中药质量控制新技术

第4章中药安全性质量控制技术研究及应用实例关于中药有毒、无毒的现代认识一、毒的涵义在本草中是一个广义的概念，有毒无毒是指药物对人体有无毒性而言。《周礼》谓：“聚毒药以共医事”，这里的毒药为中药的总称。明代张景岳认为：“药以治病，因毒为能，所谓毒者，因气味之偏也”。中药毒性的含义：毒性即为偏性（药性）以偏纠偏是中药治疗疾病的基本原则用之得当即可发挥治疗作用用之不当则可毒害机体两种误解正确理解中药安全无毒，无不良反应中药有毒，全面禁用中药西药都有不良反应利大于弊者，应用弊大于利者，禁用二、中药安全性的观点国家食品药品监督管理局公布2009年全国不良反应/事件报告638996例。1、不良反应病例中：化学药占86.7%，涉及3100多个品种。中药占13.3%，涉及2600多个品种化学药不良反应中，注射剂占61%。中药不良反应中，注射剂占52%。2、说明：化学药（西药）的不良反应超过中药。注射剂的不良反应超过口服药西药注射剂的不良反应超过中药注射剂例1反应停不良反应近10000例（海豹儿）死亡近5000例三、举例说明例22007年美国FDA对十大药品发出最严重的“黑框警告”药品销售额(美元)主要不良反应处理抗抑郁药，包括舍迪林、氟优沙明等2006年206亿服药后出现自杀倾向黑框警告红细胞生成类药品2006年66亿中风、心肌梗塞、死亡黑框警告再普林2006年44亿代谢障碍、肥胖2006年赔偿7亿美元，2007年又赔偿5亿美元文迪雅2006年34亿心脏病发作及死亡率增高黑框警告，并有两药厂吊销此药生产艾可拓2006年30.5亿增加心力衰竭风险黑框警告另有5种畅销药被黑框警告，或被召回或停产小柴胡汤“肺炎”马兜铃酸“肾衰”鱼腥草注射剂“过敏性休克”双黄连注射液“中毒死亡”活血破血中药脏器出血临床严重毒性报道频频中药不良反应事件关于中药毒性的热点问题“马兜铃”的震撼“小柴胡汤”事件的反思“鱼腥草注射液”的风波“马兜铃”的震撼1993年比利时学者首先发现2例女性服中草药减肥治疗后，出现进行性肾间质纤维化，经调查发现该减肥药中加入了防己，患者服用后血肌酐于3个月内升高一倍，肾活检显示广泛间质纤维化。经药物成分分析发现，减肥胶囊中含有马兜铃酸。至1998年在比利时有100人患马兜铃酸肾病。“马兜铃”的震撼比利时学者报告了服用含有马兜铃酸的中草药致急进性肾功能衰竭，并称这种肾脏损害为“中草药肾病(ChineseHerbNephropathy,CHN)”。此后，有关马兜铃酸引起肾脏损害的问题，引起了国内外学者的广泛关注并陆续发表有关研究报告。“马兜铃”的震撼国内学者认为，不宜笼统地将马兜铃类植物引起的肾脏损害称作“中草药肾病”。马兜铃酸(aristolochicacid，AA)是引起CHN的一类药物的主要毒性成分之一，故称为“马兜铃酸肾病”(AAN)较为合适，目前国外学者也应用了这一病名。“马兜铃”的连锁反应中药马兜铃是马兜铃科多年生植物马兜铃的成熟果实。苦、微辛，寒，归肺、大肠经。清肺化痰，止咳平喘。用量不宜过大，以免引起呕吐。中药马兜铃“马兜铃”的连锁反应AA是马兜铃科马兜铃属植物中所含的共同成分，含有或可能含有马兜铃酸的常用中药品种为马兜铃、天仙藤、青木香、广防己、关木通、寻骨风、朱砂莲、细辛等。“马兜铃”的连锁反应含马兜铃酸的常见中成药有：龙胆泻肝丸、耳聋丸、八正丸、纯阳正气丸、大黄清胃丸、当归四逆丸、导赤散、甘露消毒丹、排石颗粒、跌打丸、妇科分清丸、冠心苏合丸、苏合丸、辛荑丸、十香返生丸、济生桔核丸、止嗽化痰丸等。“马兜铃”的连锁反应我国发生了龙胆泻肝丸的“马兜铃酸事件”原因是用关木通替代木通2003年2月28日国家药品监管局发出《关于加强对龙胆泻肝丸监督管理的通知》木通为木通科植物三叶木通Akebiatrifoliata(Thunb.)Koidz.的木质茎藤。功效：泻火行水通血脉。关木通为马兜铃科植物东北马兜铃AristolochiamandshuriensisKom.的茎藤。