P53及其最新发现概要

P53及其最新发现黄永业P53的简单介绍（1）•p53基因是一种肿瘤抑制基因，定位于人类17号染色体短臂，编码p53磷蛋白。p53磷蛋白的正常功能是调控细胞增殖。P53的简单介绍（2）•现在已经证明，p53蛋白是人体内最有效的对抗肿瘤的自然防御物。•中国已经批准了用于人类癌症的首个基因治疗。正常细胞中P53的活动•已知的P53与细胞凋亡关系示意图p53和癌症•在p53上的变异可导致将近半数的人类癌症。•大多数的这些突变是错义突变，它可以改变DNA一个位点上的信息，导致细胞产生错误的p53基因，使蛋白质链上某位点被错误的氨基酸所替换。在这些突变中，p53的正常功能被阻遏了从而在受损细胞中蛋白质也不能停止复制。如果这个细胞还有其他导致失控增殖的突变，那么最终将导致肿瘤。P53新发现P53新发现•MDMX的遗传放大导致p53在视网膜母细胞瘤中失活•p53泛素化的新机制被发现•p53蛋白两种作用之间的关系•p53参与肿瘤与基质间的对话•P53细胞凋亡机制重要新发现MDMX的遗传放大导致p53在视网膜母细胞瘤中失活(1)题目：Inactivationofthep53pathwayinretinoblastoma源自：《Nature》2006年11月2日443卷7114期来自：美国研究人员MDMX的遗传放大导致p53在视网膜母细胞瘤中失活(2)•摘要:在多数人类肿瘤中，细胞肿瘤抑制基因Rb和p53是失活的。该规则的一个例外是视网膜母细胞瘤（retinoblastoma），在这种肿瘤中，仅仅视网膜母细胞瘤基因的突变，就足以从不要求p53失活的一种固有的抗死亡细胞类型诱发肿瘤。但这种观点可能是基于一个误解。人类视网膜母细胞瘤表达野生型p53基因，所以过去人们假设p53通道是完好的：在Arf-MDM2/MDMX-p53通道中的其他基因的状态没有被考虑.现在，研究人员在人类视网膜母细胞瘤中识别出了一种遗传放大现象，它能抑制Arf-MDM2/MDMX-p53通道。重要的是，由放大的基因编码的蛋白（MDMX）可能是对付少儿癌症的药物的一个理想的作用目标。MDMX的遗传放大导致p53在视网膜母细胞瘤中失活（3）•原文：•MosthumantumourshavegeneticmutationsintheirRbandp53pathways,butretinoblastomaisthoughttobeanexception.Studiessuggestthatretinoblastomas,whichinitiatewithmutationsinthegeneretinoblastoma1(RB1),bypassthep53pathwaybecausetheyarisefromintrinsicallydeath-resistantcellsduringretinaldevelopment.Incontrasttothisprevailingtheory,hereweshowthatthetumoursurveillancepathwaymediatedbyArf,MDM2,MDMXandp53isactivatedafterlossofRB1duringretinogenesis.RB1-deficientretinoblastsundergop53-mediatedapoptosisandexitthecellcycle.Subsequently,amplificationoftheMDMXgeneandincreasedexpressionofMDMXproteinarestronglyselectedforduringtumourprogressionasamechanismtosuppressthep53responseinRB1-deficientretinalcells.Ourdataprovideevidencethatthep53pathwayisinactivatedinretinoblastomaandthatthiscancerdoesnotoriginatefromintrinsicallydeath-resistantcellsaspreviouslythought.Inaddition,theysupporttheideathatMDMXisaspecificchemotherapeutictargetfortreatingretinoblastoma.p53泛素化的新机制被发现（1）题目：E4F1IsanAtypicalUbiquitinLigasethatModulatesp53EffectorFunctionsIndependentlyofDegradationp775源自：CellNovember17,2006:127(4)来自：法国，德国，西班牙等国家的学者p53泛素化的新机制被发现（2）摘要:p53的功能被多种翻译后修饰机制所调控，包括Hdm2介导的泛素化作用，该作用可使其蛋白酶体降解。目前学者发现，P53相关因子E4F1可以作为一个不典型的E3泛素链接酶，调控p53效应，并且该过程不依赖于P53的降解该研究证实了E4F1是p53的一个重要的翻译后修饰调控因子，并通过对p53功能的调控，影响着细胞的命运：究竟是生长停滞还是凋亡。这一发现对于未来进一步研究p53的功能具有重要意义。p53泛素化的新机制被发现（3）•原文：Figure1.E4F1ExhibitsIntrinsicUbiquitinE3LigaseActivityonp53InVitroandInVivo•(A)AutoubiquitylationactivityofE4F1.Autoradiogramsofinvitroubiquitylationassaysperformedunderstandardconditionsinpresenceofinvitrotranslated(IVT)E4F1labeledby35S-methionine.