食品分析检验员培训

化学与制药工程学院第一节样品的采集与处理一、样品的采集1.采样的意义及要求采样：从整批被检食品中抽取一部分有代表性的样品，供分析化验用。采样的正确与否，是检验工作成败的关键。采样的要求：（1）采样时，必须注意样品的代表性和均匀性，以确保所采集样品能代表整个供试材料的平均组成。（2）采样时，要认真填写采样记录，写明样品的生产日期、批号、采样条件、方法、数量、包装情况等。同时注意其运输及保管条件，并填写检验目的、项目及采样人。2、采样的数量和方法（1）样品的分类检样：从整批待测食品的各个部分所采取的少量样品称为检样。原始样品：把质量相同的许多份检样综合在一起称为原始样品。平均样品:原始样品经过处理再抽取其中一部分供分析检验用，称为平均样品。（2）采样的数量采样的数量应能反映该批食品的卫生质量和满足检验项目对试样量的需要，一式三份供检验、复检和备查用，每份不少于0.5kg。（3）采样的方法采样的一般方法：随机抽样：不带主观框架，在抽样过程中保证整批食品中的每一个单位产品都有被抽取的机会。简单随机抽样系统随机抽样分层随机抽样阶段随机抽样具体样品的抽取方法①有完整包装的食品，首先根据下列公式确定取样件数2Nnn为取样件数，N为总件数。a.固体样品：用双套回转取样管插入包装中，回转180°取出样品。每一包装须由上、中、下三层取出三份样品，把许多份检样综合起来成为原始样品，再按四分法缩分至所需数量。b.稠的半固体样品：动物油脂、果酱等，启开包装后，用采样器从上、中、下三层分别取出检样，然后混合缩减至所需数量。c.液体样品：如鲜乳、酒或饮料等，充分混匀后采取一定量的样品混合。②散装固体样品：先化分为若干等体积层，然后在每层的四角和中心分别用双套回转取样管采取一定数量的样品，混合后按四分法缩分至所需数量。③肉类、水产、果品蔬菜等组成不均匀的食品：由被检物有代表性的各部位分别采样，经捣碎、混匀后，再缩减至所需数量。④罐头、瓶装食品或其他小包装食品：根据批号连同包装一起采样。同一批次取样数量，250g以上包装不得少于3个，250g以下包装不得少于6个。3、采样的注意事项•采样时要认真填写采样记录。•采样的数量一般三份供检验、复查和备查用，每份不少于0.5kg。•采样工具应该清洁，不应将任何有害物质带入样品中。•样品在检测前，不得受到污染、发生变化。•样品抽取后，应迅速送检测室进行分析。•盛装容器可根据要求选用硬质玻璃或聚乙烯制品，容器上要贴上标签，并做好标记。第二节分析试样的制备及分解一、样品的制备指对所采取的样品进行分取、粉碎、混匀等过程。1、常规食品样品的制备（1）液体、浆体或悬浮液体一般将样品充分摇匀和搅拌均匀即可。（2）互不相溶的液体如油和水的混合物，可分离后再分别取样测定。（3）固体样品采用切碎、捣碎、粉碎、反复研磨等方法将样品研细并混合均匀。注意：防止易挥发性成分的逸散和避免样品组成及理化性质发生变化2、测定农药残留量时样品的制备（1）粮食充分混匀后用四分法取20g粉碎，全部过0.4mm筛（2）肉类除去皮和骨，将肥瘦肉混合取样，每份样品在检测农药残留量的同时还应进行粗脂肪的测定，以便必要时分别计算脂肪与瘦肉中农药的残留量。（3）蔬菜、水果洗去泥沙并除去表面附着水，依当地食用习惯，取可食用部分沿纵轴剖开，各取1/4，然后切碎、混匀。（4）蛋类去壳后全部混匀（5）禽类取半只绞成肉泥（6）鱼取半条绞成肉泥二、样品的预处理1、处理原则（1）消除干扰因素，即干扰组分减小至不干扰被测组分的测定；（2）完整保留被测组分，即被测组分在分离过程中的损失要小至可忽略不计；（3）使被测组分浓缩，以便获得可靠的检测结果；（4）选用的分离富集方法应简便2、常用的预处理方法（1）有机物破坏法①干灰化法将样品在高温下长时间灼烧，是有机质彻底氧化破坏，生成CO2和H2O逸出，而与有机质结合的金属部分则变成简单的无机化合物。灰化温度:500℃~600℃灰化时间:以灰化完全为度，一般4~6h。优点：破坏彻底，简便易行、消耗药品少。