生物必修一--实验：检测生物组织中的糖类-脂肪和蛋白质

☆思考讨论你能举例说出哪些植物器官的细胞中富含糖类,脂质和蛋白质吗?植物叶肉细胞.果实细胞和种子细胞中通常含有较多的糖类、脂质和蛋白质禾谷类果实、种子：甘蔗的茎、甜菜的根：花生、芝麻种子：大豆种子：蔗糖(二糖)淀粉(多糖)脂质蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质第二章组成细胞的分子应用某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。实验原理还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖）+斐林试剂→砖红色沉淀Cu2O脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色苏丹IV→红色蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物实质：在碱性条件下，蛋白质与Cu2+反应生成紫色或紫红色络合物。基本步骤选材→样液制备→加入试剂→颜色反应→观察→结果→结论选材的原则实验现象明显（富含检测之物，避免干扰）；便于处理，易获得；经济节约；1、选材：含糖较高、颜色为白色或近于白色的植物组织，苹果、梨最好。2、制样：苹果切块→研磨→过滤→滤液4、检测：3、试剂：甲液：0.1g/mLNaOH乙液：0.05g/mLCuSO4组织样液（2ml）→斐林试剂（1ml）→振荡混匀→50℃~65℃水浴加热2min；→观察试管中溶液颜色的变化注意事项1.斐林试剂不稳定，需混匀后使用！2.本实验对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要接触烧杯底部；3.另外，试管口不要朝向实验者，以免沸腾的溶液冲出试管，造成烫伤。还原糖的检测结果检测方法方法一：用苏丹染液检测组织样液方法二：制作子叶临时切片，显微观察子叶细胞的着色情况。特别提醒：实验用的花生种子需提前浸泡3-4h,浸泡时间太短，不易切片;浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形。取材：花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片制片①取最理想的薄片②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min）③去浮色（如何去浮色）④制成临时装片1-2滴体积分数为50%的酒精溶液观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察结果及结论：圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。脂肪的检测结果1、选材：2、制样：4、检测：3、试剂：浸泡1-2天的黄豆种子（或用豆浆）或用鸡蛋蛋白黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液A液：0.1g/mLNaOHB液：0.01g/mLCuSO4组织样液（2ml）→双缩脲试剂A（1ml）→双缩脲试剂B（4滴）→观察溶液颜色的变化以造成碱性环境思考：为什么要先加入A液再入B液？注意事项：1、如果用鸡蛋清，应加以稀释，若稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗干净。2、鉴定之前,可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比,这样可以增强说服力。作对照蛋白质的检测结果还原糖蛋白质淀粉脂肪来自那种生物材料A+++-----梨B--++++++黄豆C++++++--马铃薯D--++++++花生成分待侧样品实验记录1、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能过量？过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。2、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。深化比较斐林试剂与双缩脲试剂不同点斐林试剂双缩脲试剂成分甲液乙液A液B液鉴定物质使用方法反应条件反应现象0.1g/mlNaOH蛋白质等量混合，现配现用先加A液1ml,创造碱性环境，再加B液4滴50-65°C水浴加热不加热处理砖红色沉淀紫色反应0.05g/mlCuSO40.1g/mlNaOH0.01g/mlCuSO4还原性糖