302.2.1 动物细胞培养和核移植技术

•1、植物繁殖的新途径有哪些？•2、作物新品种的培育途径有哪些？•3、进行植物组织培养获得脱毒苗取材部位？•4、微型繁殖的特点•5、什么是人工种子•6、单倍体育种的优点复习回顾动物细胞工程动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术动物细胞核移植动物细胞工程常用技术一、动物细胞培养1、概念从动物机体中取出相关的组织，将它分散成，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞和。单个细胞生长增殖2.过程取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞结合课本P45图2-16（1）动物细胞培养，为什么常选用幼龄动物？（2）动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶，其作用是？健康动物（常为幼龄动物）辅导书P34基本概念•[思考1]进行动物细胞培养为何常选用幼龄动物组织或胚胎作培养材料？动物细胞培养需要脱分化吗？•提示幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力很强，更易于培养。动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变弱，失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。特别提醒•(1)动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶，第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞，第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。•(2)原代培养与传代培养的分界点为分瓶培养时。思考2：1）在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？说明动物细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？1)胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的蛋白质成分酶解，获得单个细胞。蛋白质不行。胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当PH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜PH为7.2—7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。2)胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。②营养无机物：无机盐、微量元素等。有机物：糖、氨基酸、、等。③温度和pH温度：±0.5℃哺乳动物pH：④气体环境O2：所必需的CO2：维持培养液的促生长因子血清、血浆36.57.2～7.4细胞代谢pH3、条件①无菌、无毒的环境：对培养液和所有的进行无菌处理。培养用具课本P46讨论加血清的原因：辅导书P34说明4、应用①生产生物制品：如病毒疫苗、干扰素、等。②应用于基因工程：是基因工程技术中常用的。③应用于检测，判断某种物质的毒性。④用于等方面的研究，如筛选抗癌药物等。单克隆抗体动物细胞受体细胞有毒物质生理、病理、药理5、植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白1．概念将动物的一个细胞的，移入一个已经去掉细胞核的中，使其并发育成一个，最终发育为动物个体。2．分类包括移植和移植，其中移植较易成功。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物细胞核卵母细胞重组新的胚胎胚胎细胞核体细胞核胚胎细胞核3．过程以克隆高产奶牛为例课本P48图2-21辅导书P35名师点睛2.思考题１、进行体细胞核移植之前，为何要去掉受体卵母细胞的核？为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？10代以内的细胞保持一般保持正常二倍体的核型，未突变3、细胞核移植生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞特别提醒(1)克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同，但不是完全相同，因为：①克隆动物的细胞质遗传物质来自于受体卵母细胞的细胞质。②生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。③个体发育过程中，遗传物质可能会发生变异。(2)核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核遗传物质与供体的相同，属于无性繁殖，不会改变生物体的基因型。4．应用前景(1)加速家畜进程，促进优良畜群繁育。(2)保护濒危物种。(3)转基因克隆动物可作为，生产许多医用蛋白。(4)转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。(5)人的核移植经诱导分化，形成相应的组织、器官后，可以用于组织器官的移植。(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。遗传改良生物反应器胚胎干细胞5．存在问题(1)成功率非常(低/高)。(2)绝大多数克隆动物还存在问题。(3)克隆动物食品的安全性存在争议。低健康•一、动物细胞培养•1、概念•2、过程•3、培养条件•4、应用•二、动物体细胞核移植和克隆动物•1、动物核移植的概念与分类•2、体细胞核移植的过程•3、体细胞核移植技术的应用前景•4、体细胞核移植技术存在的问题小结：