缺点：破坏温度高、操作时间长，已造成某些元素的损失②湿消化法向样品中加入强氧化剂（H2SO4、HNO3、H2O2、KMnO4）并加热消煮，使有机物氧化破坏的方法。优点：加热温度低，减少了低沸点元素挥发散失的机会。缺点：产生大量酸雾和刺激性气体，对人体有害注：常用强酸的混合物作为溶剂与试样一同加热煮解，如硝酸-硫酸，硝酸-高氯酸，硝酸-高氯酸-硫酸，高氯酸（过氧化氢）-硫酸等（2）溶剂提取法利用混合物中各物质溶解度的不同，将混合物组分完全或部分分离的方法称为溶剂提取法。浸提法用液体溶剂浸泡固体样品以提取其中溶质的方法。要求：提取剂既能溶解被测物质，又不破坏被提取物质的性质和组成。提取剂：无机溶剂：水，稀酸，稀碱有机溶剂：乙醇，乙醚，氯仿，丙酮，石油醚仪器：索氏抽提器萃取法：利用被提取组分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而与其他成分分离的方法称为萃取法。溶剂：选用的溶剂应与溶液中原溶剂互不相溶，且对被测物质有最大的溶解度，而对杂质有最小的溶解度。仪器：分液漏斗，少量多次（4~5次）（3）挥发和蒸馏分离法挥发和蒸馏是利用物质的挥发性的差异进行分离的一种方法。可以用于除去干扰组分，也可以使被测组分定量分离出去后再测定。常压蒸馏：适用于被测组分受热不易分解的或沸点不太高的样品。减压蒸馏：用于常压蒸馏容易使被测组分分解的或沸点太高的样品。水蒸气蒸馏：用于被测组分加热到沸点时可能分解；或被蒸馏组分沸点较高，直接加热蒸馏时，因受热不均易引起局部炭化的样品。（4）色层分离法（5）离子交换分离法（6）沉淀分离法（7）皂化法和磺化法：处理油脂或含脂食品常用的分离方法（8）浓缩食品样品经提取、净化等处理后，有时试液的体积很大、待测组分的浓度很低，因此在测定前须进行浓缩，以提高被测组分的浓度。常压浓缩法：主要用于待测组分为非挥发性的样品溶液的浓缩。减压浓缩法：主要用于待测组分为对热不稳定或易挥发的样品溶液的浓缩。1、样品采集后应于当天分析，以防止其中水分或挥发性物质的散失以及待测组分含量的变化。2、不能使样品出现受潮、挥发、风干、变质等现象，以保证测定结果的准确性。3、制备好的平均样品应装在洁净、密封的容器内，必要时贮存于避光处，容易失去水分的样品应先取样测定水分。第三节样品的保存4、容易腐败变质的样品可用以下方法保存：（1）冷藏短期保存温度一般以0℃~5℃为宜。（2）干藏根据样品的种类和要求采用风干、烘干、升华干燥（冷冻干燥）等方法。（3）罐藏不能即时处理的鲜样，在允许的情况下可制成罐头贮藏。5、一般样品在检验结束后应保留一个月以备需要时复查，保留期从检验报告单签发之日起开始计算；易变质食品不予保留。保留样品加封存入适当的地方，并尽可能保持原状。要求：1、掌握定性及定量分析实验的基本原理和条件；对简单的实物样品会选择适当的方法并能独立完成分析方案的设计；能获得可靠的分析结果。2、在实验中能根据准确度的要求，正确地选择合适精度的仪器，并能做到该精确就精确，该粗略就粗略，处理得当。3、培养严谨的科学态度和良好的实验工作习惯。从进入分析化学实验室开始，对公用和个人的仪器从摆放到使用都要求规范化；实验现象和数据的记录要准确，要实事求是，要有条理。原始数据必须记在记录本上，不准涂改。4、能正确地表示分析结果及处理有关数据第四节化学分析实验技能及其操作规范一、化学分析仪器的洗涤及洗液的配制和使用1、分析仪器的洗涤一般的玻璃仪器先用自来水冲洗，用试管刷蘸洗涤剂刷洗。带刻度的容量器皿，为了保证容积的准确性，一般不宜用试管刷刷洗，应选用适当的洗液来洗。2、洗液的配制和使用（1）铬酸洗液：洗涤不宜用毛刷刷洗的器皿，可洗油脂及还原性污垢配制方法：10g工业用K2Cr2O7固体于烧杯中，假如30mL热水，溶解后冷却，在搅拌下慢慢加入170mL浓H2SO4，溶液呈暗红色，贮存于细口玻璃瓶中备用。（2）NaOH-KMnO4洗液用于洗涤油脂及有机物配制方法：称取KMnO44g，溶于少量水中，在搅拌下慢慢地加入100mL10%NaOH溶液即成。（3）肥皂液、碱液洗涤液用于洗涤油脂和一些有机物。