CyTOF2质谱流式细胞仪介绍

从一个“连连看”游戏说起Tips：NBA球星的面貌各不相同，准确分辨他们是制胜的关键！两个参数：肤色、发型四个参数：肤色、发型、脸型、发色Theyarealldifferent!只能识别出五类人：黑，带头箍黑，短发黄，长发白，短发白，长发Diversity！表面：不同的标志蛋白（CD分子）内部：不同的信号分子、效应分子细胞的特征：荧光信号的交叠限制了荧光通道的数量增长CyTOF®2流式细胞仪金属元素作为抗体或染料分子的标签，利用ICP质谱技术作为检测手段，使流式细胞仪的综合性能有了质的飞跃。——流式细胞技术领域的一次革命CyTOF®2流式细胞仪原理产品优势1.上百个独立的检测通道2.全新概念的金属标签3.通道间无干扰，无需补偿计算4.高灵敏度和高稳定性5.多元化的数据分析方法1、上百个独立的检测通道CyTOF2流式细胞仪，可以检测原子量范围在88～210Da，通道数多于100个。标记元素的条件：1、无放射性2、生物样品中含量低2、全新概念的金属标签优点：金属标记物与细胞的非特异结合极弱用来标记的金属元素在细胞中含量极低，背景极低仅镧系金属就可以提供32种标记物3、通道间无干扰，无需补偿计算相邻通道间影响大约0.3%，基本可以忽略不计。CyTOF2质谱流式细胞仪无需各通道单染对照，节约样品；不需要计算补偿；传统荧光流式细胞仪发射光谱重叠严重⤫需要各通道单染对照，样品消耗量大；⤫需要复杂的补偿计算；4、高灵敏度和高稳定性•高灵敏度：检测到500个抗体分子，各通道具有相似的灵敏度•高稳定性：不同时间对同一样品检测结果CV值3%050100150200250PEPE-Cy5APCPE-Cy7AlexaFluor®647PerCP-Cy5.5AlexaFluor®488FITCBDHorizonV450PacificBlue™AlexaFluor®700PerCPAPC-Cy7AmCyanBDHorizonV500BDAPC-H7荧光流式细胞仪通道间灵敏度相差很大CyTOF2流式细胞仪通道间灵敏度相差较小稳定性好，结果具有很好的重复性5、多元化的数据分析方法除了传统的流式分析方法外，用户可以根据各自实验目的的不同灵活的选择不同的数据分析方法。HeatmapSPADEPCASignalingNetworkviSNE产品应用1、对复杂细胞群体进行精细分群以及信号通路研究2、多通道的检测，配合灵活的数据分析，实现对细胞群体的深入分析计算机利用不同算法对流式数据进行降维、归纳细胞按照表型、功能的不同自动聚群、归类观察已知细胞亚群之间的内在联系寻找新的细胞亚群、Marker分析未知的细胞群体CD8+T细胞25个Marker的表达数据的PCA处理结果骨髓13个表面Marker的数据用viSNE进行降维处理，实现自动分群3、揭示细胞群体的多样性组合数：76组合数：155组合数：118组合数：229T细胞功能的多态性研究白血病、淋巴癌等疾病的个体性差异研究4、高通量处理大数量样本混合96个不同的样本组合标记各孔细胞标记感兴趣的蛋白CyTOF®2流式检测根据标记组合追溯每个细胞来源高通量流式检测结合MCB（mass-tagcellularbarcoding）技术，CyTOF®2细胞仪可以一次检测96个不同的样品。这种高通量的数据获取功能为药物筛选提供了便利。MCB的优点•增加样本通量•减少抗体消耗•保证分析均一CyTOF2相关配套试剂MaxPar®金属标签抗体MaxPar®Panel试剂盒MaxPar®金属标记试剂盒金属标签核酸嵌合剂应用范围CyTOF®2血液关键词：白血病、淋巴瘤、造血发生等免疫关键词：淋巴细胞、TB细胞成熟干细胞关键词：自我更新，肿瘤干细胞，IPS药物筛选关键词：高通量、信号通路其他传统流式细胞仪应用的领域