微生物-菌体扫描电镜前处理

扫描电镜1、收集培养好的新鲜菌体，用1×PBS（pH7.0）或0.9%NaCl漂洗样品2-3次，每次15min，5000rpm离心3min,去上清；2、加2.5%的戊二醛溶液1ml,轻摇充分混匀，重悬菌液，4℃固定4h或过夜；3、5000rpm离心3min,去上清，加入500ulPBS漂洗样品三次，每次15min（可用枪轻轻吹打，然后离心再加入新鲜PBS，混匀离心）；4、加1%锇酸500ul或适量,摇动充分混匀，固定1-2h；5、5000rpm离心3min,去上清，加入PBS500ul漂洗样品三次，每次15min；6、用梯度浓度（包括20%，50%，80%，100%五种浓度）的乙醇溶液脱水，每种浓度处理10min，5000rpm离心3min；7、用纯丙酮或100%叔丁醇转换100%乙醇2-3次，即乙醇菌液离心的后，去上清，加200ul纯丙酮4℃放置20-30min,5000rpm离心3min，再加入新鲜纯丙酮。8、自然风干，密封4℃保存，等待上样。