提高对胃肠癌的检出率，并且与胃癌的淋巴结转移有较高相关性，其在血清中的水平与胃癌的分期有明显的相关性，有助于正确评估临床分期。其对胃癌诊断灵敏度为40%~46%.而对良性胃肠疾病的诊断特异性＞95%.CA72-4升高的程度与胃癌的疾病分期有关系。外科手术后，CA72-4水平可迅速下降至正常值。如果肿瘤组织被完全切除，CA72-4可持续维持在正常水平。在70%复发病例中，CA72-4浓度升高先于临床诊断。CA7