中国水产科学研究院科技进步奖申报书

+附件2：中国水产科学研究院科技进步奖申报书一、成果基本情况院登记号：申报单位登记号：成果名称草鱼“四联”疫苗免疫推广主要完成人华长生、黄远南、林兴榕、黄清梅、杨水娥、黄健彬、揭水龙、江火良、江志煊、李吉明主要完成单位连城县畜牧兽医水产局连城县水产技术推广站申报单位连城县畜牧兽医水产局联系人华长生电话[e-mail]申报类别□科技创新■转化推广申报等级二等奖申报日期2011年6月13日-2-项目来源福建省渔业科技入户示范工程研制起止时间起始时间：2008年3月1日完成时间：2011年3月5日组织鉴定单位和时间福建省海洋与渔业厅科技外经处成果应用于生产时间起始时间：2008年03月01日建议密级公开批准密级成果主题词（不超过20个汉字）草鱼免疫四联推广-3-内容提要草鱼养殖因其生长速度快,市场销量大,深受养殖户欢迎,但随着养殖方式由粗放向精养发展,水产养殖生产经营者多以追求产量和近期经济效益为目标,养殖密度过高,保护养殖水域环境观念淡薄,以草鱼为主养殖病害呈逐年加重之势,药物滥用现象较为普遍,导致其生长水域环境遭受破坏和水产品质量下降。长期以来，影响草鱼产量和效益的根本原因就是号称“四大杀手”的病毒性出血病、烂鳃病、肠炎病、赤皮病，俗称草鱼“四病”。为了有效控制草鱼“四病”的发生，我们在连城县的重点高产养殖区域进行了一次草鱼出血病冻干细胞疫苗与细菌性“三联”灭活疫苗(简称草鱼“四联”疫苗)的免疫接种试验推广。2008-2010三年间，连城县实施“福建省渔业科技入户示范工程”，草鱼“四联”免疫以农业“五新”技术之一被引入，经过近三年的试验推广，“四联”免疫技术在连城周边迅速普及，辐射龙岩、三明等地。2008年以来，该项技术的推广使用覆盖连城县1.7万亩养殖面积，辐射周边清流、三明、长汀等县市养殖面积约5万亩。覆盖面积达到所在地养殖面积的95%以上，年平均注射草鱼4000万尾，免疫率达到98%以上。经统计，使用该项技术后，草鱼养殖成活率提高20%以上，大大提高了草鱼抵抗疾病的能力，有效地抵御病害的侵害，对试验塘的整体保护力达到96.65%。效益方面，按平均成活率提高20%计算，这项技术带来的经济效益年均超过2000万元。-4-二、当前国内外同类先进技术概况我国草鱼的免疫技术起始于20世纪70年代，珠江所草鱼“土法”疫苗开创了我国鱼类病害免疫先河。80年代，我国第一个渔用活疫苗—草鱼出血病细胞弱毒疫苗出现，此后细菌性疾病疫苗相继出现。免疫疫苗在江西、广东、福建等地均有使用，目前使用较多的为单种疫苗或者二、三种疫苗结合，并且使用范围较小，较多在养殖场使用。本项目“四联”疫苗，在珠江水产研究所研制出该疫苗后就开始在我县试验推广，并大规模推广，这在国内处于领先水平，在农业“五新”技术推广中具有一定的代表性。-5-三、申报成果的详细内容及申报理由1.成果的主要技术内容一、技术路线1、原理在低温情况下（8℃-20℃），草鱼的新陈代谢能力较弱，通过注射接种途径可使草鱼鱼种获得新的免疫抗原剂量，经过5-30天的低温（10℃-15℃）诱导，使注射过的草鱼鱼种完成初次免疫能力，在水温提高到20℃以上时草鱼的免疫抗病水平能得到迅速加强，从而达到减少草鱼发病机会的目的。2、方法（1）时间选择。选择在水温为8℃～22℃的冬春季进行，秋片鱼种选择在7月份高温前，尽量选择水温较低的3月进行，这有利于水霉病的预防。已感染患病的草鱼不宜进行注射免疫。（2）鱼种准备。规格在8厘米以上的健壮无病的草鱼鱼种均可实行免疫注射，注射前用0.5%的食盐水溶液对鱼种进行消毒处理，时间控制在5-10分钟。为了便于生产操作，可用敌百虫水溶液对鱼种进行麻醉处理。（3）工具选择。注射器、针头以及稀释器皿须用75%的酒精消毒或用开水煮沸消毒。规格在10厘米以下的鱼种一般选用4.5#或5#注射针头，规格在11厘米以上的鱼种一般选用5.5#或6#注射针头，规格在15厘米以上的鱼种一般选用7#注射针头。