第6中药药理中药毒理学

第六章中药毒理学§1概述中药毒理学（ToxicologyofTCM）：是研究中药对生物体有害效应、机制、安全性评价与危险度评定的科学中药“毒”含义：（1）“毒”就是药凡治病之药皆为毒药，如《周礼·天官家宰》“医师掌医之政令，聚毒药以供医事”（2）“毒”指中药的偏性张介宾在《类经·疾病类·五脏病气法时》中说：药以治病，以毒为能。所谓毒者，因气味之偏也，盖气味之偏，药饵之属也，所以祛人之邪气（3）“毒”是指中药的毒副作用有毒中药药性强烈，安全剂量小，用之不当，即对人体产生危害现代认识：中药毒性是指中药对机体所产生的不良反应－－毒性反应、副作用、过敏反应、后遗效应、特异质反应和依赖性等（1）毒性反应是指剂量过大或用药时间过长所引起的机体形态结构、生理机能、生化代谢的病理变化－－急性毒性、慢性毒性和特殊毒性★急性毒性是指有毒中药短时间内进入机体，很快出现中毒症状甚至死亡如半夏：服少量即出现口舌麻木，多则灼痛肿胀、不能发音★慢性毒性是指长期服用或多次重复使用有毒中药所出现的不良反应如雷公藤：长时间服用，可损害肝、肾及生殖功能病理睾丸病理肾脏正常睾丸正常肾脏★特殊毒性－－致畸、致癌、致突变√甘遂、芜花、莪术萜类、天花粉蛋白、乌头碱等有致畸作用√芫花、狼毒、巴豆、甘遂、千金子、β-细辛醚、黄樟醚、马兜铃酸、斑蝥素等过量长期应用，可增加致癌率√雷公藤、石菖蒲、洋金花、马兜铃酸等有致突变的作用（2）副作用是指在治疗剂量下所出现的与治疗目的无关的作用√麻黄：治疗哮喘时患者会出现失眠（3）过敏反应又叫变态反应是指机体受到中药或中药成分的抗原或半抗原刺激后，体内产生了抗体，当该药再次进入机体时，发生抗原抗体结合反应，造成损伤√当归、丹参、穿心莲等引起荨麻疹√牡蛎、瓦楞子等可引起过敏性腹泻√丹参注射液引起过敏性休克（4）后遗效应（或称后作用）是指停药后血药浓度已降至最低有效浓度以下时残存的药物效应洋金花等可致次日口干、视物模糊（5）特异质反应是指少数人应用某些中药后，所产生作用性质与常人不同的损害性反应蚕豆引起溶血性黄疸，因红细胞膜内缺乏葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（6）依赖性是指反复或长期应用某些中药，患者产生心理或生理依赖，一旦停药，就出现戒断症状牛黄解毒片、应用风油精等出现精神依赖罂粟壳、麻黄等出现生理依赖（1）致死剂量或浓度：是指在急性毒性试验中外源化学物引起受试实验动物死亡的剂量或浓度表示方法：★绝对致死量或浓度：LD100或LC100★半数致死剂量或浓度：LD50或LC50★最小致死剂量或浓度：MLD，LD01或MLC，LC01★最大耐受剂量或浓度：MTD，LD0或MTC，LC0药物毒性的常用指标（2）阈剂量：指化学物质引起受试对象中的少数个体出现某种最轻微的异常改变所需要的最低剂量★急性阈剂量：Limac★慢性阈剂量：Limch（3）最大无作用剂量（ED0）：指化学物质在一定时间内，按一定方式与机体接触，用现代的检测方法和最灵敏的观察指标不能发现任何损害作用的最高剂量－－又称未观察到损害作用的剂量(NOAEL)－－动物实验获得的NOAEL是制定人群安全限值的重要依据（4）毒作用带（toxiceffectzone）：阈剂量作用下限与致死毒作用上限之间的距离－－是综合评价外源性化学物质毒性和毒作用特点的重要参数之一★急性毒作用带（Zac）：LD50／Limac,比值越大越安全★慢性毒作用带（Zch）：Limac／Limch，比值越大危险性越大（5）治疗指数(TI)：是新药研发的重要参考指标TI=LD50/ED50，比值越大越安全§２中药毒理学基本特点1.生物碱类★含乌头碱的中药有川乌、草乌、附子、天雄等乌头碱内服0.2mg即可中毒，2～5mg即可致死原因：√使中枢神经与周围神经先兴奋后抑制√直接作用于心脏，导致心律失常、室颤★含雷公藤碱的中药有雷公藤、昆明山海棠等√视丘、中脑、延脑、脊髓的病理改变√肝脏、肾脏、心脏可发生出血与坏死★洋金花所含莨菪碱、东莨菪碱阻断M受体，有抑制或麻痹迷走神经等副交感神经作用一、毒性成分复杂2.