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1/17血液学.97/3/25血液学基础一．总论Ａ．血液的成分　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　血浆成份　　　　　　　　　　　　血清成份血小板白细胞　　　　　　　　　　　　　血饼红细胞　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　加入抗凝剂，离心作用　　血液自然凝固　　　后，静放３０分钟情况血清血浆蛋白质凝固因子血液血小板血饼血球白细胞红细胞Ｂ．血液的功能１．搬运氧气至全身；２．进行人体免疫功能；３．阻止血液外流；2/17血液学.97/3/25二．各论Ａ．红细胞（RBC）１。红细胞的形态及功能红细胞模型图形态：扁平板状，中央凹陷，平均直径７－８µｍ内含：血红蛋白（ＨＧＢ），富含铁份，容易氧化，携带氧气至全身。功能：搬运氧气特点：细胞内无核，柔软，可进入比本身直径更小的毛细血管。正常值：４００－６００万／µL２．红细胞的成熟：　　红血球系　　　前红细胞　　　　嗜碱性　　　　　　　多染性　　　　　　　正染性　　　脱核　　网状红细胞成熟红细胞　　　　干细胞　　　　　　　　　　红细胞红细胞　　　　红细胞直径:18-25µm直径:12-18µm直径:9-12µm直径:8-10µm有RNA留下细胞质:浓青色细胞质:青色细胞质:青灰色细胞质:赤橙色有核小体无核小体血红蛋白合成分裂红细胞由骨髓中生成,有细胞核,细胞核在分裂过程中密度越来越大,体积越来越小.此时的红细胞为幼稚细胞,分布于骨髓中.在静脉血中只留有网状红细胞及成熟红细胞,网状红细胞含量不超过1%.网状红细胞内有RNA留下.检测中,用一般试剂可区分幼稚细胞与成熟细胞,用特殊试剂可区分网状红细胞与成熟细胞.3.异常举例：缺铁性贫血：由于血红蛋白内铁份不足所致，红细胞呈小型。溶血性贫血：红细胞于内部膨化，导致细胞膜破裂，红细胞呈大型。恶性贫血：由于细胞内缺乏维生素Ｂ１２导致细胞核不能成熟，细胞呈大型有核红细胞。再生不良性贫血：由于遗传原因，骨髓造血量少，导致红细胞、血小板、白细胞等数量少。3/17血液学.97/3/25B.白细胞（ＷＢＣ）1.白细胞的分类、形态及成份分类：淋巴球二分类其他白细胞淋巴球三分类嗜中性球其他白细胞淋巴球单核球五分类嗜中性球颗粒球嗜酸性球嗜碱性球五分类中各种白细胞百分比含量：淋巴球：２０％－４０％单核球：２％－１０％嗜中性球：４０％－６０％嗜酸性球：７％以下嗜碱性球：１％以下形态:(普通染色)淋巴球单核球嗜中性球嗜酸性球嗜碱性球直径7-17µm15-20µm12-15µm13-1m8µ10-15µm核近似球形凹陷倾向杆状分节不整形细胞质淡青色青灰色淡橙色淡青色淡褐色颗粒赤紫色赤紫色橙褐色赤橙色暗紫色粗大微细微细粗大大小都有少数多数多数充满核上也有形态4/17血液学.97/3/252.白细胞的功能产生人体免疫机能，直接攻击外来细菌或产生抗体抗源反应。正常值：４０００──９０００／µL单核球T型淋巴球(细胞性免疫)B型淋巴球(体液性免疫)细菌抗体*嗜酸性球协助产生抗体情报通信侦察直接攻击包围产生3。异常举例：艾滋病：患者体内无淋巴球。白血病：患者体内白细胞数量增加但功能不正常（恶性增殖）。异常：正常情况下，静脉血中幼稚细胞量极少，当异常时，幼稚细胞量增加，当大于１％时，应马上检查。C.血小板（ＰＬＴ）１。作用：阻止出血特征：容易凝结（不稳定性）正常值：１５万──４０万／µL止血过程：血小板在血管内壁附着；相宜凝结止血后产生血塞，以后慢慢溶解2．异常举例：再生不良性贫血:血小板数量少,或者血小板附着力差.可进行成份输血.5/17血液学.97/3/25血球计数器基本原理一·血球计数器主要检测项目进行ＣＢＣ分析：ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＨＣＴ，ＨＧＢ，ＰＬＴＭＣＶ，ＭＣＨ，ＭＣＨＣ二·基本原理：A.