功效：清心火，利小便，通经下乳。“马兜铃”的连锁反应2002年6月，美国食品药品管理局宣布禁售70多种含马兜铃酸的中成药。香港卫生署发言人宣布：将从2004年6月1日起，停止进口和销售含有马兜铃酸的中药材及其制剂。欧盟、澳洲等国也禁止含马兜铃的中药材及中成药进口。“小柴胡汤”事件“小柴胡汤”事件小柴胡汤出自张仲景《伤寒论》组方：柴胡、人参、黄芩、大枣、半夏、生姜、甘草，共七味药功效：疏畅气机、调和胃肠、和解表里主治：伤寒少阳证。往来寒热、胸胁苦满，苔白，脉弦“小柴胡汤”事件常用于感冒、慢性肝炎、肝硬化、急慢性胆囊炎、胆结石、急性胰腺炎、胸膜炎、淋巴腺炎、胃炎、胃溃疡等国内外研究证明，小柴胡汤对肝癌、肺癌、结肠癌等肿瘤，预防其恶性转化具有一定作用“小柴胡汤”曾风靡日本▲20世纪70年代初期，日本的津村顺天堂制成了小柴胡汤颗粒制剂。▲1976年，日本京畿大学东洋医学研究所主任有地滋教授通过４年研究，在和汉药研讨会上发表了“津村小柴胡汤颗粒对慢性肝炎有治疗效果”的报告，在日本引起不同凡响。“小柴胡汤”曾风靡日本▲此后有21家汉方厂家加入生产开发小柴胡汤行列，对小柴胡汤进行多方面的研究，呈现了空前的小柴胡汤热。▲20世纪70-90年代小柴胡汤在日本是使用最多的药物，广泛地应用于治疗慢性肝炎。估计每年服用小柴胡汤者有100万人，消费金额约90亿～130亿日元。“小柴胡汤”事件1989年12月《日本胸部疾患学会杂志》首次报道了小柴胡汤引起药物性肺炎１例，之后其他报刊也陆续刊登了小柴胡汤引起肝功损伤之类的报道，对间质性肺炎尤为重视。至1999年底，因服小柴胡汤造成间质性肺炎已升为188例，死亡22例。“小柴胡汤”事件1996年3月，日本厚生省在“紧急安全情报”中发出了“关于小柴胡汤严重的副作用——间质性肺炎的警告”。日本厚生省2000年1月14日发出“医药品医疗用具等安全性情报”通令：全面禁止肝炎、肝硬化、肝癌患者使用小柴胡汤。“小柴胡汤”事件的反思药方无错辨证有误。滥用小柴胡汤是造成悲剧的主因。中医治病强调辨证论治。不根据症状反应使用小柴胡汤，又长期服用一个方药，脱离了中医辨证论治理论。“小柴胡汤”事件的反思►中药必须在中医理论指导下应用。►日本的“小柴胡汤副作用死亡事件”实质，是违反了中医辨证论治的原则，违反了中医治病必辨方证的原则。“鱼腥草注射液”风波目前上市的含鱼腥草的注射剂鱼腥草注射液新鱼腥草素钠氯化钠注射液新鱼腥草素钠注射液注射用新鱼腥草素钠复方蒲公英注射液炎毒清注射液鱼金注射液目前在我国有100多家生产企业生产这类产品临床使用主要是抗感染治疗鱼腥草注射液不良反应鱼腥草注射液等7个注射剂在临床应用中出现了过敏性休克、全身过敏反应、胸闷、心急、呼吸困难和重症药疹等严重不良反应，甚至有引起死亡病例报告。鱼腥草注射液不良反应从目前收到的病例报告和文献资料分析表明，含鱼腥草的注射剂与其所引起的过敏性不良反应，存在较明确的关联性。过敏性休克的病例报告来源和涉及企业、批号无明显集中现象，说明过敏反应可能是该类品种的共性问题。2006年6月6日，国家食品药品监管局发出的《关于暂停使用和审批鱼腥草注射液等7个注射剂的通告》2006年9月：国家药监局发出《关于肌注用鱼腥草注射液等注射剂恢复使用申报资料和程序的通知（急件）》（国食药监办〔2006〕461号）常见中药中毒原因1.剂量过大或长期持续服用。2.用法不当，没有按中药的正确用法使用。3.炮制不充分，有毒成分含量过高。4.患者不遵医嘱，自行服药。5.中药品种混乱、有毒药物管理不善。四、中药中的有害物质（一）外源性污染：包括重金属和农药残留；（二）内源性毒性物质：一般是指中药自身的一些毒性次生代谢产物。（一）中药材中重金属元素含量测定技术《中国药典》2010年版（一部）要求，在中药中通常监控的有害重金属主要包括铅、镉、汞、铜、砷等。1.前处理方法1.1湿法消解所谓湿法，是指借助化学反应使固体试样转化为溶液的分解方法。通常是采用单一或混合强酸，在适当的温度下，将样品中的有机成分氧化破坏，使金属化合物转变为离子状态。