为了防止注射时入针太深伤及鱼体内脏，可在注射针头上套一小截塑料管，暴露出的针尖长度略长于鱼体腹肌厚度。（4）疫苗稀释。浓缩液在使用前先用0.65%生理盐水稀释10倍，一瓶稀释好的疫苗尽可能一次用完，如一次用不完，可用注射器抽取需要量使用，抽取后用医用胶布封住针眼。（5）注射部位及剂量。在腹鳍基部注射，针头与鱼体成45度刺入鱼体。规格在10厘米以下的鱼种每尾注射0.5毫升稀释后的疫苗，规格在10～15厘米的鱼种每尾注射0.5～1毫升稀释后的疫苗，规格在16厘米以上的鱼种每尾注射1毫升稀释后的疫苗。二、关键技术1、疫苗保存（1）免疫方法:有口服免疫、喷雾免疫、浸泡免疫和注射免疫，我县主要采取注射免疫。注射免疫适用于当年规格较大的鱼种或越冬后的一龄草鱼种，饲养商品鱼发病率低，其效果明显，防病治病用药量减少，免疫期长达14个月，在饲养过程中无需停食控制疫病引起的暴发性死亡。（2）疫苗选择：水科院珠江水产研究所自主研发的草鱼出血病活疫苗（GCHV-892株）和使用细菌性“三病”致病菌株纯培养物热灭活疫苗，加适量增效剂混合配置而成的多联灭活疫苗。（3）疫苗保存：鱼苗的生产具有一定季节性，需有计划地购置疫苗储备，出血病活疫苗-4℃保存，保存期4个月。灭活疫苗在4-8℃的保鲜柜内，保存期一年，保存期间可能有絮状物沉淀，经摇动分散后不影响使用效果，但疫苗液体发黑，有恶臭味，不能使用。（4）疫苗的配置：疫苗配置是免疫成功的技术关键，根据近几年不同疫苗或同一厂家的疫苗，免疫效果观察，其效果差异很大，有的甚至免疫失败，使养鱼户对免疫防治技术失去信心，推广面不普及。因此需要严格控制疫苗稀释浓度，一般浓缩疫苗每瓶100毫升，使用时用生理盐水稀释5到10倍，3-6寸鱼种每尾注射0.3-0.5毫升，7寸以上每尾注射0.5-1毫升。鱼种大小不同，注射的计量不同，草鱼获得的有效抗原不同，形成免疫效果的差异。借鉴畜禽免疫成功的经验，一般畜禽疫苗是不分体重大小定量注射疫苗。一般每瓶浓缩疫苗定额注射鱼种1000-6-尾左右，3-5寸的鱼种平均每尾注射0.4毫升，以1000尾计算稀释总量400毫升，再加10%的损耗，配置成稀释疫苗450毫升为宜。（5）鱼种要求：凡10厘米以上规格或每斤15尾以内的当年或越冬鱼种都可注射免疫，鱼种过小不便于操作，过大活动力过强，每立方米水体可用1.5-2克的晶体敌百虫溶液浸泡麻醉后注射。以每斤5尾规格的鱼种操作注射最方便快捷，无需麻醉浸泡。要求鱼种体质健康无病，捕捞运输前停食半天以上，适应高度密集。（6）注射时间：水温在10℃-20℃时均可免疫，水温过高容易造成鱼体伤亡，草鱼的致病菌在水温22℃开始流行，有潜伏致病菌，免疫接种后可能导致短期内发病。实际生产很难预料。（7）注射部位：注射部位可沿背鳍或腹鳍基部注射。注射免疫是逐尾进行，要求轻、快、稳、准快速注射，以沿背鳍基部45°的角度向头部方向进针最为准确快捷，损伤鳞片少。在快速注射情况下，腹部注射容易刺伤内脏不宜采用。（8）器具准备：选用金属连续注射器，畜禽注射针头最小号针杆也较粗，用于鱼体注射后针孔不容易封闭，药液容易流失。宜选用7号人用注射针头，将针杆前端剪断成8毫米长，磨尖即可使用。注射期间因针头折断，堵塞和调节注射剂量大小，需备尖嘴钳数把。注射时装鱼和消毒用的塑料大盆。其具体数量以放养量确定，以放养3万尾草鱼为例，为保证注射速度，两人一组共分3组注射，需备注射器10把，其中4把作为备用，以便损坏更换，影响注射速度；针头因折断堵塞需备20颗以上；尖嘴钳3把；塑料大盆6个；小凳6把；捞海和暂养网箱各2只；配药用的50毫升和1000毫升量杯各一个；长时间握注射器的手掌容易起水泡，需备软橡胶手套6双；防水袖套、围裙、水靴各6套。（9）注意事项：注射时需注意以下几方面事项，以免造成不必要的伤亡。a从暂养网箱捞鱼到注射装鱼大盆内，每次装鱼量不超过大盆的二分之一，以每次5到8分钟注射完为宜，以免损伤鳞片和粘液。