第一章-病理检验技术概述

病理检验技术第一章病理检验技术概述第一节病理检验与病理检验技术•病理学（pathology）其原意“pathos”，是希腊语“痛苦suffering”的意思。•其目的是用自然科学的方法研究疾病的原因（病因学etiology），发病机制（pathogenesis），并着重从形态学上观察和研究疾病发生发展过程中器官、组织、细胞或亚细胞结构的形态学的变化,，并联系各种疾病所引起的功能代谢异常和临床表现，从而揭示疾病的本质。•在医学教育中，病理学是一门重要的基础学科，是基础医学和临床医学之间的桥梁，即以解剖学、组织胚胎学、生理学、生化学、细胞生物学、微生物学、寄生虫学、免疫学为基础，又密切联系以注重功能和代谢改变为研究的病理生理学（pathophysiology），并为后续的内科学、外科学、儿科学、妇科学打下基础，因此在学科上病理学和病理生理学合为一个学科。•普通基础-----------生物等•基础医学正常---组胚等治疗医学医学基础•（临床医学）疾病---病理等•临床医学------内科、外科等•医学•预防医学••特种医学-----法医、航海航天医学••在科学研究中，病理学还可以分为：•人体病理学：以病人或病人体内的物质为对象•实验病理学：以疾病的动物模型或在体外培养的细胞为对象在临床医疗中，人体病理学又分为：•尸体剖验（autopsy）是对不幸去世的病人的诊断和死因做出明确的结论，获得经验和教训。•外科病理学（surgicalpathology）：是当今诊断疾病的最可靠的方法。也称为诊断病理学diagnosticpathology因为病理检查的标本来源不仅仅是外科系统。也称为临床病理学.•细胞学（cytology）：在发现早期肿瘤等方面有重要的作用。•病理诊断工作的特点：险；广；微；重；长；危。一、病理检验的概念和任务概念•临床病理学是应用形态学的观察方法，对临床采用手术或穿刺，搔刮，钳取等手段而获得的病变器官组织或细胞进行检查，做出明确的病理诊断，提供病因学依据及有关预后因素的一门学科。任务•1、确定疾病的诊断：•病理诊断仍然是最正确、最可靠和最后的诊断•如是否有肿瘤，是良性还是恶性，恶性程度和浸润范围，以及有无转移等（临床病理分期）•2、为临床选择治疗方案提供依据：•正确的病理诊断对于临床采取及时、有效、合理的针对性治疗具有十分重要的意义•如颈部淋巴结肿大，活检诊断如果为淋巴结结核，临床采取抗痨治疗•如果病理诊断为恶性淋巴瘤，临床则采取化疗或放疗•如乳腺癌可根据肿瘤组织的雌激素受体和孕激素受体检测决定是否采用内分泌治疗•3、提供有关预后因素的信息•恶性肿瘤的许多病理形态学参数可作为判断预后的指标。•如大肠癌，其组织学类型、浸润程度、有无转移等可为临床判断预后提供参考•4、了解疾病的发展及判断疗效•同一病人通过多次活检的病理检查可了解疾病的动态变化，了解治疗的效果，使病人得到最为合理的治疗•如白血病病人进行骨髓移植，在移植前、移植后的不同时间均需要作骨髓活检，以了解原有的白血病细胞是否被杀死，移植的骨髓细胞是否成活，以及宿主是否存在排斥反应等•5、为科学研究积累资料•如科研中常常使用的细胞系（cellline），大部分是从肿瘤组织中分离培养成功的•许多新的疾病的发现和界定，往往也是从病理组织学开始的•病理诊断积累的资料也为大系列的回顾性研究提供了可能•临床研究的可靠性和准确性，也需要病理诊断作为标准•6、为提高临床诊断水平服务•通过病理检查，可以提高临床诊断水平，总结经验和教训二、病理检验分类1、细胞学诊断•亦称细胞学（cytology）检查•主要是通过人体病变部位脱落、刮取及穿刺抽取的细胞形态和性质的观察，对某些疾病进行诊断。•目前主要应用于肿瘤的诊断，也可用于某些疾病的检查及诊断脱落细胞学的标本来自：•女性生殖道、肺支气管、食道、胃肠道、泌尿道等脱落细胞，通过表面涂片或刮片，•收集自然分泌物（如痰液、尿液）涂片，•采用加压冲洗及各种内窥镜刷涂片、印片等方法收集细胞学标本；•也可通过收集浆膜腔液（胸水、腹水等），脑脊液离心后涂片获得。