粒子检出原理:１。Ｏｈｍ’ｓ法则（ＤＣ检出法、电气抵抗变化检出）：E(电压)＝Ｉ（电流）＊Ｒ（电阻）由于血液内各种细胞及颗粒的大小不同，加压后电阻大小也不同，然后转换成脉冲信号输出，即可得知数量、大小等数据。适用：白细胞、红细胞、血小板的数量、形态及分类装置：6/17血液学.97/3/252.激光散乱光荧光检出方式(Flowcytemetry):装置：优点:适宜于各种细胞的分析，应用广泛,例如白细胞五分类(需用特殊试剂).缺点:激光如果用半导体产生,则输出强度较低;如果用GasLaser产生,则使用寿命较短,更换后调整麻烦.以上两种情况将导致成本上升.3.交流(电阻)检出方式:装置:以交流电作为输入信号.优点:可得到细胞内核的信息,颗粒上的情报(信息)，维修率低，不需精密的（光线）调整。缺点:制造困难,要求波的信号稳定;不易得到细胞的外部大小信息.7/17血液学.97/3/25B.HCT体积测定原理:1.手工检测HCT红血球容积—毛细管法内径:1mm100%长度:10cm吸入检体l1离心器用计算板45%l20%2.用血球计数器检测HCT:Hct值=(红血球总体积/血液总体积)*100%=A*Σhk将标本5万倍稀释后,通过检测器孔时,产生信号波,将信号波的大小加总,乘以一常数,即得Hct的值8/17血液学.97/3/25C.HGB浓度的测定原理:比色分析法:1.装置:光电变换灯泡标本滤光器受光器Hgb多少影响Hgb浓度,影响光透过的强度,最后通过光电变换即可测定Hgb浓度.①空白结果(Blank);②标本结果(Sample);③实际结果(Real)=(Sample-Blank);9/17血液学.97/3/25D.定量方法:1.浮球式定量器(东亚专利):(绝对定量)优点:检出器小孔有微量堵塞不影响结果;缺点:定量不可改变2.水式定量器:(绝对定量)优点:成本低，检出器小孔有微量堵塞不影响结果。缺点:内壁水位下降时,可能遗留水滴,易导致稀释倍率、传感器失误,结果不如浮球式准确.3.吸引量=流速*时间：（相对定量）优点：成本很低缺点：由于流速不能保证，因此极易影响吸引量的准确性．4.注射式定量器：（绝对定量）优点：马达转速控制简单，流速、定量都可改变．多用于高档仪器微量定量．缺点：成本高，密封引起的磨损问题不易解决，需要定期维修保养。10/17血液学.97/3/25Ｅ．血液定量方法１．旋转阀ＳＲＶ（SampleRotorValve）:优点:故障率低.血液吸引管内的一点点堵塞不影响定量，由于取的是中段血，血液定量很稳定．缺点:血液样品有浪费,需要血液量较多,制作成本高.2.注射式:优点:马达转速控制简单，流速、定量都可改变,用于微量血液定量，需要血液量较少,成本低.缺点:密封问题较难解决,2-3年需更换密封装置.3.薄膜泵(DP方式):优点:耐用,稳定,4-5年也不需更换;缺点:不容易控制容积,需正、负压,成本较高.11/17血液学.97/3/25F.红细胞的主要公式:1.MCV(平均红细胞容积)MCV(fl)=Hct(%)×10Rbc(×106/µL)2.MCH(平均红细胞血红蛋白浓度)MCH(pg)=Hgb(g/dL)×10Rbc(×106/µL)3.MCHC(平均红细胞中血红蛋白容积浓度)MCHC(g/dl)=Hgb(g/dL)×1000Hct(%)4.三项指标标准数值范围:MCV:80-100fLMCH:28-32pgMCHC:32-36g/dL5.异常举例:①MCV高,MCHC低可能Hct高②MCV正常,MCHC高可能Hgb高可能稀释倍率太大,导致Hct及Rbc都降低.6.其他指标列举:W-SCR（白细胞小型细胞率）,W-LCR（白细胞大型细胞率）,W-MCR（白细胞中型细胞率）,W-SCC（白细胞小型细胞数）,W-LCC（白细胞大型细胞数）,W-MCC（白细胞中型细胞数）,,P-LCR（血小板小型细胞率）,MPV（平均血小板容积）,RDW（红细胞分布曲线宽度）,PDW（血小板分布曲线宽度）12/17血液学.97/3/25G.