中药新药研究思路解析

中药新药研究思路参考书目中药新制剂开发与应用（第二版），谢秀琼主编，人民卫生出版社现代实用中药新剂型新技术，董方言主编，人民卫生出版社中药化学，肖崇厚主编，上海科学技术出版社第一节天然药物简介基本含义1、国际传统药：世界各民族长期使用的来自自然的药物。2、现代天然药物：提取某种有效成分或有效部位的自然药物。药物制剂化学药、生化药等（多合成）天然药（植物、动物、矿物中来）国际传统药现代天然药民族医药完备、独特的理论体系；多以医疗体系指导用药多以现代手段研究，如化学方法、生物方法等中药天然药物浸出物（水、醇等）有效部位有效成分半合成生药中指药用部分，根、皮、叶某一大类化学成分：如总黄酮、总皂苷单一化学成分，如小檗碱从植物或动物中制得，并适当改变化学结构，如：青蒿素、葛根中药第二节中药制剂制备技术概述一、粉碎技术单独粉碎与混合粉碎干法粉碎和湿法粉碎低温粉碎串料法串油法水飞法中心粒径150～200目的粉末(75μm以下)粉碎机械SF-170、SF-170-3、SF-200等锤击式粉碎机YF－130、YF-240等风选式粉碎机30B、30BⅡ万能粉碎机F-400、FS-320、721型柴田式粉碎机SQ－A、SQ-B球磨机新型无尘粉碎机超微粉碎技术中心粒径(10μm以下)细胞的破壁率≥95％超音速气流粉碎机械粉碎－－介质超微粉碎原理与普通粉碎相同，只细度要求更高，即主要是利用外加机械力，部分地破坏物质分子间的内聚力来达到粉碎的目的。原理不同药材中药超细粉碎机组粉碎实验结果药材平均粒径（μm）处理量（kg/h）珍珠1.5～2.510～30灵芝20～3010～30野山参510～15黄芪10～2010～30蛇床子10～2010～30将中药珍珠、炉甘石分别采用气流超细和球磨粉碎的方法，并从粉碎时间、粒度上加以比较，结果气流超细粉碎的粉碎时间仅为原来的1／30左右，而粒度则增加了3倍左右。将两种不同粉碎技术加工的原生药材制成的治疗痛经中药制剂诚年月泰和治疗糖尿病的糖泰胶囊进行了药效学比较研究发现，在镇痛、改善微循环、降血糖等方面采用微粉技术加工原生药制成的作用强度显著大于传统粉碎技术加工原生药制成的制剂。对不同粉碎度的三七进行了体外溶出度试验，结果表明三七药材45min溶出物含量和三七总皂苷溶出量大小顺序为：微粉细粉粗粉颗粒。二、浸提技术煎煮法浸渍法渗漉法回流提取法水蒸气蒸馏法等煎煮法是最常用的浸提方法之一《中国药典》1990年版一部和卫生部《药品标准》之中药成方制剂1～9册共收载中成药1945种，其中采用水煎煮浸提工艺的多达826种，占42.5％。《中国药典》1995版一部收载中成药398种，采用煎煮法的有100种，占总数的25.1％半仿生提取法超声提取法超临界流体萃取法旋流提取法加压逆流提取法酶法提取等半仿生提取法即从生物药剂学的角度，将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，模拟口服给药后药物经胃肠道转运的环境，为经消化道给药的中药制剂设计的一种新的提取工艺。以芍药苷、甘草次酸的提取率为指标芍甘止痛颗粒半仿生提取法优于传统水煎煮法四神茶剂以补骨脂素、五味子乙素、吴茱萸碱的提取率为指标川乌以乌头总生物碱的提取率为指标寒痛定泡腾冲剂以小檗碱、黄芩苷、栀子苷提取率为指标半仿生提取法半仿生提取醇沉法水提取法水醇沉法超临界流体萃取法(SFE)超临界流体萃取法是利用超临界状态下的流体为萃取剂，从液体或固体中萃取中药材中的有效成分并进行分离的方法。C02－－本身无毒、无腐蚀、临界条件适中(7.488Mpa，304.15K)最常用的超临界流体(SF)即萃取时加入具有良好溶解性能的溶剂，如乙醇、丙酮等，不仅改善和维持萃取选择性，而且提高难挥发溶质的溶解度夹带剂SFE－C02法应用实例从新疆紫草中提取萘醌色素，全过程仅2h，提取效率较传统石油醚等溶剂提取法高从东北野生月见草种子中提取月见草油，结果表明其月见草精油的色泽和透明度，γ-亚麻酸的含量均优于溶剂法萃取飞龙掌血根平的香豆素类化合物，表明该法对不稳定化合物的提取较为优越以乙醇为夹带剂，萃取压力20Mpa，温度40℃，SFE－C02萃取丹参脂溶性成分，丹参酮ⅡA含量高达40％操作范围广，便于调节。