•妇科细胞学诊断，现采用TBS报告方式，描述报告为主。TBS报告方式鳞状上皮细胞腺上皮细胞正常范围内非典型腺细胞1.不能明确意义良性反应性细胞改变1.炎性（宫颈管）2.倾向原位腺癌2.萎缩性非典型腺细胞1.宫内膜3.放疗2.来源不明4.其他可疑腺癌腺癌1.宫颈管2.宫内膜3.其他非典型鳞状细胞1.不能明确意义2.倾向上皮内高度病变上皮内低度病变（CINⅠ和HPV感染）上皮内高度病变（CINⅡ、CINⅢ和原位癌）鳞状细胞癌宫颈细胞学报告—TBS系统鳞状上皮细胞异常•非典型鳞状上皮细胞(ASC)☆ASC—US（意义未定）☆ASC—H(不除外HSIL)•低度鳞状上皮内病变(LSIL)包括HPV感染、CIN1、非典型增生(轻)•高度鳞状上皮内病变（HSIL)包括CIN2、3，非典(中、重)和原位癌☆怀疑早期浸润•鳞癌(角化型、非角化型)细针吸取（fineneedleaspiration,FNA）技术•应用全身几乎所有部位肿块的穿刺活检，尤其适用于乳腺、甲状腺、涎腺、肺、肝、胰腺、前列腺、淋巴结及全身体表肿瘤的诊断。•通常采用细针（外径0.6～0.9mm）进行细胞吸取，有时是在影像（B超或X线）引导下操作。细胞学检查优点•损伤小，操作简单，经济、快速、安全等•常有较高的阳性率（如宫颈癌、食道癌阳性率高达90%以上，肺癌阳性率约70%～80%）•尤其适用于大规模的社区普查，对人体许多肿瘤（如宫颈癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、肺癌等）都具有初筛的作用。细胞学诊断的局限性•如假阴性及假阳性，而且主要适用于良恶性疾病的初步诊断，进一步做组织学分类有困难，对于细胞学阳性的病人，在治疗之前一定要作组织学活检来证实细胞学诊断，并进行分型。2、组织学诊断•是病理诊断中最重要的部分，对多数病例都是最后的诊断•依赖于对活检组织或手术标本的肉眼及光镜观察，通过对病变组织及细胞形态的分析、识别而对各种疾病进行诊断•大多数病例仅通过HE染色切片检查便可得到确诊，但疑难病病例则要通过免疫组织化学、特殊染色、电镜或分子生物学等技术辅助完成。•组织学诊断结果最终体现在病理诊断报告中。病理诊断报告•病理诊断报告是重要的医疗文件，应及时、准确、简练，不仅需要尽可能完整而简要地描述一个病例全部有关的大体和镜下特征及标本的所有检查结果，而且要向临床医师解释它们的重要性根据表达方式的不同病理诊断可有以下几种形式：•①明确肯定病变部分及疾病的诊断，•如：胃小弯溃疡型管状腺癌，侵及浆膜层；幽门淋巴结4枚，其中1枚有管状腺癌转移；•②不能完全肯定或有所保留的诊断。•一般是由于病变不够典型，性质难定；或虽能确定为恶性，但其组织来源难定。此类报告中，会出现“考虑为……”、“倾向于……”、“可能为……”等字样。•如：（喉部）鳞状上皮中重度不典型增生，局部癌变可能。又如：（腹膜后）小圆细胞恶性肿瘤，倾向于神经源性。•③描述性诊断，•如：（右小腿）送检组织部分坏死，边缘见鳞状上皮增生伴大量慢性炎细胞浸润。•④不能病理诊断，•如：送检小块组织，严重挤压变形，不能诊断。非诊断性术语的意义。有时我们在诊断时使用一些如“富于细胞”、“生长活跃”、“突破包膜”、伴细胞异型性等术语。这些强调了以形态所见为主，但明确恶性多项指标欠缺。另外一些诊断病名及术语如“侵袭性血管粘液瘤（aggressiveangiomyxoma）”、“轻微偏离性（minimaldeviated）宫颈腺癌”、“潜在恶性间质瘤”、“奇异型平滑肌瘤”、“不能定性型”平滑肌瘤等等系WHO新分类中提出，有特定的定义。•对某些少见的或是新近发现的肿瘤性疾病，病理医生应在病理报告的附注中适当提出有关预后及生物学行为的评价，也可对治疗提出原则性的建议，或对进一步检查提出有建设性的意见，帮助临床医生理解。•例如：（背部）隆突性皮纤维肉瘤，低度恶性；建议进一步扩大切除和/或局部放疗。