苷类----强心苷、皂苷、氰苷和黄酮苷等★洋地黄、万年青、八角枫、蟾酥、夹竹桃等含强心苷，较大剂量或长时间应用可致心脏中毒传导阻滞、心动过缓、异位节律、心室纤颤★杏仁、桃仁等含氰苷，在体内被酶水解产生氰氢酸，能迅速与细胞线粒体膜上氧化型细胞色素酶的三价铁结合，阻止细胞的氧化反应表现：组织缺氧，如头昏、头痛、呼吸困难，严重者可因窒息及呼吸衰竭而死亡★商陆、黄药子等所含皂苷－－肠胃刺激症状，产生腹痛、腹泻★芫花、广豆根等所含黄酮苷－－刺激胃肠道和导致肝脏损害3.毒蛋白类毒蛋白主要存在于植物的种子中，对胃肠粘膜有强烈的刺激和腐蚀作用，能引起广泛性内脏出血★巴豆、苍耳子、蓖麻子均含有毒蛋白，中毒反应为剧烈吐泻、呕血、血尿、甚至惊厥、死亡4.含萜及内酯类局部刺激，内服可引起肝损害、抑制★艾叶油、苦艾素，皮肤刺激，内服可刺激胃肠道及肝损害★马桑内酯可兴奋大脑及延脑5.重金属：砷、汞、铅★砒石成分为三氧化二砷，雄黄含硫化砷急性中毒者有口腔、胃肠道黏膜水肿、出血、坏死、血压降低、肝脏萎缩、中枢神经损害以及心肾的严重损害★水银、轻粉、朱砂等含汞类中药，具刺激和腐蚀作用，并能抑制多种酶的活性二、毒性表现多样1.心血管系统心悸、胸闷、发绀、心动过速、心动过缓、心律失常、传导阻滞、血压升高或下降、循环衰竭死亡等★含强心苷的药物如万年青、夹竹桃、蟾酥抑制Na+,K+-ATP酶的活性，使心肌细胞大量失钾，提高心肌的兴奋性和自律性2.呼吸系统胸闷、咳嗽咯血、呼吸困难、哮喘、急性肺水肿、呼吸肌麻痹或呼吸衰竭，甚至窒息死亡等★天花粉、瓜蒂、藜芦、乌头、半夏，双黄连针剂等：上呼吸道急性炎症3.神经系统昏迷、知觉麻痹、四肢麻木、肌肉麻痹、四肢无力、共济失调、牙关紧闭、抽搐、惊厥、记忆障碍、瞳孔缩小或散大、阵发性痉挛、强直性痉挛、脑水肿，甚至死亡等★附子、洋金花、火麻仁、骨碎补、樟脑：精神异常4.消化系统恶心、呕吐、食欲不振、口腔粘膜水肿，糜烂或出血、食管烧灼疼痛、腹胀、腹痛、腹泻、二便出血、便秘、消化道出血、黄疸、肝肿大、肝功能损害，中毒性肝炎、肝细胞坏死，甚至死亡等★黄芩、芒硝：胃部不适★鸦胆子、苦参、生大黄：呕吐★独活（花椒毒素）、青黛（靛玉红）：肝脏损害正常病理5.泌尿系统洋金花、大戟、甘遂、斑蝥、雷公藤、甘草等：★腰痛、浮肿、尿频、尿急、尿痛、尿少、尿闭、尿毒症、急性肾功能衰竭，甚至死亡。6.造血系统洋金花、芫花、斑蝥等：★白细胞减少、粒细胞缺乏、溶血性贫血、再生障碍性贫血、紫癜、变性血红蛋白症，甚至死亡等7.生殖系统天花粉蛋白注射液、月见草油胶囊、刺五加注射液、复方青黛片、速效伤风胶囊、红花油等★闭经、月经不调、性功能障碍、早产、流产三、毒性可以控制1.选用正品药材四川、陕西、湖北、重庆、云南五个产地附子的毒性：★云南附子的毒性是川产附子毒性的18倍2.依法炮制★生附子、盐附子的酯性生物碱、乌头碱含量较高，毒性大★白附片、黑顺片等炮制品种，毒性明显减轻3.对证用药★附子功效：回阳救逆、补火助阳、散寒除湿止痛★合理的病证模型：肾阳虚证、虚寒证动物模型4.合理配伍附子配甘草、附子配干姜、附子配人参：－－能减少酯性生物碱，降低毒性，增加疗效5.掌握煎服方法生附子、白附片、黑顺片不同煎煮时间的毒性－－与酯性生物碱和总碱的含量成正相关§3中药毒理学研究方法1.急性毒性实验1次或24h内多次给予动物受试药物后，短期（最长到14天）内观察受试药物所产生的毒性反应及动物死亡状况目的：√初步估计毒性大小√提供可能的毒性靶器官及可能死亡原因的信息√提示在后续试验中需要重点观察的指标信息√为长期毒性试验剂量设计提供重要的参考依据√为临床用药的安全及监测提供依据√减少试验中的风险方法：LD50法、最大耐受量法和最大给药量一、毒理学实验2.长期毒性实验长期、反复给予受试药，长期观察实验动物所表现的毒性特征。