肿瘤标志物检测的影响因素..

肿瘤标志物检测的影响因素郴州市第一人民医院儿童医院检验科李胜涛2015.9.18主要内容一、肿瘤标志物的定义二、理想的肿瘤标志物三、影响血液和体液中肿瘤标志物浓度的因素四、肿瘤标志物检测的影响因素OtherDiseases其它疾病36.6%Cardiopathy心脏病17.74%SeveralTumors多种肿瘤24.9%CerebrovascularDiseases脑血管疾病21.28%恶性肿瘤、脑血管疾病、心脏病=高死亡率！肿瘤早期诊断早期根治的重要性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病，死亡率高，因此人们害怕肿瘤。而防治肿瘤的最好办法是早期诊断、早期治疗。如胃癌早期行根治术，5年生存率达90%，如侵及肌层则下降为50-70%，如侵入浆膜则仅为8-17%。所以人们对肿瘤标志物的检测寄予了极大的希望。那么肿瘤标志物测定能否达到早期诊断的目的？能否对一般人群进行筛查？其临床意义到底有多大？评价有多高？引起了医学界的争议。目前临床应用中常见的问题1.对肿瘤标志物在肿瘤诊断中的作用认识和评价不一致，甚至错误。2.纠正“不用”和“滥用”两个极端。一、肿瘤标志物的定义肿瘤标志物（tumormarker，TM）是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺等。可在肿瘤患者血液或体液中检测到肿瘤标志物。二、理想的肿瘤标志物应具有：⑴灵敏度100%；⑵特异性100%；⑶器官特异性；⑷与肿瘤的大小或分期有关；⑸与预后有关；⑹监测肿瘤的复发。然而目前所应用的肿瘤标志物均未达到上述要求，但如正确合理使用，仍有很大临床价值，关键是要正确评价肿瘤标志物检测的临床意义。三、影响血液和体液中肿瘤标志物浓度的因素1．肿瘤的大小和肿瘤细胞的数目：肿瘤越大细胞越多，肿瘤标志物的浓度越高。2．肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物的速度：肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物的速度越快，血液循环中肿瘤标志物的浓度越高。3．肿瘤组织的血液供应好坏：若血液供应差，血液循环中肿瘤标志物的浓度低。4．肿瘤细胞是否有坏死和坏死的程度：肿瘤细胞坏死后，释放出大量肿瘤标志物，使肿瘤局部和血液中肿瘤标志物的浓度升高。5．肿瘤细胞的分化程度和肿瘤的分期：肿瘤细胞分化程度越差，恶性程度越高，越晚期，产生的肿瘤标志物越多。6．肿瘤细胞是否表达和合成肿瘤标志物：有些肿瘤细胞不表达、不携带肿瘤标志物，则在血液和体液中就检测不到。7．肿瘤标志物在体内的降解和排泄速度：若肝、肾功能差，排泄速度慢，则肿瘤标志物在体内可异常升高。四、肿瘤标志物检测的影响因素㈠分析前1.标本采集对检测结果的影响:⑴前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、导尿和直肠镜检查后，血液PSA和PAP值可升高(宜在此操作过后一周取样）；⑵肝、肾功能异常和胆道排泄不畅、胆汁淤滞等均可造成如CEA、ALP、GGT等浓度增高。⑶某些药物会影响肿瘤标志物的浓度，如抗雄激素治疗前列腺癌时可抑制PSA产生，导致PSA假阴性结果。⑷唾液和汗液污染标本可使鳞状上皮细胞癌相关抗原（SCC）、CA19-9浓度升高，CEA也会轻度升高。2.标本保存对检测结果的影响:⑴血液标本采集后应及时离心，若从采血到血清分离的间隔时间﹥60min，NSE浓度会从血小板中释放而增高；保存於4℃冰箱中，24小时内测定；如在2～3个月内测定，则应-20℃保存，避免反复冻融。⑵酶类和激素类肿瘤标志物不稳定，易降解，应及时测定或低温保存。⑶由于红细胞和血小板中也存在神经元特异性烯醇化酶（NSE），因此，样本溶血可使血液中NSE浓度增高（RBC中有大量的NSE，1%的溶血可使血清NSE升高5ug/L)。黄疸血样本，会引起PSA的检测值升高。㈡分析中1.测定方法和试剂对检测结果的影响：从方法学来看，肿瘤标志物测定方法很多，有放射免疫测定法，酶联免疫测定法，化学发光免疫测定法等，每种测定方法有自己的精密度和重复性，但手工操作的方法重复性较差，误差比较大，操作时要特别认真；用自动化仪器进行测定，重复性好，误差小。