3、手术中病理诊断•包括冷冻切片（frozensection）、快速石蜡切片和手术中细胞学诊断，其中以冷冻切片应用最多•主要适用于决定手术方案手术中病理诊断包括以下几个方面：•①确定病变的性质，炎性病变还是肿瘤；是良性肿瘤还是恶性肿瘤。这对临床医生在手术中决定手术方案至关重要，是否需要根治手术，截肢还是局部切除；•②了解恶性肿瘤的浸润及扩散情况，如边缘是否累及，周围组织是否有病变，肿瘤周围及远处淋巴结是否有转移，以决定手术范围：•③确定所取标本是否含有足够做出诊断的组织。•④由于现代社会工作的快节奏，一些人要求尽快知道结果，消除心理负担。手术中病理诊断局限性•取材有限，病理医生无目的取材•切片质量不稳定，组织学图像不如常规石蜡切片好，要求诊断的时间短，且要求有丰富经验的病理医师，还要胆大心细•因此，诊断准确率不如常规病理诊断•国内外已做过许多检查，准确率为90%～98%。未能确诊率在1%左右，假阴性的误诊明显多于假阳性4、尸体剖验（简称尸检，autopsy）医学法律尸检（medicolegalautopsy）：是应法律机构请求，由法医或与病理医生进行检查，以澄清与医疗纠纷，事故或谋杀等有关的死亡病例的死因临床尸检（clinicalautopsy）：是应临床医生请求，并征得死者亲属同意或应亲属要求而进行的尸检，目的在于查明死因，验证检查生前诊断的准确性，治疗是否正确无误，总结经验、教训，提高医疗水平•我国的尸检工作，尤其是近年来尸检率普遍下降，目前国内大部分教学医院的尸检率维持在10%以下，一些医院甚至全年没有一例成人尸检。这种低尸检率的状态将严重影响我国临床医学的发展，也不利于医学生、研究生和病理专业人员的培养提高。因此，应当在今后的临床工作中积极地争取尸检。•病理尸检的作用首先在于提高临床诊断水平及治疗质量。•尸检可以使1/5以上的病例在死后得到确诊。即使病人生前曾通过活检或手术标本检查得到了病理诊断，尸检仍能提供更全面，更准确的病理诊断。•尸检还对病人的疾病演变过程，发病机制，临床病理联系，治疗的作用等提供详尽的信息。•迄今为止，通过尸检结果总结诊断、治疗中的经验教训仍是提高医疗水平最重要的一个手段。•从某种意义上讲，一个医院的医疗水平的高低常常与尸检率的高低相平行。•病理尸检是培养临床和病理专业人员不可缺乏的手段。通过尸检的良好训练，病理专业人员能够更加系统地提高病理诊断水平和实际诊断能力。•尸检还为临床医学的教育及医学研究提供了重要的标本和资料。不仅保证了医学教育的质量，还促进了病理学及医学流行病学、人体解剖学、组织胚胎学等学科的发展。三、病理检验技术分类•（一）基本技术•病理检验的基本技术是指甲醛固定、石蜡切片和苏木素伊红染色（HE染色）技术，也称为常规病理检验技术。常规病理检验技术是临床病理检验中最基本，也是使用最多的技术方法。是病理技术的基础、核心，具有重要的临床应用价值和不可替代的地位。•（二）特殊技术•特殊技术一般指在HE染色的石蜡切片基础上，为确立病理诊断和进行科研而补充使用的技术方法，包括特殊染色、酶组织化学、免疫组织化学、细胞培养、电镜及、生物制样等技术。•（三）新技术方法•分子病理学技术、图像分析技术、流式细胞术、激光扫描共聚焦显微技术等。第二节病理检验技术常规工作一、收发工作•（一）申请单和标本的收验•同时接受同一患者的申请单和标本。•认真核对每例申请单和送检标本及其标志（联号条或其它写明患者姓名、送检单位、和送检日期等的标记）是否一致。•对于微小标本，必须认真核对送检容器内是否确有组织及其数量，发现疑问时，应立即向送检方提出并在申请单上注明或退回标本及申请单。•认真查阅申请单的各项目是否填写清楚。包括：患者基本情况（姓名、年龄、性别、送检单位、床位、住院号/门诊号、送检日期、取材部位、送检材料、标本数量、基本病史、相关检验结果、既往病理学检查结果（病检号和诊断）、临床诊断等。•病理科接收标本的人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动。不能接收的申请单和标本•申请单和相关标本未同时送达病理科