最常用的操作范围是压力8～30Mpa，温度35～80℃选择性好，可通过控制压力和温度，改变超临界CO2的密度，从而改变其对物质的溶解能力，有针对性地萃取中草药中某些成分操作温度低，能在接近室温条件下萃取，尤适宜于热敏性成分的提取。萃取过程密闭、连续进行，排除了遇空气氧化和见光反应的可能性，使萃取物稳定特点C02价廉易得，可循环使用可以调节萃出物的粒度，即可借超临界流体的核晶作用，使萃出物达到期望的粒度和粒度分布从萃取到分离可一步完成。萃取后C02不残留于萃出物特点局限性较适用于亲脂性、分子量较小物质的萃取对极性大、分子量太大的物质如苷类、多糖等，要加夹带剂，并在很高的压力下进行，给工业化带来一定的难度该设备一次性投资大，也对其普及带来一定的限制超声提取法利用超声波增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，提高药物溶出速度和溶出次数，缩短提取时间的浸提方法绞股蓝中总皂苷超声提取法实例超声法(高频)超声法(低频)回流法槐米中芦丁总提取率达99.82％穿山龙中薯蓣皂苷20KHz超声波提取30min与浸泡24h提取率相同(8.12％)加压逆流提取法此法是将若干提取装置串联，溶剂与药材逆流通过，并保持一定接触时间的方法用此法可使冬凌草提取液浓度增加19倍，而溶剂及热能单耗分别降低40％和57％酶法中药制剂中的杂质大多为淀粉、果胶、蛋白质等，可选用相应的酶予以分解除去。酶反应较温和地将植物组织分解，可较大幅度提高效率。在国内，上海中药一厂应用酶法成功制备了生脉饮口服液旋流提取法采用PT-1型组织搅拌机，搅拌速度为8000r／min。原料不必预先加以粉碎三、分离纯化技术分离方法沉降分离法、滤过分离法、离心分离法精制方法水提醇沉法、醇提水沉法、酸碱法、盐析法、离子交换法和结晶法絮凝沉淀法大孔吸附树脂膜分离技术高速离心法分子蒸馏技术絮凝沉淀法是在混悬的中药提取液或提取浓缩液中加入一种絮凝沉淀剂以吸附架桥和电中和方式与蛋白质果胶等发生分子间作用，使之沉降，除去溶液中的粗粒子，以达到精制和提高成品质量目的的一项新技术壳聚糖鞣酸明胶蛋清101果汁澄清剂ZTC澄清剂种类用絮凝法制备而成的丹参口服液、黄芪口服液、平疣口服液、抗感颗粒等在保留指标成分及制剂稳定性方面均取得良好的效果，其疗效优于醇沉法用此法制成的鼻炎糖浆，液体澄明、色泽棕红，具有清香，室温放置14天，基本无沉淀加入蛋清絮凝剂沉降药酒中的胶体微粒和大分子物质，可减少药酒中沉淀物的出现，从而提高药酒的澄明度将101果汁澄清剂用于玉屏风口服液的澄清，经与醇沉法比较了氨基酸、多糖、黄芪甲苷、总固体的量，前者能更好的保留有效成分，降低生产成本和周期。大孔吸附树脂大孔吸附树脂是近代发展起来的一类有机高聚物吸附剂，70年代末开始将其应用于中草药成分的提取分离以大孔吸附树脂吸附纯化不同中药有效部位，结果表明除无机矿物质外，其它中药有效部位均可不同程度的被树脂吸附纯化。使用大孔树脂纯化不同有效部位的中药复方时，应选择适宜的树脂型号和合适的纯化条件。将大孔吸附树脂用于银杏叶的提取，提取物中银杏黄酮含量稳定在26％以上用大孔吸附树脂分离出的川芎总提物中川芎嗪和阿魏酸的含量约25％～29％膜分离技术根据体系中分子的大小和形状，通过膜的筛分作用，在分子水平上进行分离。超滤－－在透过溶剂的同时，透过小分子溶质，所截留的粒径范围为1～20μm。起到分离、纯化、浓缩或脱盐作用。1～3万分子量超滤膜可以制备注射用水、输液及中药注射液5～7万分子量超滤膜可以制备口服液和固体制剂抗厥注射液(复方山茱萸制剂)、刺五加注射液、丹参注射液的制备工艺均可采用超滤法。实例应用超滤法澄清和精制生脉饮口服液，在澄清度、去杂降浊效果、有效成分含量等方面的考察显示与原工艺相比本法更能去除杂质，保留有效成分。