TSQ8000三重四级杆气质联用仪操作作业指导书

文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程TSQ8000三重四级杆气相色谱质谱联用仪操作规程□非受控：（盖章）□受控：（盖章）受控编号：编制：年月日审核：年月日批准：年月日第1页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程1目的制定TSQ8000三重四级杆气相色谱质谱联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范的使用气质联用仪进行检测工作。2适用范围本操作规程适用于TSQ8000三重四级杆气相色谱质谱联用仪的使用。3操作规程3.1开机3.1.1气体仪器需用到气体：氦气（纯度≥99.999%）、氩气（纯度≥99.999%）。使用时，先打开钢瓶阀门，再顺时针拧动气压表阀门至显示压力氦气为0.4～0.6MPa，氩气气压应为0.4MPa。3.1.2分别打开GC和MS以及自动进样器电源开关，此时仪器自动进入开机自检状态，同时会启动真空泵开始抽真空，等待仪器所有指示灯均变成绿色。3.1.3开启电脑，输入密码“TSQ8000”，双击桌面图标，进入界面后，观察“Forelinepressure”项参数值，其数值在80mTorr左右，则真空度达到测试要求；若未达到则需继续等待直到真空度符合要求（通常仪器开机真空度达到要求需要10-20小时）。3.2调谐3.2.1在TSQ8000EvoDashboard操作界面点击“InstrumentControl”进入界面：输入MStransferInetemp：280℃，Ionsourcetemp：300℃，点击“Send”，等待升温。3.2.2检漏在TSQ8000EvoDashboard操作界面点击“ManualTune”进入手动调谐界面，点击界面中“StartScan”按钮进行检漏，出现图谱后点击“StopScan”停止扫描。第2页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程此处水峰强度不应大于108氮峰和氧峰强度比约为4:1则可能漏气若图中水峰（18.1）强度小于108，且氮氧峰正常则表示不漏气。3.2.3调谐检查在“ManualTune”界面下，将参数Spectra设置为Full，Cal.gaslevel选择EI，点击“StartScan”，等待图谱稳定后点击“StopScan”。第3页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程正常情况下此图谱中应出现69.1、100、131.0、219.0、264.0、414.0、502等7个特征峰，而且69.1峰强度应在107以上，100峰左右无杂峰。此时仪器处于正常状态，可以直接进入测试工作，无需调谐。若峰强度过低，峰形不正常，而且做过更换灯丝、离子源等维护工作，则必须要进行调谐。具体调谐步骤参照工作电脑上《TSQ8000UserGuideCN》或GC-MSTmgCourse视频教程中TSQ8000调谐章节进行操作。3.3方法建立3.3.1查阅标准，了解待测目标化合物名称（中英文名称）、相对分子质量、可能出现的特征离子。3.3.2设置仪器方法a.点击桌面图标，打开TraceFinder软件，进入软件操作界面：仪器状态显示灯菜单栏模块仪器参数显示模块采集数据实时显示模块选中“MethodDevelopment”，点击“InstrumentView”后，点击File下拉菜单下“NewInstrumentMethod”或点击左上角符号，进入新建仪器方法参数设置界面。b.点击TRACE1300SeriesGC图标，进入气相参数设置：Oven柱温箱：第4页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程Maxtemperature：输入色谱柱最高耐受温度（查色谱柱信息）；Pre-runtimeout：液体进样输入30min，顶空进样输入999min；Ramps：根据标准或经验设置相应的升温程序。S/SL（front）前分流不分流进样口S/SLmode：若分流进样，选Split；若不分流进样，选Splitless；Temperature：勾选，输入温度（一般参照标准方法）；Splitflow：勾选，数值：50-60mL/min；Carriermode：选择ConstantFlow（恒流）；Flow：勾选，数值根据标准或资料（一般为1.0~1.5mL/min）；Vacuumcompensation：勾选；Carriergassaver：勾选；Splitratio（分流比）：若选择分流进样，需输入相应数值（如分流比1:50，则输入50）。其他参数均使用默认值。PTV（back）后程序升温进样口和RunTable一般不使用，均为默认即可。c.点击TriPlusRSHAutosampler图标，若为液体进样：点选GCLiquids；顶空进样：点选GCHeadspace，然后点击“CreateNewMethod”按钮进入自动进样器参数设置：一般只需要设置General和Washes两项参数。GeneralSamplervolume（进样体积）：根据需要填写；Plungerstrokes：不少于6次；Airandfillingmode：AutoSampletype：Viscous（粘性）；其他参数均可按默认参数。WashesNumberofsolvents：若单一溶剂清洗选择Single，多溶剂清洗选Multiple。其他参数根据自身实验需要设置。Pre-injection：进样前清洗方式；Rinse：样品润洗；Post-injection：进样后清洗方式。