有研究报道，使用12种不同的CEA试剂盒检测某一混合血清中CEA的浓度，结果其差异超过100%。导致分析间误差的主要原因是没有测定的标准化，包括缺乏统一的抗原、抗原成分、校正品和参考方法等。因此，在工作中要尽量使用同一种方法，同一种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定。2.交叉污染对检测结果的影响：当测定非常高浓度标本时，交叉污染成为一个导致假阳性的潜在问题。所以应不时地复查有无标本被交叉污染。3.嗜异性抗体对检测结果的影响：大多数肿瘤标志物的测定中常使用一对鼠单克隆抗体来与肿瘤抗原反应，如果病人血清中存在嗜异性抗体（特别是人抗鼠抗体），它可能在两种鼠单克隆抗体间起“桥梁”作用，导致在无抗原的情况下，出现肿瘤标志物浓度增高的假象。㈢分析后：1．参考值范围：不同标本如血液、尿液、胸、腹水等，必须有不同的参考值。不同地区、不同人群、不同方法、不同试剂和设备应建立自己的参考值范围。05101520253035治疗0123456月2．病人基础测定值的变化，对于结果的分析极有价值。故应监测病人治疗前、治疗中和治疗后各个阶段肿瘤标志物含量的变化，最好画一张肿瘤标志物含量的变化的曲线图，以便综合分析。3．一般病人的结果在排除检测方法引起的误差后，上升或下降25％都有临床价值。对于测定结果特别异常的标本必须复查，以防测定误差。4．由于肿瘤标志物测定其临床意义的特殊性，必须加强与临床的交流和沟通当改变肿瘤标志物检测方法和试剂时，必须通知临床，否则会影响结果的判断。5．必须知道肿瘤标志物的半寿期（手术后降到一半所需的时间），这有助解释某些肿瘤标志物，如AFP和hCG的浓度变化，对于临床疗效判断有重要意义。主要肿瘤标志物经手术后半寿期肿瘤标志物半寿期参考范围CEA3～4天＜10ng/mLCA19-98.5天37UmlAFP4～5天10.9ng/mLPSA2.3～3.2天4ng/mLHCG12～20小时2.9mIU/mLCA15-38～15天28U/mlCA1254.8天35U/mlSCC20分1.5μg/LCYFRA21-14天3.3ng/mL五、肿瘤标志物的联合应用1.有关标志物联合检测--提高特异性2.阳性标志物动态观察--提高准确性肿瘤标志物检测的目的是要达到肿瘤的早期诊断，早期治疗，因此，希望找到特异性强，敏感性高的肿瘤标志物。肿瘤标志物的联合应用有助于提高检测的敏感性。一种肿瘤可分泌多种肿瘤标志物，而不同的肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型可有相同的肿瘤标志物，而且在不同的肿瘤患者体内，肿瘤标志物的质和量变化也较大。因此，单独检测一种肿瘤标志物，可能会因为测定方法的灵敏度不够而出现假阴性，联合检测多种肿瘤标志物有利于提高检出的阳性率。为此，选择一些特异性较高，可以互补的肿瘤标志物联合测定，对提高肿瘤的检出率是有价值的。一个肿瘤细胞经过10次分裂能增殖至103个细胞，达1ug重的微小病灶，再经10次分裂，达106个肿瘤细胞，重约1mg。用生物物理方法，如X线，CT和超声等检查，只有当肿瘤大小至少到1～2cm时才能发现，而此时肿瘤细胞已达10亿（109）甚至更多。用免疫学方法检测时，肿瘤细胞需达到1百万个（106）才可检出，但此时可能已经发生肿瘤转移，而且也不是所有肿瘤在此时都能被检出。常用肿瘤标志物联合检测的临床应用肿瘤首选标志物补充标志物肺癌CEA、NSE、CYFRA21-1TPA、SCC、ACTH、降钙素、TSA肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CEACA549、hCG、降钙素、铁蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA242前列腺癌PSA、f-PSAPAP结肠直肠癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125、CA724CEA、hCG、CA19-9睾丸肿瘤AFP、hCG宫颈癌SCCCA125、CEA、TPA膀胱癌CYFRA21-1TPA、CEA骨髓瘤本-周蛋白、β2-M谢谢