基因差异性表达分析系列产品(ppt)-PowerPoin

InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryAtlas（11852）SmartLivingColorsMatchmakerAdvantage厂家优势技术InnovativeToolsToAccelarateDiscovery基因差异性表达分析系列产品InnovativeToolsToAccelarateDiscovery一.mRNA水平上差异表达基因的获得InnovativeToolsToAccelarateDiscovery此类产品的客户群InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryAtlasArrays系列产品介绍InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryInnovativeToolsToAccelarateDiscoveryInnovativeToolsToAccelarateDiscoveryArray的用途寻找样本之间在mRNA水平上表达差异的基因（已知）InnovativeToolsToAccelarateDiscovery转基因和基因突变对功能的影响——鉴定与之相关的基因和信号疾病和肿瘤学研究——研究疾病的分子机制药物方面的研究——药物的作用靶点和相关的路径环境危害的影响——生理反应的分子机制临床样品的诊断——鉴定疾病类型和发病阶段InnovativeToolsToAccelarateDiscovery一尼龙膜InnovativeToolsToAccelarateDiscovery产品特点经过筛选适合杂交的200-600碱基的cDNA片段。目前有人、小鼠、大鼠的芯片，覆盖面广。随芯片提供标记探针用的CDSPrimerMix可用同位素/生物素进行标记588个基因以下的膜可用凝胶成象系统进行分析InnovativeToolsToAccelarateDiscovery生物素检测系统InnovativeToolsToAccelarateDiscovery产品种类1.2Array肿瘤细胞周期心血管神经生物学应急反应InnovativeToolsToAccelarateDiscovery其他配套产品：Qiagen的mRNA纯化Ambion的RNA沉淀剂Epicentre的9902K生物素标记试剂盒生物素检测试剂盒SmartcDNA扩增试剂盒InnovativeToolsToAccelarateDiscovery二GlassArraysInnovativeToolsToAccelarateDiscovery产品特点近80个碱基的单链cDNA点在玻片上，不带任何重复序列和同源性序列目前有人、小鼠、大鼠的芯片，有1081个基因（Human3.8有3800个），覆盖面广随芯片提供标记探针用的CDSPrimerMix和玻片杂交液及洗脱液芯片适用于市场上大多数的芯片扫描仪（规格75x25x1mm）可用任何荧光团标记探针（Cy3,Cy5,BODIPY,FITC,AlexaFluordyes,TexasRedInnovativeToolsToAccelarateDiscovery玻片产品种类•Human3.8（3800个基因的80-baseoligo）•Human1.0（1081个基因的80-baseoligo）•Rat1.0（1081个基因的80-baseoligo）•Mouse1.0（1081个基因的80-baseoligo）InnovativeToolsToAccelarateDiscovery其他配套产品Qiagen的mRNA纯化Ambion的RNA沉淀剂生物素标记试剂盒生物素检测试剂盒SmartcDNA扩增试剂盒InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryAtlasPlasticHuman8KMicroarray8300个已命名基因的Longoligos点在塑料片基上塑料片基大小为8cmx12cm独特的Longoligos设计，近80个碱基的长度InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryPlasticNylon基因数量83001176、588结合的片段80200-600探针标记方法同位素同位素荧光生物素/同位素灵敏度高高低高间距分辨率中中高低PhosphoimagePhosphoimageFluorescentPhosphoimageautoradiogramscannerautoradiogram是否可以重复使用是是（3－4次）非特异性杂交影响高低高检测设备Glass380080否几种Array的相互比较InnovativeToolsToAccelarateDiscovery竞争厂家InnovativeToolsToAccelarateDiscovery二.SSH杂交试剂PCR-SelectSubstractionKit卖点：无需同位素阳性率高对低表达量的RNA同样有效InnovativeToolsToAccelarateDiscovery销售指导可推荐的其他配套产品总RNA和mRNA抽提试剂盒（QIAGEN）PCRKit(1905-Y)TA克隆试剂盒（QIAGEN/UACloning、ClontechadvanTAge）质粒提取试剂盒/晶泰PCR-SelectDifferentialScreeningKitNorthern相关kit（Ambion/S&S)SmartPCRcDNA合成试剂盒InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryDD-PCR试剂DeltaDifferencialDisplayKit传统方法，比SSH的假阳性率高，且操作复杂卖点：随机引物设计较长，扩增重复性好90对引物组合，覆盖性好LD-PCR需要做PAGE电泳总RNA的抽提试剂InnovativeToolsToAccelarateDiscovery可推荐的其他配套产品总RNA和mRNA抽提试剂盒（QIAGEN）K1910-Y/1;8430-1/2TA克隆试剂盒（QIAGEN/UACloning、ClontechadvanTAge）质粒提取试剂盒/晶泰Northern相关kit（Ambion/S&S)SmartPCRcDNA合成试剂盒InnovativeToolsToAccelarateDiscovery全长基因及相关序列的获得InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryInnovativeToolsToAccelarateDiscoverySMARTRACE3’&5’endAmplificationKit卖点无接头连接(这是最关键的优点）操作步骤少（这也是一个关键的优点）SMART合成全长cDNA可同时获得5‘和3’的末端片段起始RNA用量只需50ng/1000cellsInnovativeToolsToAccelarateDiscovery销售指导可推荐的其他配套产品•QIAGEN总RNA和mRNA抽提试剂盒•QIAGEN质粒提取试剂盒•TA克隆试剂盒（QIAGEN/UACloning、ClontechadvanTAge）InnovativeToolsToAccelarateDiscoverySMARTcDNALibraryConstructionKit卖点无接头连接(这是最关键的优点）全长（这也是一个关键的优点）无需甲基化定向（SfiI)三种阅读框同时表达一步质粒化(loxP)起始RNA用量只需InnovativeToolsToAccelarateDiscovery销售指导可推荐的其他配套产品•总RNA和mRNA抽提试剂盒（QIAGEN）•噬菌体包装蛋白（EpicentreMaxPlaxLamdaPackagingExtracts）•cDNA筛选试剂盒（ClonCapture）•S&S的杂交膜•Ambion的生物素标记试剂盒及杂交试剂盒•Ambion的RNALaterInnovativeToolsToAccelarateDiscovery销售指导基因组步行试剂盒InnovativeToolsToAccelarateDiscovery基因表达时空及剪切的确定InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryMTE膜•HumanMultipleTissueExpressionArray76种人的组织和肿瘤细胞系的polyA+RNA点阵•MouseRNAMasterBlot22种小鼠的组织的polyA+RNA点阵InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryMTC膜是将mRNA电泳后转移到膜上这不仅可以确定表达谱还可以确定是否有不同的剪切InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryLivingColorsTM　荧光蛋白?绿色荧光蛋白(GFP&EGFP)蓝色荧光蛋白(EBFP)?黄色荧光蛋白(EYFP)InnovativeToolsToAccelarateDiscovery基因的表达与调空InnovativeToolsToAccelarateDiscovery原核表达系统昆虫表达系统酵母表达系统InnovativeToolsToAccelarateDiscovery逆转录表达系统Retro-XMSCVPantropicPrimarycellsHematopoietic,embrynicstem,embryonalcarcinomacellsMammalianornomammalianInnovativeToolsToAccelarateDiscovery腺病毒表达系统InnovativeToolsToAccelarateDiscovery•腺病毒在寄主细胞中呈游离态，基因瞬时表达•可侵染处于分裂期或非分裂期的寄主细胞•高水平的蛋白质表达•双载体系统的操作•病毒的效价可达1012pfu/ml•平均可插入8kb的外源片段•会引起体内的免疫反应•长期、稳定的基因表达，可以遗传•只能侵染分裂期的寄主细胞•中度的蛋白表达水平•单一载体操作•病毒效价达106pfu/ml•平均可插入6.5kb的外源片段•不会引起体内免疫反应腺病毒表达系统逆转录病毒表达系统腺病毒载体与逆转录病毒载体的比较InnovativeToolsToAccelarateDiscovery酵母杂交系统InnovativeToolsToAccelarateDiscovery酵母杂交系统阳性率高三个不同的启动子表达三个不同的报告基因质粒上带有半抗原InnovativeToolsToAccelarateDiscovery酵母杂交系统InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryMutagenesisKit•DiversityPCRRandomMutagenesisKit基本原理：通过降低PCR反应中的Mn+和dGTP的浓度来增加PCR反应的错配率，产生随机突变，这种突变的分布是均匀的。•TransformerSite-DirectedMutagenesisKit基本原理：定点将突变位点通过PCR引物带入目标质粒中InnovativeToolsToAccelarateDiscoveryMutagenesisKit•DiversityPCRRandomMutagenesisKit基本原理：通过降低PCR反应中的Mn+和dGTP的浓度来增加PCR反应的错配率，产生随机突变，这种突变的分布是均匀的。•TransformerSite-DirectedMutagenesisKit基本原理：定点将突变位点通过PCR引物带入目标质粒中InnovativeToolsToAccelarateDiscovery怎样拓展Clontech的市场