第三篇-药物杂质检查

第三章药物的杂质检查基本内容第二节一般杂质的检查方法第三节特殊杂质的检查方法第一节概述练习与思考基本要求一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。一、药物纯度的概念与要求第一节概述1.药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯净程度。对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的如：ASA中除了SA外，还存在乙酰水杨酸酐、乙酰水杨酰水杨酸等SA的衍生物，具有致敏作用。2.对药物纯度的要求随着临床应用的实践和分析测试技术的发展，在不断改进，使之更加完善如：度冷丁（Ⅰ）1948年收入BP，1970年经GC分离鉴定出两种无效异构体（Ⅱ）和（Ⅲ），有时高达20%～30%。OCH3HClNCH3OONCH3OCH3HClOCH3HClONC2H5例：纯度要求盐酸哌替啶(杜冷丁)无效异构体I无效异构体II3.杂质：药物中存在的无治疗作用的、影响药物稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。4.药物纯度的评价：应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。5.与试剂的纯度不同，不能用化学试剂的规格代替药品标准，更不能将化学试剂当作药品直接用于临床如：试剂规格的BaSO4,允许存在可溶性钡盐药品中不允许：可导致医疗事故1．杂质的来源：生产过程中引入贮藏过程中产生二、杂质的来源与种类(C6H10O5)x+H2OH+(C6H10O5)yC12H22O112C6H12O6H2O,H+淀粉糊精麦芽糖葡萄糖酸度：水解试剂带入乙醇中不溶物：水解中间体(糊精)SO32-：产品用H2SO3漂白可溶性淀粉：水解不完全1．杂质的来源：生产过程中引入贮藏过程中产生二、杂质的来源与种类外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、微生物等引起药物产生例如：麻醉乙醚醛及有毒的过氧化物O2．杂质的分类依杂质来源分类：一般杂质：含义，品种特殊杂质：含义依杂质毒性分类：信号杂质有害杂质依杂质理化性质分类：有机杂质无机杂质残留溶剂二、杂质的来源与种类一般杂质:在自然界分布比较广泛,在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。如：pH值、溶液的澄清度、氯化物、硫酸盐、重金属等特殊杂质：在有关药物的生产和贮存过程中，因其生产工艺或药物本身的性质可能引入的杂质。A+B→C→D+E①原料中间产物副产物产品③试剂溶剂催化剂⑤金属容器、管道、装置②制剂时的辅料④异构体多晶型三、杂质的限量检查在不对人体有害、不影响疗效的情况下，允许药物中存在一定量的杂质1.杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量表示方法：％或ｐｐｍ（百万分率）2.限量检查：药物中杂质的检查，一般不要求测定其含量，而只是检查杂质的量是否超过限量。常用方法：对照法供试液供试液＜对照液相同条件现象现象下反应比较供试液＞对照液对照液现象现象取一定量(C·V)与被检杂质相同的纯品或对照品配成对照品溶液，与一定量(S)药物供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定。合格不合格NaCl对照液葡萄糖稀硝酸10ml硝酸银1ml稀硝酸10ml硝酸银1ml对照液浊度供试液浊度杂质限量的计算：=杂质最大允许量杂质限量供试品量杂质对照液浓度其体积供试品量100%CVLS式中：L杂质的限度（%）C对照液浓度（g/ml）V对照液的加入体积（ml)S供试品的量(g)注意:单位统一例1：对乙酰氨基酚中氯化物的检查：取试样2.0g溶于100ml水中，取25ml检查Cl-，与标准NaCl溶液(10μg/ml)5ml对照液相比，不得更深。C=10μg/mlV=5.0mlS=252.0100=0.5g6105.010100%0.01%0.5L一．氯化物检查法：1.原理：供试液：Ag＋+Cl－→AgCl↓（白色混浊）对照液：标准氯化钠溶液……………2.方法：比浊mlmlml402510水稀硝酸水供试品mlml4010水稀硝酸标准液比较摇匀暗处水'50.1,503mlmlAgNO第二节一般杂质的检查方法3.讨论黑色背景下，从上至下观察（纳氏比色管“成对”）氯化物适宜浓度：50~80μg/50ml（浊度梯度明显）硝酸酸性：作用（介质条件）避光（AgCl见光分解）供试液若不澄清（事先过滤）供试液若有色（干扰消除）平行操作原则供试品有色：可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。供试品+AgNO3放置10min过滤澄清溶液+标准NaCl+水对照溶液供试品+AgNO3+水供试品溶液暗处放置5min后比较+AgNO3+水二、硫酸盐检查法1.原理：供试液：SO４2－＋Ba2＋→BaSO４↓（白色混浊）对照液：标准硫酸钾溶液………………………比浊2.方法mlml240稀盐酸水供试品mlml240稀盐酸水标准液后比较摇匀水'10505%252mlmlBaCl3.讨论黑色背景下，从上至下观察硫酸盐适宜比浊浓度：100~500μg/50ml盐酸酸性（介质）供试液如浑浊需滤过供试液若有色（干扰消除）平行操作原则三．铁盐检查法（一）硫氰酸盐法1.原理：供试液：Fe3＋＋6SCN－→[Fe(SCN)6]3－（红色）对照液：标准铁溶液（硫酸铁铵溶液）……比色2.方法ml25水供试品ml25水标准液，摇匀比较水％硫氰酸铵水mlmlml5035330mgml504过硫酸铵稀盐酸3.讨论白色背景下，从侧面观察盐酸酸性（防止三价铁水解）过硫酸铵的作用（氧化二价铁为三价铁）Fe3＋的适宜比色范围：10-50μg/50ml色调不一致时或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时：可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取提取液比色。平行操作原则(二）巯基醋酸法（BP）1.原理巯基醋酸还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性试液中与Fe2+作用生成红色配位离子。