b同一批鱼种根据平均规格，确定注射剂量，在注射过程中如偏小规格鱼种过多，要及时重新调整注射剂量，以免药液通过注射的压力冲向头部脑颅内，使鱼体失去平衡或脑积水而死亡；小规格鱼种不多，熟练的注射人员可以通过手感控制注射剂量。c正确选择和使用消毒药品：注射后的鱼种需浸泡消毒后放养，避免外伤感染，由于是逐尾注射，消毒时间长短不一。用食盐浸泡虽然比较安全，但盐度过重使鱼体渗透压失去平衡，鱼体变淡发白，体液分泌失调，放养后会失去平衡，沉入池底，一般以人的舌尖感觉有咸味为准。使用敌百虫浸泡麻醉或杀虫消毒，浸泡时间过长，会使鱼体颜色变深，放养后沉入池底，使鳃丝附着淤泥，缺氧造成大量死亡，最好不使用；确需使用敌百虫浸泡，放入网箱内恢复正常后再放入鱼池。浸泡药品应选用刺激性小的药品，如纯中药五倍子（商品名称水霉灵），可防治外伤和水霉感染，纯中药制剂的鱼广灵，即可杀灭原虫、外伤和水霉感染，安全浓度高。d效应期管理：免疫产生的时间随水温的升高而缩短，10℃时需30天，15℃时20天，当水温20℃以上时只需4天，因捕捞、注射损伤鱼体，一般在7-10天有一次防病过程，需采用常规消毒1至2次即可得到控制。效应期内不得内服抗生素。三、推广方案免疫技术以“水产技术推广站+渔业专业合作社+养殖户”方式推广。在推广之前，先在渔业主产区莲峰、隔川、文亨、北团等乡镇选择10户规模养殖户进行试验示范，试验取得成功后由县水产技术推广站组织各乡镇水产干部、渔技员、规模养殖户参加县举办的“水产免疫技术”培训会，对免疫技术进行宣传及培训指导。会议结束后以渔业专业合作社牵头，对免疫的推广工作进行组织、协调，包括统一购买免疫疫苗、注射器具药物器具等，技术人员也由合作社进行组织调配，由各村渔技员及经验丰富的养殖户组成，以互助或给付适当务工补贴方式完成免疫工作。-7-2.成果的重要技术参数与国内外已有同类先进技术全面对比情况成果水平：A、国际领先B、国际先进C、国内领先D、国内先进E、行业先进草鱼免疫疫苗从上世纪70年代研制出，开始在江西、广东、福建等地使用，目前使用较多的为单种疫苗或者二、三种疫苗结合，并且使用范围较小，较多在养殖场使用。连城县较早开始使用草鱼免疫疫苗，是最早一批采用注射免疫技术的县城之一，本项目“四联”疫苗，是近年来在“三联”疫苗基础上研制而成的，我县率先引进，并大规模推广，这在国内处于领先水平，在农业“五新”技术推广中具有一定的代表性。-8-3.成果应用与推广情况推广规模（万亩、万尾、万头、万只）6.7万亩主要推广区域莲峰、文亨、隔川、北团新增总投入（万元）480新增纯收益（万元）6000内容叙述：2008年实施渔业科技入户示范工程以来，草鱼免疫技术就以重点“新技术”引入推广。2008至2010年三年间，该项技术的使用覆盖连城县1.7万亩养殖面积，辐射周边的清流、三明、长汀等地养殖面积约5万亩。数量方面，该项技术每年注射草鱼约4000万尾，三年共计约1.2亿尾，按成活率提高20%计算，这项技术带来的经济效益年均超过2000万元。-9-4.成果的经济效益、社会和生态效益情况病毒性出血病与细菌性烂鳃病、肠炎病和赤皮病这4种病发生率高、发病急、死亡量大，很大程度上影响了草鱼的单位产量和效益。草鱼一旦患了传染性疾病，药物治疗效果不稳定，治疗时间长、费用大，且产生一些药物毒性及药物残留，直接危害到水体生态环境的良性循环，甚至危及到人类的健康。本次推广采用的草鱼出血病冻干细胞疫苗与细菌性“三联”灭活疫苗的有效成分稳定，免疫效果显著，可有效防治草鱼“四病”的发生，保证草鱼有健壮的体格来有效地抵御其它病害的危害，对试验塘的整体保护力达到96.65%，达到增产高效的养殖目的。连城县为闽西最大的淡水鱼产地，其中草鱼又是优势品种，在淡水产品比重方面超过60%。该项技术的推广对稳定淡水鱼供应提供了有利保障，为稳定国家粮食安全体系中淡水产品的供给奠定了基础。草鱼免疫技术的使用，疫苗本身来自鱼体，经过灭活后无感染力，不存在药物残留、重金属超标等使用其它药物产生