1.2干法消解（灰化法）该法是通过高温方法将试样中的重金属元素游离。一般是将样品先于小火炭化至无烟，再移入马弗炉中高温灰化完全，冷却，用稀酸溶解灰分，定量转移至量瓶中。1.3压力消解罐消解法（高压密封溶样法）样品仍采用强酸消解，与湿法消解不同的是样品要置于聚四氟乙烯罐内密封，置于烘箱内在一定温度下保持一定时间。1.4微波消解法将样品和相应的试剂放置于高温，高压密闭样品罐或敞口容器中。利用微波加热容器中的消解液，使各样品快速溶解的湿法消化。2.测定方法2.1原子吸收光谱法（AAS）该法已被《中国药典》2010年版收载为测定中药材中重金属的法定方法之一。根据各种元素的性质及原子化的方法不同，该法又可分为火焰原子化法、非火焰原子化法和低温原子化法。（1）火焰原子化法：该法是利用化学火焰使物质分解并原子化的方法。可用于铜、铁、锌、锰、钙等常量元素的检测，缺点是原子化效率不高，火焰中自由原子浓度很低，灵敏度低。（2）非火焰原子化法该法是利用石墨管高温下使样品原子化通过炉内光路产生吸收的原理来测定的。与火焰原子化法相比，石墨炉原子化法样品消耗少，特别适用于分析非常少量的试样，灵敏度高；缺点是石墨管昂贵，不能同时测定多个元素。该法可用于除汞以外的重金属元素测定。（3）低温原子化法该法是利用化学反应方法预处理试样，在室温至摄氏几百度的条件下使其原子化，因此又称为化学原子化法。①冷原子化法：该法专用于汞元素的测定。将样品消解后还原生成汞，在汞蒸气发生器中，用载气将汞蒸气吹出，通过石英吸收池的汞蒸气对汞空心阴极灯的辐射产生吸收，从而进行定量分析。②氢化物原子化法：一般用于铅、砷、汞等元素的测定。将气态分析物引入石英炉内在较低温度下实现原子化的一种方法。它主要是与蒸气发生法配合使用。2.2原子荧光光谱法（AFS）原子荧光光谱是介于原子发射光谱和原子吸收光谱之间的光谱分析技术。它的基本原理是基态原子（一般蒸汽状态）吸收合适的特定频率的辐射而被激发至高能态，而后激发过程中以光辐射的形式发射出特征波长的荧光，通过测定原子荧光的强度即可求得样品中该待测元素的含量。2.3电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）本法为《中国药典》2010年版附录新收载的方法。基本原理是样品由载气引入雾化系统进行雾化后，以气溶胶形式进入等离子体的中心通道，在高温和惰性气氛中被充分蒸发、原子化、电离和激发，使所含元素发射各自的特征谱线。根据各元素特征谱线的存在与否，鉴别样品中是否含有某种元素（定性分析）；由特征谱线的强度测定样品中相应元素的含量（定量分析）。2.4电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）与ICP-AES相比，该法最大的优点是检出限极低，达到了pg.ml-1级的水平。其次分析精密度高、分析速度快、可同时测定含量差别较大的各组分，可用于绝大多数重金属元素的定性分析和定量分析，同时进行多种元素及同位素的测定，是目前痕量元素分析领域中最先进的方法。2.5其他方法（1）比色法：主要用于重金属总量和总砷的测定。（2）紫外分光光度法：该法是利用重金属元素与试剂反应后显色，在紫外光下有吸收的原理来测定重金属的含量。多用于铅、汞的测定。（3）高效液相色谱法（4）极谱法（5）免疫学方法（6）激光诱导击穿光谱法第二节中药中农药残留测定技术一.前处理技术中药材的提取与净化：目的是将中药材中残留的微量农药残留物提取出来，又不能引入新的溶剂污染。实际上是分离与净化技术的综合应用。1.超临界流体萃取技术（SFE）超临界流体，是指温度和压力处于临界温度和临界压力之上的流体。常用的萃取剂是二氧化碳，适宜非极性和极性较小的物质的提取。若要提取极性大的成分，可以加入适宜的夹带剂（如甲醇、乙醇和水等）。2.固相萃取（SPE）和固相微萃取技术（SPME）固相萃取：是利用固体吸附剂将液体样品中的目标