EV71灭活疫苗的研制与使用

2017年5月1疫苗研制免疫策略控制疾病EV71型灭用活疫苗的研制与使用1.EV71疫苗研制过程的困难与创新2.EV71疫苗上市后再评价工作3.EV71疫苗上市后的质量控制4.EV71疫苗使用过程的事宜4脊灰流感HIV1.疾病预防控制体系2.疫苗研究体系3.疫苗临床研究体系4.监管和审评体系5EV71疫苗研制过程的困难与创新科学、严谨、创新、高效123EV71疫苗研制过程的困难与创新67手足口病(Hand，Foot，andMouthDisease,HFMD)手足口病是肠道病毒引起的常见传染病，多发生于5岁以下的婴幼儿，可引起发热和手足、口腔等部位的丘疱疹、溃疡，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等致命性并发症。8重症病例占1.1%，重症病例中死亡率为3%病程通常1-5天患儿家长难以做到早期识别医院检查确诊时间较长重症抢救花费较高抢救中患儿可能神智清楚，造成心理创伤177466901500000100000050000025000002000000300000020082009201020112012201320142015201611555254889552168737182837716197062778861246817419973712008-2016年手足口病发病人数050040030020010090080070060010002008200920102011201220132014201520161263539055095672525011292012008-2016年手足口病死亡人数国家卫生和计划生育委员会．全国法定传染病疫情［OL］．écileViboudHand,etal.foot,andmouthdiseaseinChina,2008–12:anepidemiologicalstudy[J]LancetInfectDis.(2014)(13)70342-6.肠道病毒71型（HumanEnterovirus71,EV71）是引起手足口病最常见的病毒，可导致80%的重症病例、93%的死亡病例。1112病原及疫苗诱导的机体免疫反应与保护机理的认识；病理、生理、免疫学评价指标的确立；疫苗生物学与免疫特点的深入了解；病原与宿主相互作用机制的系统研究；完善的动物评价模型的构建……13新型手足口病疫苗14阜阳昆明深合肥毒株分离8765432106718FY-23KFY-23K-BFY-23K-CFY-23K-DFY-23K-GFY-23K-H毒株筛选891011121314151617人二倍体细胞适应圳毒株采集15病毒感染婴猴典型的手、足、口疱疹症状非灵长类动物传统研究方式仅可评价有限指标灵长类动物创新性研究方式接近于人类临床指标人体临床观察最终研究评价方式最全面的评价1357911131517192123摄氏度25婴猴体温变化情况16猴体温日记录表41.54140.54039.53938.53854575861在婴猴模型中，对EV71感染，疫苗引起的免疫反应以及保护效果进行全面的观察，表明EV71灭活疫苗确实具有很好的安全性和免疫原性。天数免疫抗体水平观察疫苗免疫组感染对照组疫苗对器官保护效果免疫后血液病毒载量变化情况17EV71病毒感染的基因表达谱分析表明：EV71病毒感染过程所导致的，以部分细胞因子上升为表征的炎性反应属于病毒与免疫系统相互作用的结果。YingZhang,ErxiaYang,JingPuetal.TheGeneExpressionProfileofPeripheralBloodMononuclearCellsfromEV71-InfectedRhesusInfantsandtheSignificanceinViralPathogenesis.[J]PLoSONE(2014)9(1):e83766.18EV71疫苗诱导免疫系统的基因网络变化分析表明：仅以EV71病毒抗原刺激机体免疫系统并不会引起感染过程中所见到的强烈炎性反应，证明疫苗具有良好的安全性。LiuL,ZhangY,WangJ,ZhaoH,JiangL,etal.StudyoftheIntegratedImmuneResponseInducedbyanInactivatedEV71Vaccine.[J]PLoSONE(2013)8(1):e54451.为疫苗进入人体临床试验建立信心19机理探索动物模型毒株筛选•基因表达谱分析•病原宿主相互作用机理研究•奠定新型疫苗保护效果评价基础•感染模型的建立•疫苗保护机制分析•疫苗保护的全面评价•国内流行毒株的分离•人二倍体细胞基质的适应•安全性与免疫原性考察20InstitutionDosageNumberofsitesTargetpopulationSamplesizeRegimenSurveillanceperiodCellTypeVaccineEfficacyA100U/0.5ml7(7inGuangxiProvince)Childrenaged6–71months12,0002dosewith28daysapart2yearHumanDiploidCells97.4(92.9-99.0)B400U/0.5ml3(3inJiangsuProvince)Childrenaged6–35months10,0772dosewith28daysapart1yearVero94.8（87.2-97.9）C320U/0.5ml4(3inJiangsuProvinceand1inBeijing)Childrenaged6–35months10,2452dosewith28daysapart1yearsVero90（67.1-96.9）DetailsonthephaseIIIclinicaltrialforEV71vaccinecandidatesLiR,NEnglJMed.2014;27;370(9):829-37.ZhuF,NEnglJMed.2014;27;370(9):818-28.ZhuFC,Lancet.2013;8;381(9882):2024-32.