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高考生物试剂的作用及实验方法总结一.化学物质的检测方法①淀粉——碘液(蓝色)②还原性糖——斐林试剂/班氏试剂/本尼迪特试剂(砖红色沉淀)③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)④染色体——龙胆紫溶液,醋酸洋红溶液⑤O2——余烬复然⑥蛋白质——被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫红色)⑦脂肪——苏丹Ⅲ染液(橘黄色)、苏丹Ⅳ染液(红色)二.实验条件的控制方法1、加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物2、减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水4、除去叶中原有淀粉——置于黑暗环境5、除去叶中叶绿素——酒精水浴加热6、除去光合对呼吸干扰——给植株遮光7、如何得到单色光——棱镜色散或透明薄膜滤光8、血液抗疑——加入柠檬酸钠9、线粒体提取——细胞匀浆离心10、灭菌方法——培养基用高压蒸汽灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂冼净,擦干后用75%酒精消毒;实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌;整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。三.实验结果的显示方法①光合速度——O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量◆水生植物可依气泡的产生量或产生速率;◆离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;◆植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。②呼吸速度——O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量③原子或分子转移途径——放射性同位素示踪④细胞液浓度大小——质壁分离⑤植物细胞是否死亡——质壁分离⑥甲状腺激素—动物耗氧量,发育速度等⑦生长激素—生长速度(体重、体长变化)⑧胰岛素作用—动物活动状态四.实验中控制温度的方法1、还原糖——沸水浴加热2、酶促反应——水浴保温3、用酒精溶解叶中的叶绿素——酒精要隔水加热4、细胞和组织培养以及微生物培养——恒温箱培养五、实验中常用器材和药品的使用1、NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH2、Ca(OH)2:鉴定CO23、CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性4、HCl:解离(15%)或改变溶液的pH5、NaHCO3:提供CO2、作为酸碱缓冲剂6、酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3,Na2HPO4/NaH2PO4):用于调节溶液pH7、NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)8、琼脂:激素或其他物质的载体或培养基,用于激素的转移或培养基9、酒精:用于消毒(75%)、提纯DNA(95%)、叶片脱色、配制解离液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)10、蔗糖:配制蔗糖溶液,测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原11、二苯胺:用于DNA的鉴定(沸水浴,蓝色)12、甲基绿:检测DNA,呈绿色13、吡罗红:检测RNA,呈红色14、斐林试剂(甲液0.1g/mLNaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂:鉴定可溶性还原性糖(沸水浴,砖红色沉淀)15、双缩脲试剂:用于蛋白质的鉴定(紫色)16、苏丹Ⅲ染液(橘黄色)和苏丹Ⅳ染液(红色):用于脂肪鉴定17、碘液:用于鉴定淀粉(变蓝色)18、龙胆紫染液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色29、改良苯酚品红染液:检测染色体,红色20、健那绿B:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色21、重铬酸钾溶液:检测酒精,呈灰绿色22、溴麝香酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄23、吲哚酚试剂:用于维生素C的鉴定24、伊红美蓝:鉴定有无大肠杆菌的存在25、亚甲基蓝:用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌氧化使之褪色)26、pH试纸:检验物质的酸碱性,如乳酸27、卡诺氏固定液:用于细胞有丝分裂根尖的固定28、解离液(5%盐酸和95%酒精按1:1的配比):有丝分裂中根尖的分离与固定29、层析液:用于叶绿素的分离,主要类型:①由20份石油醚(在60~90℃下分馏出来的)、2份丙酮和1份苯混合而成;②95%的酒精;③93号汽油;④9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合;⑤汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。