目的：(1)预测受试物可能引起的临床不良反应(2)推测受试物重复给药的临床毒性靶器官或靶组织，为临床安全用药的剂量设置提供参考依据(3)预测临床实验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围(4)提示临床实验中需重点监测的生理生化指标常用动物：大鼠、犬、家兔和豚鼠，特别需要也可用猴组别：至少应设3个剂量组和溶媒或赋形剂对照组必要时还需设立空白对照组和/或阳性对照组给药途径：一般要求与临床拟用途径一致剂量设计：高剂量：使动物出现明显毒性或严重的毒性反应或个别动物出现死亡中剂量：使动物出现轻微的或中等程度的毒性反应且其剂量在高、低剂量之间并与二者成倍数关系低剂量：应高于药效学试验的最佳有效剂量且动物不出现毒性反应的原则实验期限：临床疗程试验给药期限啮齿类动物非啮齿类动物能支持临床研究阶段单次给药2周2周I期、II期、III期≤2周1个月1个月I期、II期、III期＞2周*1个月1个月I期≤1个月1个月1个月II期3个月3个月III期≤3个月3个月3个月II期6个月6个月III期≤6个月6个月6个月II期6个月9个月III期＞6个月6个月9个月II期6个月9个月III期观察指标：①一般状况观察动物外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便、摄食量、体重、给药局部反应。对非啮齿类动物还应进行体温、眼科检查、尿液检查、心电图检查等②检测指标连续给药时间≤3个月，每组大鼠20只，雌雄各半：a.实验结束后各组剖杀1/2大鼠，雌雄各半b.停药2-4周后，另1/2大鼠做恢复期检查连续给药时间6个月，每组大鼠40只，雌雄各半：a.实验中期，各组剖杀1/4大鼠，雌雄各半b.实验结束后各组剖杀2/4大鼠，雌雄各半c.停药2-4周后，余1/4大鼠做恢复期检查（1）血液学指标：凝血酶原时间、红细胞及血小板计数、白细胞计数及分类、网织红细胞计数、血红蛋白等（2）血液生化指标：ALT、AST、AKP、TBIL、CHOL、TP、ALB、Urea、Cr、UA、BUN、Glu、G、A/G、电解质等（3）系统尸解及病理组织学检查A.肉眼观察各主要脏器色泽、质地、肿块及空腹脏器粘膜情况等B.脏器称重和脏器系数心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、肾上腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫等称重并计算其脏器系数C.病理组织学检查心、肝、脾、肺、肾、胃、十二指肠、回肠、结肠、胰腺、甲状腺、肾上腺、胸腺、脑、脊髓、视神经、脑垂体、淋巴结、膀胱、前列腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、胸骨及骨髓等进行病理组织学检查3.局部毒性实验内容：刺激性实验、皮肤过敏性实验、溶血性实验、过敏性实验、光敏性实验等★刺激性实验是考察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜及眼等部位接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出、变性、坏死或结膜充血、水肿及分泌物增多等局部反应有血管刺激性、肌肉刺激性、皮肤刺激性、眼刺激性、肠粘膜刺激性和子宫粘膜刺激性等实验★皮肤过敏性实验是观察外用中药较长时间接触皮肤后，对机体是否产生如红斑、丘疹、瘙痒等过敏性反应的试验方法★皮肤光敏性实验主要用于预测皮肤外用中药对人类的光敏性危险发生率，分为皮肤光敏实验和光毒性实验2种★溶血性实验是指观察受试物是否引起溶血和红细胞凝集的反应，体外溶血性实验是评价中药有无溶血作用的常用方法，但体外实验结果易致假阳性，故实验结果仅供参考4.一般药理实验√是指除受试物主要药效学以外广泛的药理作用研究√是在一次性给予动物试验药物后观察其对动物中枢神经、心血管、呼吸等系统的影响研究目的：√确定可能关系到人的安全性的非期望出现的药物效应√评价受试药的不良反应及病理生理作用√推测药物导致不良反应的作用机制√为临床研究和安全用药提供信息√为长期毒性试验设计和开发新的适应症提供参考5.特殊毒性实验致突变、致畸、致癌实验目的：证实受试药物有无“三致”，为临床该药的受试人群提供参考信息，降低临床风险致突变研究方法：遗传基因突变实验染色体畸变实验DNA损伤实验生殖毒性实验：一般生殖毒性致畸敏感期生殖毒性围产期生殖毒性致癌实验：有效成分、中药新药材、中药材新的药用部位、无法定标准的中药材代用品、含有与已知致癌物有关、代谢产物与已知致癌物质相似