药物性耳聋基因检测幻灯

1药物性耳聋基因突变检测试剂盒（荧光PCR法）2013年7月关注用药安全预防药物致聋避免无声世界享有健康听力2智海生物工程（北京）有限公司和南京海智生物工程有限公司合作，以经典实时荧光PCR技术为核心技术平台、以国际上正在兴起的个体化医疗为市场导向，根据临床需求将推出一系列用于临床个体化医疗的分子诊断产品，致力于提高我国临床诊疗水平，服务于大众健康。公司简介3药物性耳聋现状及病因4什么是药物性耳聋药物中毒性耳聋（简称药物性耳聋），是指因使用或接触某些耳毒性药物而造成的耳聋。这些药物均对人的第8对神经——听觉神经有毒副作用，它破坏的是感知声音最重要又最脆弱的部位——耳蜗。药物性耳聋一般为双侧、永久性耳聋，多不可逆。5常用耳毒性药物的种类氨基糖甙类抗菌素：链霉素、庆大霉素、卡那霉素、小诺霉素、新霉素、托布霉素、洁霉素等。非氨基糖甙类抗菌素：氯霉素、紫霉素、红霉素、万古霉素、卷曲霉素、春雷霉素、里杜霉素、巴龙霉素、尼泰霉素、多粘菌素B等。水杨酸盐和非甾体类抗炎药：阿司匹林、非那西汀、APC、保泰松等。利尿剂：速尿、利尿酸、汞撒利等。抗肿瘤药物：顺铂、氮芥、博来霉素、氨甲嘌呤等。中药：乌头碱、重金属盐（汞、铅、砷等）。其他：奎宁、氯奎、心得安、肼笨达嗪、胰岛素、碘酒、洗必泰等。6我国残疾人口有8296万，其中听力残疾人群有2780万，占30%，居各类残疾之首，累及2.6亿家庭人口。2006年第二次全国残疾人抽样调查30%1%14%27%6%7%15%听力言语视力肢体智力精神多重7国内耳聋发病现状我国每年有3万新生儿患重度或极重度耳聋，另有相当比例的婴幼儿患迟发性耳聋；每年新发耳聋患儿6-8万名，其中药物中毒所引起的聋哑症占60％以上。我国7岁以下儿童因不合理使用抗生素造成耳聋的数量多达30万，耳毒性药物仍是儿童后天致聋的主因。8药物性耳聋就在你我身边“千手观音”领舞湖北姑娘邰丽华就是一名药物性耳聋受害者。参演的21位演员中竟然有18位也是因药物致聋。2008年北京残奥会圣火采集使者—青岛姑娘姜馨田，1岁的时候因为高烧注射庆大霉素导致耳聋。9药物性耳聋的病因临床上有的患者使用耳毒性药物后没有出现耳聋，而有的患者使用非常小的剂量甚至单次剂量的药物就会导致耳聋。患者遗传体质的不同是导致其对耳毒性药物的敏感性不同的主要原因。多年的科学研究表明，线粒体基因的突变是使个体对耳毒性药物敏感的主要原因。突变基因携带者是氨基糖甙类抗生素等耳毒性药物的敏感个体。10药物性耳聋基因突变热点研究表明，线粒体DNA上的12SrRNA基因的1555AG和1494CT是中国人群药物性耳聋基因突变的主要位点。解放军总医院耳聋分子诊断中心在全国28个省市进行的聋病调查结果：突变位点中国聋人群体检出率1555AG3.8%1494CT0.6%合计4.4%11基因突变导致线粒体结构变化图1.细菌16SrRNA和人类12SrRNA基因结构对比12父亲正常母亲携带突变基因子女将100％携带该突变基因，药物性耳聋基因属于母系遗传药物性耳聋基因的遗传特点13药物性耳聋可控可防药物性耳聋现尚无有效治疗方法，唯一的办法就是预防。通过基因检测，及早发现基因突变的携带者，尽早对其进行干预，可有效预防药物性耳聋发生。14药物性耳聋的预防价值2000多万聋人4.4%1555AG和1494CT阳性100万阳性患者10倍的正常听力母系亲属中国有1000万耳毒性药物敏感个体15一次检测终生受益，一人检测全家受益16药物性耳聋基因突变检测试剂盒简介（荧光PCR法）17药物性耳聋基因突变检测试剂盒简介专门针对药物性耳聋进行快速基因检测的荧光PCR试剂盒。只需要一滴血或一块血片在3～4个小时内即可检测出标本是否携带了药物性耳聋突变基因。