小结1.RBC,WBC,PLT,HGB,MCV,MCH,MCHC的主要机能、正常值范围及计算公式:项目主要机能正常值计算公式RBC搬运氧气400-600万/µl───WBC免疫4000-9000/µl───PLT阻止出血15-40万/µl───Hgb吸收氧气及铁分11-18g/dl───MCV------80-100flHct/RbcMCH------28-32pgHgb/RbcMCHC------32-36g/dlHgb/Hct2.RBC,WBC,PLT,HGB的检测方式、使用试剂及稀释倍率:项目检测方式使用试剂稀释倍率RBCDC(电阻)检测方式稀释液25000-50000WBCDC(电阻)检测方式稀释液、溶血剂250-500PLTDC(电阻)检测方式稀释液25000-50000HGB比色方式稀释液、溶血剂250-500z半自动简单的血球计数器只是一种试剂(WBC、HGB兼用)zWBC三分类以上的机器大部分WBC与HGB所用溶血剂不同（白细胞使用溶血剂，是为了三分类或五分类时，使一部分白细胞内细胞质缩小，改变原来形态;另外的白细胞不改变原来形态；而血红蛋白使用溶血剂，将彻底破坏白细胞及红细胞）3.定量方法小结:使用场所方式浮球式定量器标本计数水式定量器注射式定量器流量＝流速Ｘ时间自动试剂分注ＤＰ方式（稀释液、溶血剂）注射式血液定量注射式SRV旋转阀13/17血液学.97/3/25H.粒度分布曲线分析1·红细胞粒度分布曲线分析：A：MCV正常时，红细胞的粒度曲线，此时，曲线最大值约为９０ｆＬ；Ｂ：贫血时，由于红细胞内缺乏ＨＧＢ，红细胞小型，使曲线左移；Ｃ：当有大量未成熟红细胞在静脉血中时，红细胞大型，曲线右移；输血后，红细胞粒度曲线可能如图所示，有２个顶部，应该视为正常现象。2·血小板粒度分布曲线分析：正常血小板粒度分布曲线　　　　　　有小灰尘（２~３μ）时，粒度分布曲线血小板凝集时,粒度分布曲线14/17血液学.97/3/25此图为小型红细胞对血小板曲线干扰曲线图,机器可以认为A为PLT,B为RBC,由于C为RBC,D为PLT,C不一定等于D,因此,机器所示数值不一定准确,这时候最好用手工方法检查.3.白细胞粒度分布曲线A:白细胞二分类时,粒度分布曲线;B:白细胞三分类时,粒度分布曲线;白细胞三分类时,需要使用特殊溶血剂,以减少单核球的细胞质,及降低核的密度,故MONO位于LYMP与NEUT之间.此图为没有用特殊溶血剂的粒度分布曲线,不易进行三分类.血小板凝集时，对淋巴曲线干扰较大当溶血不良，肝病及婴儿血液时，曲线乱七八糟15/17血液学.97/3/25血液分析仪Ａ．血液分析仪的异常发现限度机器手工异常报告正常报告异常真正异常（ＴＰ）假伪正常（ＦＮ）正常假伪异常（ＦＰ）真正正常（ＴＮ）Ｔ：Ｔｒｕｅ（真）Ｆ：Ｆａｌｓｅ（伪）Ｐ：Ｐｏｓｉｔｉｖｅ（异常，阳性）Ｎ：Ｎｅｇａｔｉｖｅ（正常，阴性）注：１．手工指由专家确认的手工检测结果；２．要尽量减少假伪正常与假伪异常的检测结果；３．假伪正常与假伪异常都应该尽量低但两者调整方法有矛盾．４．假伪正常数量应尽量低（５％以下），可通过提高仪器灵敏度实现，但这时FP更高．5．假伪异常可稍高（大约３０％），通过降低仪器灵敏度实现，但这时FN更高;6．假伪正常数值高,检测员忽视异常结果的可能性增加,导致误诊的可能性;7．假伪异常数值高,将导致手工再检查数量增加,影响工作效率;8．以上限度百分比根据普通检测员异常发现的能力限度制定．Ｂ．Ｈｇｂ水路图＊这里的ＳＶ都比较简单，为Ｐｉｎｃｈ阀．＊ＳＶ３故障较多．(阀为小型阀,管子内径很小)＊空白报警（ＡｉｒＢｕｂｂｌｅ）：正常范围：３０００－４０００(F820,F800)高限：７０００－８０００（报警）(F820,F800)低限：５０以下（报警）16/17血液学.97/3/25１．Ｈｇｂ检测水路Ｐｉｎｃｈ阀开关顺序：ＳＶ１ＳＶ２ＳＶ３冲洗ＯＮＯＮＯＮ标本吸引ＯＮＯＦＦＯＦＦ２．Ｈｇｂ检测步骤：①用稀释液冲洗；②稀释光电变换（空白调整）；③标本吸引；④标本光电变换；⑤Ｒ＝Ｓ－Ｂ；⑥用稀释液冲洗；３．异常分析：（１）．空白光电变换数值