用超滤法制备神宁胶囊，与醇沉相比能减少中药用量，且有效成分损失少、工艺流程缩短。应用中空纤维素超滤器，对原料水提液过滤后，以2万截流分子量可制备南方参茶。将超滤法与醇沉法对金银花中绿原酸的影响进行比较，并测定含量与超滤体积的关系，显示1.25倍体积超滤能够基本保留有效成分。高速离心法是以离心机为主要设备，通过离心机的高速运转，使离心加速度超过重力加速度的成百上千倍，而使沉降速度增加，以加速药液中杂质沉淀并除去的一种方法。适于分离含难于沉降过滤的细微粒或絮状物的悬浮液。避免了药液反复浓缩、转溶使有效成分受热破坏所造成的含量降低。高速离心法制备的清热解毒口服液，其黄酮含量显著高于水醇法。实例分子蒸馏技术是一种在高真空度下进行分离精制的连续蒸馏过程，该过程中，蒸馏物料分子从蒸发液面挥发至冷凝面冷凝所经过的行程小于其分子运动平均自由程，不同物质分子由于运动平均自由程的差别，而在液-液状态下得到分离。在分离过程中，物料处于高真空、相对低温的环境，停留时间短，损耗极少，故分子蒸馏技术特别适合于高沸点、低热敏性物料，尤其是香味、有效成分的活性对温度极为敏感的天然产物的分离，如玫瑰油、藿香油、桉叶油、山苍子油。工艺联用银杏叶提取物ZTC澄清剂＋大孔吸附树脂六味地黄丸大孔树脂＋超滤菖蒲益智口服液澄清剂＋高速离心＋微滤法四、浓缩干燥技术常见的干燥方法烘箱烘房干燥真空干燥（或称减压干燥）气流干燥流化床干燥喷雾干燥冷冻干燥薄膜蒸发技术方式一是使药液快速流过加热面进行蒸发二是使药液剧烈地沸腾，产生大量泡沫，以泡沫的内外表面为蒸发面而进行蒸发远红外元件加热干燥适用于中、小型制药厂对药物包装容器、药物的原辅料，制剂的半成品和成品的干燥和灭菌。带式干燥器为接触式干燥技术，适用于药用植物的原料，其特点是在温度适宜的条件下进行，原料中的有效成分不易被破坏。沸腾干燥利用热空气流使湿颗粒悬浮，呈“沸腾状”，热空气在湿颗粒间通过，在动态下进行热交换，带走水汽而达到干燥。主要用于片剂、颗粒剂制备过程中的制粒干燥，现也有报道用于丸剂的干燥。喷雾干燥是流化技术用于液态物料干燥的一种方法。因是瞬间干燥，特别适用于热敏性物料；产品质量好，保持原来的色香味，且易溶解。冷冻干燥是将被干燥液体物料冷冻成固体，在低温减压条件下利用冰的升华性能，使物料低温脱水而达到干燥的一种方法。由于物料在高度真空及低温条件下干燥，故对某些极不耐热物品的干燥很适合。五、成型及其它技术乳化技术固体分散技术薄膜包衣技术雾化技术环糊精包合技术制粒压片微丸制备中药经皮给药制剂制备微囊制备中药缓控释制剂制备中药靶向制剂制备灭菌第三节中药研究基本思路药物制剂的发展第一代常规制剂第二代一般长效制剂或肠溶制剂第三代控释制剂或药物输送系统以及透皮治疗系统天然药物的制备原料药粗提精制造型成品工艺路线工艺条件制剂技术制药设备一、工艺路线工艺路线－－提取分离采用的方法、顺序1、指导思想工艺路线的设计要以功能主治为指导工艺路线是工艺科学性、合理性和可行性的基础和核心。2、筛选思路以功能主治为核心进行工艺路线筛选是天然药物制剂研究的关键性基础问题2.1化学思路以有效成分含量作为评价指标，对工艺路线进行考察（1）复方提取可能产生新成分（2）药物手性因素对疗效的影响注意2.2药理思路药代动力学－－药效学结合模型研究2.3生物技术思路免疫测定法活性多肽受体免疫调节剂生长因子受体例：用45Ca跨膜流量测定技术测定样品对钙离子通道的阻滞作用45Ca跨膜测量技术的原理是同位素示踪法，其示踪目标是细胞膜上的三种钙离子通道和药物相互作用后45Ca跨膜进入细胞中的內流规律。放射性核素Ca2+与生物组织中Ca2+具有完全相同的化学性质及生物学特性，但45Ca能发射β射线，可以用液闪计数器探测其存在及数量。可通过45Ca的跨膜內流量的变化来判断药物对细胞膜Ca2+通道的阻滞作用。2.4高通量筛选思路以药物作用靶点为主要对象的细胞和分子水平的筛选模型，根据样品与靶点结合的表现，判断化合物的生物活性2.5综合筛选思路综合筛选思路对