2.2.2-(公开课学案修改)动物细胞融合与单克隆抗体

1、高二级生物科选修3专题2课题动物细胞融合和单克隆抗体主备人黎金兰审核人梁碧秋使用时间2011年4月15日第八周星期五【学习目标】1、理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。2、列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。3、理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。【温故知新】1、抗原：能够引起机体产生__________________的物质；抗体：能够与抗原发生特异性结合的__________________。能产生抗体的细胞是__________________。2、体液免疫过程直接刺激抗原与抗体结合，抗原失去活性，最终被吞噬细胞清除。【学习过程】一、动物细胞融合1、概念：动物细胞融合也称_______________，就是指_______________动物细胞结合形成____________的过程。2、动物细胞融合过程：复习植物体细胞杂交过程，自学书P52，完成下表。比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合融合原理细胞膜的流动性融合前处理用_____________、__________去除细胞壁后诱导原生质体融合用____________使细胞分散后诱导细胞融合诱导融合的方。

2、法离心、电刺激、振动、PEG等除应用植物体细胞杂交手段外，还有_______________杂种植株（或杂交细胞）特点杂种植株含有两种生物的遗传物质杂交细胞具有_______________________________________________意义和用途克服远源杂交不亲和的障碍，获得杂种植株突破_____________________，使__________成为可能。获得杂交细胞，用于____________【例1】只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）A．PEGB．灭活的病毒C．电刺激D．离心【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点？（）A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息B.能无限增殖C.可形成新个体D.培养过程会贴壁抗体B细胞（）吞噬细胞抗原（）记忆B细胞【例3】动物细胞融合的目的中最重要的是（）A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞三、单克隆抗体[思考]①传统的抗体生产方法及缺陷是什么？②B淋巴细胞、肿瘤细胞各有什么特点？1、原理：一种B淋巴细胞只分泌一种__________，B淋巴细胞在体外_________繁殖，而肿瘤细胞具有_。

3、________增殖的特点，将单个B淋巴细胞与______________融合，可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传特性，既能_________增殖，又能产生____________，即单克隆抗体。2、单克隆抗体：________________________________。3、单克隆抗体的制备过程（1）过程：B淋巴细胞+骨髓瘤细胞→_________细胞、__________细胞、_________细胞、_________细胞、_________细胞→_____________________→杂交瘤细胞→克隆化培养和专一抗体检测→_____________________________→单克隆抗体（2）杂交瘤细胞的特点：既能在体外大量___________，又能产生____________抗体。（3）单克隆抗体的优点：_____________、___________，并能大量制备。4、在生产上的应用：（1）作为诊断试剂，准确识别各种___________物质并特异性结合。（2）用于治疗疾病和运载药物，制成“_______________”。【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细。

4、胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的（）A.B淋巴细胞B．T淋巴细胞C．骨髓瘤细胞D．杂交瘤细胞【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体【达标练习】1、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④2、动物细胞融合和植物原生质融合决定于（）A.细胞膜的流动性B．细胞膜的选择透过性C.细胞质的流动性D．细胞质酶的活性3、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、。

5、增殖的细胞是（）①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．①②③④B．①③⑤C．②④D．①③4、单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是()A．能使杂交细胞大量增殖B．产生特异性更强的个体C．使细胞融合容易进行D．使产生的抗体纯度更高5、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（）A．可以制成诊断盒．用于疾病的诊断B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C．可以利用基因工程技术生产D．可以在生物体内生产，不能体外生产6、单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是（）A．骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B．脾细胞之间形成的融合细胞C．骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D．脾细胞7、“生物导弹”是指（）A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单抗上连接抗癌药物8、关于杂交瘤细胞的不正确叙述（）A.含有。

6、双亲细胞的遗传物质B.含有两个染色体组C.能产生特定抗体D.体外培养可大量增殖9、（双选）运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是()A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔10、（双选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是（）A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C．体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，也能无限增殖D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显11、（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是（）A.效应B细胞B．T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D．杂交瘤细胞12、（多选）基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞融合，用灭活的仙台病毒处理后，可能获得下列哪些基因型的细胞（）A．AAaaB．AaBbC．AabbD．BBbb13、下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的细胞，从小鼠体内提取分。

7、离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。（2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是，其特点是_________________________________________。(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。15、下列是制备分泌抗原X抗体的过程，根据图解回答问题：（1）单克隆抗体是指。（2）制备单克隆抗体的步骤：①将__________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。②将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞在_________________的诱导下融合。③将诱导。

8、后产生的多种细胞，放在_______培养基的多孔培养板上培养，筛选。④这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞_____________的能力，又具有___________________的本领。⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。⑥将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。（3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是。（4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的_______细胞制备的，其化学本质是___________，应用于人体，会作为产生，解决这个问题的方法是_____________________________。15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？。原因是______________________________________________。（2）图中②为过程，常用作为诱导剂。该细胞继承了，因此不仅能分泌__________。

9、___，还有本领。（3）该方案的目的是______________。选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）细胞融合聚乙二醇（PEG）灭活的病毒（3）3选择杂交瘤细胞既能在体外无限增殖又能产生特异性抗体（4）特异性强、灵敏度高14、（1）化学性质单一，特异性强的抗体（2）①抗原②聚乙二醇或灭活的病毒③选择性④产生专一抗体、无限增殖（3）大量生产选①，小规模生产选②（4）效应B蛋白质异物免疫反应采用人的效应B细胞制备15、（1）不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞（2）细胞融合灭活病毒（或PEG）双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）细胞融合聚乙二醇（PEG）灭活的病毒（3）3选择杂交瘤细胞既能在体外无限增殖又能产生特异性抗体（4）特异性强、灵敏度高14、（1）化学性质单一，特异性强的抗体（2）①抗原②聚乙二醇或灭活的病毒③选择性④产生专一抗体、无限增殖（3）大量生产选①，小规模生产选②（4）效应B蛋白质异物免疫反应采用人的效应B细胞制备15、（1）不能没有将抗原注入小鼠体内，无。

10、法获得产生单一抗体的B淋巴细胞（2）细胞融合灭活病毒（或PEG）双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）细胞融合聚乙二醇（PEG）灭活的病毒（3）3选择杂交瘤细胞既能在体外无限增殖又能产生特异性抗体（4）特异性强、灵敏度高14、（1）化学性质单一，特异性强的抗体（2）①抗原②聚乙二醇或灭活的病毒③选择性④产生专一抗体、无限增殖（3）大量生产选①，小规模生产选②（4）效应B蛋白质异物免疫反应采用人的效应B细胞制备15、（1）不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞（2）细胞融合灭活病毒（或PEG）双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）细胞融合聚乙二醇（PEG）灭活的病毒（3）3选择杂交瘤细胞既能在体外无限增殖又能产生特异性抗体（4）特异性强、灵敏度高14、（1）化学性质单一，特异性强的抗体（2）①抗原②聚乙二醇或灭活的病毒③选择性④产生专一抗体、无限增殖（3）大量生产选①，小规模生产选②（4）效应B蛋白质异物免疫反。