30、20%新鲜肝脏研磨液:含有H2O2酶,可促进H2O2分解产生O231、无土营养液:用于植物无土栽培32、柠檬酸钠:血液抗凝剂33、秋水仙素(C22H25O6N):用于单倍体育种,作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成,可导致细胞内染色体数目加倍。是1937年发现的,是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶,有剧毒,使用时应特别注意。34、滤纸:过滤或纸层35、纱布、尼龙布:过滤,遮光36、云母片:阻止生长素传递37、微电流计:测量神经元受刺激时,神经元细胞内或细胞间的兴奋传递情况六、一些常见的实验方法(1)根据颜色来确定某种物质的存在:淀粉+I2(蓝色);还原性糖+斐林试剂(砖红色);脂肪+苏丹Ⅲ(橘黄)或+苏丹Ⅳ(红色);蛋白质+双缩脲试剂(紫色);(2)用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性(3)同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源;光合作用中二氧化碳的去向;噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质;DNA的复制是半保留复制。(4)获得无籽果实的方法:用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄、诱导染色体变异,如无籽西瓜。(5)确定某种激素功能的方法:饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。(6)确定传入、传出神经的功能:刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。(7)植物杂交的方法:雌雄同花:花蕾期去雄+套袋+开花期人工授粉+套袋;雌雄异花:花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋。(8)确定某一显性个体基因型的方法:测交;该显性个体自交。(9)确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法:具有一对相对性状的纯合体的杂交和自交,观察后代是否有性状分离。(10)确定某一个体是否具有抗性基因的方法:确定小麦是否具有抗锈病基因,用锈病菌去侵染,一段时间后,观察有无锈斑出现。(11)育种的方法:杂交育种;人工诱变育种;单倍体育种;基因工程育种;细胞工程育种;多倍体育种等。(12)测定种群密度的方法:样方法;标志重捕法(13)分离微生物的方法:平板划线法;用选择培养基培养(如:圆褐固氮菌的分离,金黄色葡萄球菌的分离,细菌和酵母菌的分离)七、实验研究方法1、显微观察法:如观察植物细胞有丝分裂的实验,观察植物细胞质壁分离和复原的实验。2、观察法:观察微生物的外在性状和表现等,如观察注射了甲状腺激素的小狗的活动状况,观察动物的毛色和植物花色的遗传实验等。3、同位素示踪法:如噬菌体侵染细菌的实验,用18O和14C追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径的实验等。4、加法创意:如用饲喂法研究甲状腺激素的实验、用注射法研究生长激素的实验,用移植法研究性激素的实验等。5、减法创意:如用阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素、生长激素的实验,雌蕊授粉后除去发育着的种子实验等。6、杂交实验法:如孟德尔发现遗传定律的植物杂交、测交的实验,小麦的杂交实验等。7、化学分析法:如番茄和水稻对Ca和Si选择吸收的实验,叶绿体中色素的提取和分离实验等。8、理论分析法:如大小草履虫竞争的实验,植物根向地生长、茎背地生长的实验,植物向光性的实验等。9、模拟实验法:如渗透作用的实验装置,分离定律的模拟实验等。七、实验技术1、光学显微镜的使用适用于观察生物的微观结构,如细胞的结构,包括光镜下可看到的各种细胞器。2、临时装片、切片和涂片的制作技术适用于显微观察,凡需在显微镜下观察的生物材料,必须先制成临时装片、切片或涂片。如“观察植物细胞的质壁分离和复原的实验”中要制作洋葱表皮的临时装片,在生物组织中脂肪的鉴定中要制作花生种子的切片等。3、研磨和过滤技术适用于从生物组织中提取物质,如酶、色素等。研磨时要先将生物材料切碎,然后加入研磨剂〈常用SiO2〉、提取液及其他必要物质,充分研磨后,往往要进行过滤,以除去滤渣,所用过滤器具则根据需要或或根据试题中提供的器材加以选用,如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。4、解离技术用于破坏细胞壁,分散植物细胞,制作临时装片。5、恒温技术适用于有酶参加的生化反应,一般用水浴或恒温箱。根据题目要求选用。6、纸层析技术适用于溶液中物质分离。重要步骤包括制备滤纸条、画滤液细线、层析分离。
本文标题:高考生物试剂的作用及方法总结
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