（4）还原性洗涤液用于洗涤氧化性杂质如草酸，盐酸羟胺（5）HNO3洗涤液洗液是一种化学处理方法，要充分应用已有的化学知识来处理实际问题。二、定性分析实验技术1、定性分析试剂、试液的存放和取用2、定性分析主要仪器的规格和使用（1）离心试管（2）点滴板（3）表面皿（4）试剂瓶（5）滴管（6）离心机3、定性分析实验技术（1）试剂的取用（2）溶液酸碱性的检查及溶液酸化处理（3）沉淀及沉淀完全的检查（4）离心沉降（5）离心液的转移（6）沉淀的洗涤（7）沉淀的移取和溶解（8）加热和蒸发（9）纸上点滴反应（10）气体的检验（11）焰色反应三、分析天平和称量1、天平的使用规则2、称量（1）递减称量法（2）固定重量称量法电子天平（1）增量法（2）减量法四、重量分析技术1、沉淀操作2、沉淀的过滤和洗涤3、坩埚的恒重4、沉淀的包裹、烘干、炭化和灼烧5、干燥器五、滴定分析技术1、滴定管的组装、校正和使用2、容量瓶的相对校正和使用3、移液管、吸量管的使用4、溶液的配制和标定六、固体样品或基准试剂的干燥处理一、简介：三聚氰胺（melamine）简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。三聚氰胺含氮量为66.6％，折合成粗蛋白含量为416.27%，加入宠物饲料和牛奶中可以大幅提高蛋白质测定表观含量，但食用后可诱发肾衰竭并导致死亡，因此一直禁止在饲料和食品中使用。2007年，国内外发生多起宠物因食用添加了三聚氰胺的宠物食品而致死的例子，大量相关产品被召回。2008年9月，国内发生奶粉中三聚氰胺导致婴幼儿肾结石和肾功能衰竭甚至死亡的恶性事件。食品中三聚氰胺的测定方法二、试剂甲醇：色谱纯。乙腈：色谱纯。氨水：浓度25%-28%.饱和乙酸铅溶液氨水-甲醇溶液：量取5mL氨水，溶解于100mL甲醇中。乙腈溶液：75mL乙腈加入25mL纯水，混匀。三聚氰胺标准品（纯度＞99%）。三聚氰胺标准储备液：称取50mg（精确到0.1mg）的三聚氰胺标准品，用乙腈溶液溶解并定容于100mL容量瓶中，该溶液浓度为0.5mg/mL，于4℃冰箱内贮存，有效期3个月。三聚氰胺标准工作液：分别吸取适量标准储备液，用乙腈溶液稀释成浓度为0.05ug/mL、1.0ug/mL、5.0ug/mL、10ug/mL、50ug/mL的标准工作液。三、样品处理:固体样品取样2g，液体样品取样5g，准确加入9mL缓冲液溶液，加入1mL乙酸铅溶液。摇匀，剧烈震荡25min，10000r/min离心5min，取上清液。分别用3mL甲醇，3mL水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，加入2mL（液体样品3mL）上清液上柱。依次用0.1mol/L盐酸水溶液、3mL水和甲醇3mL洗柱，抽近干后用氨水-甲醇溶液3mL洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，残渣用70％乙腈溶解，0.45um滤膜过滤，上机测定。四、样品分析条件ShimadzuLC-MS-2010EV仪器（LC-20AD输液泵，SIL-20AC自动进样器，CTO-20AC柱温箱,LCMSsolution3.2工作站软件）。色谱柱为CAPCELLPAKCR4.6×150mm5um；(Shiseido公司),流速1.5mL/min(约0.3mL/min进质谱)；柱温30℃；进样量为10μL；等度洗脱。流动相:乙睛/10mMNH4Ac(50:50)，HAc调节混合液至pH=3质谱参数:ESI(＋)，Nebulizinggas:1.5L/min;Dryinggas:0.1MPa;CDLTemp：250℃;BlockHeater：200℃;DetectorVoltage:1.6kV五、测定1、扫描方式结果Fig.1标准品色谱图2、标准曲线配制标准溶液0.1ppm，0.5ppm，1ppm，5ppm，10ppm，50ppm分别进样，得到校准曲线如图所示。选择性离子监测方式(SIM)检测m/z127Y=410,165.3X+261,083