18该试剂盒用来定性检测人线粒体基因组中与药物性耳聋相关的1555A＞G和1494C＞T突变，以辅助临床诊断及预防药物性耳聋发生。试剂盒预期用途19试剂盒组份20检测流程核酸提取血液样本PCR扩增结果扩增反应液只有简单的两步操作！21聚合酶链式反应(PCR)1983年，萌发了PCR的想法。1987年，获得PCR技术专利。1993年，获诺贝尔化学奖。Mullis博士22实时荧光PCR工作原理MolecularProbe公司的一个专利，USPatent5,436,1341993年7月12日申请，1995年7月25日授权。荧光染料与DNA双链结合后荧光信号上千倍增强第一个循环第二个循环上游引物下游引物2323试剂盒技术原理GCACGCAC荧光物质结合无峰图出现匹配不匹配序列特异性扩增（SSP）结合实时荧光PCR技术2424竞争方法比较25试剂盒检测适用标本血液非肝素抗凝管静脉采血或指尖采血。血片足跟采血。其他试剂盒提取的核酸所有标本类型均应避免反复冻融。26ABI7000/7300/7500/7900/StepOne(Plus)罗氏系列伯乐系列Enppendorfrealplex国产系列（博日、宏石SLAN）试剂盒检测适用机型×上海科华、达安27试剂盒运输和保存运输短途：泡沫盒加冰袋长途：泡沫盒加干冰保存-20℃保存，避免反复冻融28本产品的技术特点1.灵敏度高：可准确检测低至1ng的模板DNA样品（只需1滴血）；2.特异性好：采用自主创新的检测技术（特异性引物扩增和实时荧光PCR技术），有效避免假阳性和假阴性结果的产生，保证结果的准确可靠；3.准确性高：通过权威医院上千例临床样本盲测验证，其检测结果与基因测序所得结果100%一致；4.防污染体系：全密闭检测，无需开盖，可在一定程度上预防交叉污染的发生；5.操作简单：易学易用，稳定性好，可靠性高。29试剂盒检测适用人群孕期母亲产前检查新生儿筛查学龄前儿童筛查耳聋患者及其家属有耳聋家族史的个体及特殊人群（如肺结核患者用药前筛查）任何年龄阶段的人（关注自身及家人健康希望通过基因检测排除潜在危险的广大群众）30试剂盒检测结果1555AG突变型样品1494CT突变型样品正常样品熔解曲线熔解峰的参考范围：31阳性患者用药提示卡32实际操作相关事项33收费项目34实验室要求实验室分区标本处理区、核酸加样区、PCR扩增区各分区物品不得混用物品应单向流动35仪器设备要求标本处理区漩涡震荡器、离心机、移液器、打孔器、金属恒温器（或其他加热设备，如水浴锅）核酸加样区移液器、离心机PCR扩增区荧光PCR仪器36程序设定95℃,15s95℃,15m54℃,20s72℃,20s循环过程溶解曲线过程荧光收集点可设荧光收集点37℃，5m37样本处理不能使用肝素抗凝血血片使用打孔器打孔取样38起步晚，规模小市场潜力大，增长迅速国内产品单一国外跨国公司占了大部分市场份额体外诊断试剂现状39国家政策对诊断试剂的支持40医学科技发展“十二五”规划重点前移，立足预防，要重点发展疾病的早期发现和早期识别技术，实现疾病的早期干预，大幅度提高疾病的治愈率，降低疾病的社会和经济负担，为预防为主战略的实施提供技术支撑。重点发展新型诊疗技术研究、个体化诊疗技术研究。41医疗器械科技产业“十二五”专项规划2012年1月18日，科技部发布《医疗器械科技产业“十二五”专项规划》，将高通量/微量/快速体外检测、新型诊断试剂列入关键技术发展重点和产品发展重点方向。42“十二五”国家战略性新兴产业发展规划2012年5月30日，国务院常务会议讨论通过《“十二五”国家战略性新兴产业发展规划》。生物产业列入七大战略新兴产业，要面向人民健康、农业发展、资源环境保护等重大需求。体外诊断重大产品开发将是国家重点发展领域。43他们为何一针就聋？科技日报，2009年7月7日关注药物性耳聋刻不容缓THANKS