2Fe3++2HSCH2COOH2Fe2++SCH2COOH+2H+SCH2COOHFe2++2HSCH2COOHFe(SCH2COOH)2+2H+Fe(SCH2COOH)2[Fe(SCH2COOH)2]2-+2H2O2OH-四、重金属检查法重金属是指在实验条件下与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。ChP(2010年版)第一法(硫代乙酰胺法)用于溶于水、稀酸和乙醇的药物，最常用1.原理：供试液：CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SH2S+Pb2＋→PbS↓+2H＋（黄～棕黑）对照液：标准铅溶液（加硝酸防止Pb2+水解）……2.方法：比浊ml25规定方法供试品mlmlpH2525.3规定溶剂醋酸盐缓冲液标准液后比较摇匀，硫代乙酰胺'22ml5.3pH3.讨论白色背景下，从上至下观察pH3.5醋酸盐缓冲液Pb2＋适宜比色范围：10~20μg/27ml供试液有色时：供试品有微量Fe3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出S产生混浊影响比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+还原成Fe2+再检查。第二法（炽灼后的硫代乙酰胺法）：用于在水、稀酸、乙醇中难溶，或含芳环、杂环（能与重金属离子形成配位化合物）的有机药物1.原理：炽灼破坏后→Pb2＋→第一法检查2.方法：500～600℃炽灼第三法（硫化钠法）：用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物（磺胺类、巴比妥类）供试液：Pb2＋＋Na2S→PbS↓＋２Na＋（灰黑色）对照液：标准铅溶液………………………………介质条件：NaOH碱性条件比浊五．砷盐检查法古蔡法二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC）（一）古蔡法：※※※1.原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的砷化氢气体，遇溴化汞试纸产生黄至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在同样条件下生成的砷斑比较，颜色不得更深。As3++3Zn+3H+→3Zn2++AsH3AsO33-+3Zn+9H+→3Zn2++3H2O+AsH3AsO43-+4Zn+11H+→4Zn2++4H2O+AsH3AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3(黄色)2As(HgBr)3+AsH3→3AsH(HgBr)2(棕色)As(HgBr)3+AsH3→3HBr+As2Hg3(棕黑色)2.仪器装置3.方法：醋酸铅棉花的作用KI和酸性SnCl2的作用标准砷斑用2ml的标准砷溶液制成供试品、HCl、Zn、KI、SnCl2Pb(Ac)2棉HgBr2试纸返回KI和酸性SnCl2的作用：AsO43-+2I-+2H+→AsO33-+I2+H2OAsO43-+Sn2++2H+→AsO33-+Sn4++H2O②I2+Sn2+→2I-+Sn4+4I-+Zn2+→[ZnI4]2-AsO43-AsO33-AsH3慢快KISnCl2①将五价砷还原为三价砷，加快反应速度＋5＋3③抑制锑化氢的生成促进AsH3的生成④形成Zn-Sn齐，去极化返回Pb(AC)2棉的作用：消除锌粒和供试品中可能含有的少量的硫化物的影响。S2-+2H+H2SH2S+HgBr22HBr+HgS（汞斑）H2S+Pb(Ac)2PbS+2HAc返回4.供试品处理（1）供试品为S2-,SO32-,S2O32-等:因在酸中生成H2S,SO2,与HgBr作用生成HgS或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除。（2）供试品为Fe3+，能消耗KI，SnCl2，可先加足量SnCl2。（3）环状结构有机药物，先有机破坏（4）含锑药物，改用白田道夫（Betterdorff）法2As3++3SnCl2+6HCl→2As↓+3SnCl4+6H+胶态、棕褐色（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（silverdiethyldithiocarbamate)（Ag-DDC法）1.原理：供试液：AsH3+6Ag（DDC）→６Ag＋…（红色胶态）对照液：标准砷溶液………………………2.仪器装置：比色或测定AAg(DDC)的吡啶溶液(USP)三乙胺-氯仿溶液(ChP)3.方法：白色背景下，从上至下观察；或在510nm处，测定吸收度小结其他要求：原理试液的作用对照的方法砷盐检查法的仪器装置六、溶液颜色检查法控制药物中有色杂质的含量1.目视比色法5种色调10种色号标准比色液标准贮备液比色原液K2Cr2O7CoCl2CuSO42.分光光度法有色杂质对光有吸收，通过测定吸收度可控制其限量3.色差计法通过比较供试品、标准比色液与水之间的色差值黄绿、黄橙黄,橙红棕红七、易炭化物检查法检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，常采用加硫酸呈色后与对照液比较的方法进行检查。对照液为：标准比色液由CoCl2,K2Cr2O7,CuSO4配制KMnO4液八、溶液澄清度检查法八、溶液澄清度检查法澄清：系指供试品溶液的澄清度相当于所用溶剂或未超过0.5号浊度标准液九、炽灼残渣检查法炽灼残渣：有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐加硫酸炽灼法：700～800℃;如炽灼残渣需留作重金属检查，则炽灼温度应控制在500～600℃恒重：供试品连续两次炽灼或干燥后的重量差异在0.3mg以下限量标准：0.1%-0.2%除尽硫酸蒸气湿润炭化供试品低温～放冷缓缓炽灼ml15.0SOH42恒重放冷灰化℃炽灼～干燥℃炽灼～800700800700十、干燥失重测定法干燥失重：药品在规定条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示检查：药物中的水分和挥发性物质1.常压恒温干燥法适用于受热较稳定的药物温度：105℃2.减压干燥法适用于熔点低、受热分解的药物3.干燥剂干燥法适用于受热易分解或升华的药物干燥剂：硅胶、硫酸、五氧化二磷十一、有机溶剂残留量测定法主要检