•(B)RecombinantE4F1stimulatesp53ubiquitylationinvitro.AutoradiogramsofinvitroubiquitylationassaysperformedwithIVT35S-labeledp53andGST-E4F1orGST.•(C)AutoradiogramsofinvitroubiquitylationassaysperformedunderstandardconditionswithIVT35S-labeledp53andcellularE4F1immunoprecipitatedfromE4F1-ormock-transfectedU2OScells.•(D)E4F1stimulatesK48-Ubbranching.AutoradiogramsofinvitroubiquitylationassaysperformedwithIVT35S-labeledp53,baculovirusexpressedE4F1andUb(WT),orUbmutantsbearingmutationsofall(K0)orallbutoneofitslysineresiduesattheindicatedposition.EqualamountsofUbmutantswereusedineachassay(FigureS1F).•(E)Cre-inducedE4F1-GFPexpressioninU2OScellsstablyexpressingtheLSL-E4F1construct.(Upperpanels)WesternblotanalysesofnuclearextractspreparedfromLSL-E4F1cellsattheindicatedtimepointsafterinfectionwithCreretrovirus,probedwithanti-GFP,-E4F1,-p53(DO1),-Cre,and-TBP(loadingcontrol)antibodies(Abs).(Lowerpanels)AnalysisofE4F1-GFPexpressionbyfluorescencemicroscopy3daysafterinfectionwithCre(+)orcontrol(−)retroviruses.Cellsareshownat40×magnification.•(F)E4F1stimulatesubiquitylationofendogenousp53invivo.WesternblotanalysesofUb-conjugatedproteinsinLSL-E4F1cellstransientlytransfectedfor24hrwitha6XHis-Ubexpressionvector4daysafterinfectionbyCre(+)orcontrol(−)retroviruses.OnepercentofcellularextractswereprobedforthepresenceofE4F1-GFPandtotalendogenousp53usinganti-GFPandanti-p53(DO1)Abs(input).Thesecellularextracts,normalizedtocontainequalamountsoftotalp53,wereloadedonnickel(Ni+)-NTAcolumns.Ni+-purified6XHis-Ub-conjugatedproteinswereprobedforthepresenceofUb-p53formsusingananti-p53(DO1)Ab(Ni-purified).Neithercellsnorcellularextractsweretreatedwithproteasomeinhibitors.•(G)DepletionofendogenousE4F1impactsonendogenousp53ubiquitylationinvivo.WesternblotanalysesofUb-conjugatedproteinsinU2OScellstreatedfor72hrwithcontrolscrambleorE4F1SiRNAs.His-Ub-conjugatedformsofendogenousp53presentinthesecellswerepurifiedandanalyzedasdescribedinFigure1F.p53蛋白两种作用之间的关系（1）•题目：Thetwosidesofp53•源自：《Nature》2006年9月14日•来自：美国加州大学旧金山分校的研究人员p53蛋白两种作用之间的关系（2）摘要：p53蛋白是脊椎动物DNA损伤响应和肿瘤抑制的一个重要调控因子。总体上，这两种作用被认为是有因果关系的：p53通过对肿瘤细胞中的DNA损伤或基因组异常做出响应以及触发生长抑制或细胞凋亡来抑制肿瘤。现在，Christophoru等人利用一个能够可逆转换的内生p53小鼠模型，发现病理性的由p53诱导的对辐射的响应，与由p53调控的对由这种辐射所诱导的肿瘤的抑制无关p53蛋白两种作用之间的关系（3）•原文：•Thetwosidesofp53•Theproteinp53isanimportantmediatoroftheDNAdamageresponseandtumoursuppressioninvertebrates.Ingeneral,thesetwoattributesarethoughttobecausallylinked:p53suppressestumoursbyrespondingtoDNAdamageorgenomeabnormalitiesintumourcellsandtriggeringgrow