清洗溶剂可根据实验样品的溶剂来选择，如样品溶剂为正己烷，则可用正己烷作为洗第5页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程液。d.点击TSQSeries，进入质谱参数设置Methodtype：选择AcquisitionGeneral模式（普通模式）MStransferlinetemp（传输线）：280℃或参考标准；Ionsourcetemp（离子源）：300℃或参考标准；Ionizationmode（离子源类型）：EIRuncompletion：选择GCruntime。Scans（扫描参数）模块对于标准方法的初次验证，通常先做fullscan（全扫描）以初步定性目标物质，参数设置如下：Time：3~5min（为了避免溶剂对灯丝的影响，等待溶剂已经通过灯丝后才开启灯丝）；SRM,SIM,ScanMasses：全扫时输入需扫描的离子范围（0~1000极限扫描范围），根据标准或自己查阅的资料确定；ProductMass：不填；NeutralLossMass：不填；CollisionEnergy：不填；Tunefilename：双击选择AutoTune_EIGroups模块右键选择EmissionCurrent在出现的表格栏里去掉勾选，EmissionCurrent栏输入25。最后保存并命名方法（如6clben）,至此仪器方法设置完毕。3.3.3SRM方法开发本节内容主要介绍利用AutoSRM功能模块进行SRM模式下子母离子的寻找及CE碰撞能的优化，从而获得SRM检测模式下需要的各类参数。操作如下：a.选择母离子双击桌面图标，选择AutoSRM，进入操作界面：第6页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程此界面需要设置参数有：Mode：PrecursorIonInstrumentMethod：选择需要使用的仪器方法，即新建的仪器方法“6clben”；Massrange（扫描范围）：一般为50-M（目标物质量数）+50或100；Starttime：3~5min；Stoptime：勾选UseGCRunTime；单元格参数，Name：目标化合物名称；RT（保留时间）：任意值；VialPosition：样品瓶号。输入完毕后点击，选择Savestudy设置保存路径及文件名称点击Save，点击菜单栏开始运行，结果如下：勾选3个强度较大的母离子将光标选中在目标峰之上首先在图谱显示模块用鼠标选中目标化合物的色谱峰，在Massbyhighestintensity第7页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程模块中选中3个强度较大的碎片离子作为母离子，点击左上角图标将其推送至右边WorkingList模块，再点击推送至下一级。b.选择子离子在新弹出界面点击，再点击则系统自动根据所需要的数据量来确定所需要采集数据的次数，等待系统采集数据完毕出现如下结果：此时在左侧文件显示模块中依次选中每个数据，则右边模块会显示相应生成的子离子，从子离子列表中选择一个强度较大的作为子离子推送至WorkingList。完成所有子离子的选择后，点击推送至下一级。c.优化碰撞能（CE）在进入此界面后，将SRMenergyranger选择为：Targeted，然后按之前方法保存并运行；第8页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程如同第2步选择子离子方法依次选择最优CE能，推送至WorkingList后点击生成列表。设置保存路径以及文件名称（如6clben_in.csv），如图：d.建立SRM仪器方法再次打开仪器方法“6clben”，在TSQSeries模块中将Methodtype改为Acquisition-Timed其他参数不变。在Scans表格栏上点击“Linktoexternalfile”选择在第3步中保存的“6clben_in.csv”文件，点击“OK”后再次点击“Linktoexternalfile”断开链接。选择另存为，将方法重新命名，如“6clben_SRM”。至此方法开发完成。第9页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程3.4数据采集点击桌面图标，打开TraceFinder分析软件，进入软件操作界面，点击图标：文件名称保存路径样品瓶号进样体积仪器方法根据上图标识依次填入：文件名称、保存路径、进样瓶号、进样体积以及采用的仪器方法（即最后另存的“6clben_SRM”方法）。输入完成后，在导航栏中Acquire点击采集：若要单独采集，则选中需要采集数据的项目栏，点击“Sample”按钮；若要采集全列表，则可直接点击“Sequence”按钮。第10页共24页文件编号版本/修订号A/0发布日期2015-XX-XXTSQ8000三重四级杆气相色谱实施日期2015-XX-XX质谱联用操作规程出现如图确认框，确定三个模块均被勾选，StartDevice为第一个勾选后点击OK，设备开始采集数据。等待数据采集完成后，接下来做数据处理工作。3.5数据处理3.5.1建立数据处理方法（主方法）a.打开仪器方法“6clben_SRM”，在导航栏中TSQSeries下拉菜单中选择“CreateCompoundDatabaseexportfile”，点击“CreateExportFile”设置保存路径及文件名称(6clben_batabase.csv。)b.回到主菜单界面，选择“MethodDevelopment”，点击“CompoundDatabase”，在导航CompoundDatabase下菜单下选择“ImportCompound”找到上一步保