呕吐毒素毒性以及检测

呕吐毒素毒性以及检测呕吐毒素(vomitoxin)，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，化学名为3?,7?,15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，属单端孢霉烯族化合物。由于它可以引起猪的呕吐而得名，对人体有一定危害作用，欧盟分类标准为三级致癌物。呕吐毒素是什么？呕吐毒素主体成分为DON（deoxynivalenol,脱氧雪腐镰刀菌烯醇），属于单端孢霉烯族化合物，主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。另外，头孢菌属、漆班菌属、木霉属等的菌株都可产生该毒素。单端孢霉烯族毒素共有150多种，是一类强有力免疫抑制剂，所引起典型症状是采食量降低，所以这类毒素又叫饲料拒食毒素。呕吐毒素（DON）是其中最重要一种毒素，主要来自镰刀菌属（Fusarium），尤其是禾谷镰刀菌（Fusariumgraminearum）和黄色镰刀菌（Fusariumculmorum）。由于它可以引起猪的呕吐，故又名呕吐毒素（vomitoxin，VT）。呕吐毒素的污染分布有调查显示，中国饲料和原料霉菌毒素污染超标的比例为60%~70%，其中呕吐毒素的超标比例接近70%，在被检的玉米、麸皮和DDGS样品中呕吐毒素的检出率均高达90%以上，分别为92.9%、92.3%和100%。豆粕的检出率较低为54.5%。麸皮和豆粕中呕吐毒素未见超标，其平均含量分别为0.44mg/kg和0.05mg/kg，属于轻度污染。玉米中呕吐毒素的超标率为57.1%，毒素平均含量为1.01mg/kg，其最高含量为2.13mg/kg，属于中度污染。DDGS中呕吐毒素的超标率为88.2%，毒素平均含量为1.36mg/kg，最低含量为0.85mg/kg，最高含量为1.72mg/kg，属于中度污染。玉米和DDGS中呕吐毒素的平均含量极显著高于麸皮和豆粕（P0.01），DDGS中呕吐毒素的平均含量显著高于玉米（P0.05），麸皮中呕吐毒素的平均含量极显著高于豆粕（P0.01）。被检配合饲料中呕吐毒素的检出率为97.4%，仔猪料、中猪料、妊娠母猪料和哺乳母猪料的检出率高达100%。其中，乳猪料呕吐毒素未见超标，其平均含量为0.28mg/kg，显著低于其他种类全价料（P0.05），属于轻度污染。仔猪料、中猪料、大猪料、妊娠母猪料和哺乳母猪料均有不同程度的超标，超标率分别为14.3%、14.3%、22.2%、10.0%和23.1%，其最高含量分别为2.31、1.14、1.44、1.45mg/kg和1.52mg/kg，属于中度污染。呕吐毒素的毒性DON具有很强的细胞毒性，它对于原核细胞、真核细胞、植物细胞、肿瘤细胞等均具有明显的毒性作用。Prelusky等发现，猪喂给呕吐毒素，能提高脑中5-羟色胺（serotonin）和5-羟引哚乙酸（5-Hydroxyindoleaceticacid）的浓度，对脑神经产生麻痹作用。而且，即使是低剂量的DON就能引起猪脑中5-羟引哚乙酸水平的提高。Rizzo等发现不同浓度DON对于大鼠红细胞的溶血作用，其溶血作用有一个阈值，低于此浓度红细胞不会发生溶血反应。DON可能通过3种不同的方式对原核细胞产生毒性作用：（1）通过渗透磷脂双层，作用于亚细胞水平；（2）通过与细胞膜相互作用；（3）通过自由基介导的脂质过氧化作用。DON可能以一种以上的方式同时发挥作用。呕吐毒素的检测方法三方圆呕吐毒素酶联免疫试剂盒：呕吐毒素酶联免疫试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被呕吐毒素抗原，样本中的呕吐毒素和微孔条上预包被的抗原竞争抗呕吐毒素抗体（抗试剂），同时抗呕吐毒素抗体与酶标二抗（酶标物）相结合，经TMB底物显色，样本吸光度值与其所含呕吐毒素量呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中呕吐毒素的含量。