21RandomizedPlacebo-controlledDouble-blind,Multicentertrial研制单位毒株基因亚型疫苗制备技术细胞基质临床人群（月龄）进度中国医学科学院医学生物学研究所C4全病毒灭活人二倍体细胞（KMB17）6-71上市北京科兴生物制品有限公司C4全病毒灭活非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）6-35上市中国生物技术股份有限公司C4全病毒灭活非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）6-35即将上市基亚生物科技股份有限公司(台湾，MVC)B4全病毒灭活非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）2-72Ⅲ期临床中央卫生研究院(台湾，Adimmune)B4全病毒灭活非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）6-35II期临床新加坡国立大学（Inviragen/Takeda）B3全病毒灭活非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）n/dI期临床赛诺菲巴斯德公司C4VLP构建基因工程酵母菌n/d临床前Jing-XinLiQun-YingMaoZheng-LunLiangDevelopmentofenterovirus71vaccines:fromthelabbenchtoPhaseIIIclinicaltrials.[J]ExpertRev.Vaccines13(5),609–618(2014)中检院等单位认真分析疫苗研发和评价中存在的困难和挑战，深入幵展产品质控研究、比较研究和标准化研究，准确、高效完成临床血清样品和病原学样本的检测；指导研发机构完善关键性指标和风险控制措施在保证安全的前提下科学促进和加快EV71疫苗研发和注册进程。2015-12-3CFDA网站：12月3日在没有国际参照情况下，中检院自主研制了EV71灭活疫苗定量国家标准品，解决了创新疫苗免疫定量标尺的难题。中国医药报：12月3曰2016-3-18昆明24疫苗研发企业ABC疫苗研发进程检测方法流行病学研究毒株选择研制标准品动物模型临床前免疫原性评价临床实验检测方法学研究疫苗免疫机制研究疫苗适用性研究比对方法学差异，规范CPE方法，建立快速方法了解人群病毒抗体本底，为确定目标人群、程序提供依据开展毒株交叉保护研究，确定疫苗株先期研制EV71疫苗标准物质，加速疫苗研发建立动物模型，评价疫苗保护效果比较不同企业疫苗的免疫原性，为审评提供依据建立标准化临床样本检测平台，保证样本检测的准确探讨疫苗固有免疫和获得性免疫机制开展疫苗交叉保护、病原谱和基因变异研究25甲乙丙EV71疫苗标准品建立EV71国家抗原定量标准品标准品定值为1600U/ml建立EV71国家抗体定量标准品质控血清:J1,N3,N12定量血清:N12(1000U/ml)建立我国EV71标准检测毒株:EV71/V03(523-07T)建立EV71疫苗国家效力标准品建立EV71WHO中和抗体定量标准品研制EV71ＷＨO抗原定量标准品Vaccine.2011，29(52):9668-74.LiangZ1,MaoQ,EstablishingChina'snationalstandardsofantigencontentandneutralizingantibodyresponsesforevaluationofenterovirus71(EV71)vaccines.26中国首次主导国际生物制品标准物质的研制。•EV71抗体国际标准品由中检院和NIBSC共同主导研制。•最终经英国、美国、中国等5个国家17个实验室的协作标定，结果证明该候选标准品交叉中和能力良好，稳定性优。•2015年第66届WHO生物制品标准化专家委员会年会通过大会审议：高效价EV71抗体候选标准品被推荐为第一代EV71抗体国际标准品，赋值为1000IU/ampoule，同时，低效价EV71抗体候选标准品被推荐为EV71抗体国际参考品。•这是我国首次主导生物制品国际标准品研制。中国食品药品检定研究院网站27以商业化生产规模的疫苗进行批间一致性临床比较试验。继续开展免疫持久性研究，血清抗体水平与保护效果间的相关性研究。持续监测上市后大规模人群使用的安全性，制定疫苗的风险管理计划。建立临床应用的数据库系统：评价大规模人群的手足口病及重症的保护效果；与其他疫苗联合使用的临床观察。29EV71灭活疫苗（湖北襄阳）自9月12日起开展4万人群的安全性观察和保护效果评估，现场研究工作已基本结束，正在进行相关数据的整理、录入和分析，近期将召开中期总结会议。自2016年9月起开展三批一致性研究，现已完成接种后第56天和180天的采血，部分血清样品送中检院检定。EV71灭活疫苗（内蒙古阿荣旗）EV71灭活疫苗（北京）拟在北京开展2万人的安全性观察名称例数发热8高热2过敏反应2腹泻、厌食2皮疹、瘙痒局部皮肤反应3发热、咽喉疼痛、皮疹1合计18名称例数皮疹1荨麻疹2发热、荨麻疹2手足口病（偶合病例）8合计13被动监测疫苗安全疫苗上市后的IV期临床观察1、湖北省CDC，“EV71疫苗上市后人群保护效果评价及安全性观察研究”。2、北京市朝阳区CDC，“肠道病毒71型（EV71）灭活疫苗上市后安全性研究”。监测周期：20151203-20161202大规模人群使用证实有良好的安全性，未出现新的严重AEFI国家AEFI监测网络报告1周3周5周7周9周11周13周15周17周19周21周23周25周27周29周31周33周35周37周39周41周43周45周47周49周51周53周312001000500例数2016年9月10日，在湖北襄阳开展了EV71灭活疫苗上市后人群保护效果评价及安全性观察研究。目前已完成AEFI安全性观察，正在进行数据统计分析。病例监测工作按计划推进，已收集有效病例登记表和样本1000余份并完成了全部检测。根据中国疾病预防控制信息系统分析，