实验室规则及常识

1第四部分附录一、实验室规则及常识1．每个同学都应遵守学习纪律，维护实验室秩序，保持室内安静，不大声说笑或喧哗。2．实验前应认真作好预习，明确目的和要求，了解本次实验内容的基本原理和操作步骤。3．在实验过程中要听从教师的指导，严肃认真的按操作规程进行实验，并简要、准确地将实验结果及原始数据记录在专用的实验记录本上，养成良好的实事求是的科学作风。课后及时总结复习，根据原始记录进行整理，并写出实验报告，按时送交任课教师评阅。4保持实验室环境和仪器的整洁是做好实验的重要条件及关键。必须维持实验桌面及试剂药品架上的清洁整齐，不要乱放和乱扔，仪器和试剂药品放置要井然有序。公用试剂药品用毕后立即盖好放回原处，要特别注意保持药品及试剂的纯净，严禁混杂。5．使用仪器、药品、试剂和各种器材都必须注意爱护及节约，不得浪费。洗涤和使用玻璃仪器时，应谨慎仔细，防止损坏，在使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障立即报告教师，不要擅自动手拆散和检修。6．废弃溶液可倒入水槽内，但强酸、强碱溶液必须先用水稀释后，再放水冲走。强腐蚀性废弃试剂药品、废纸及其他固体废物或带有渣滓沉淀的废液均应倒入废品缸内，不能倒入水槽内。7．实验室内一切物品，未经本室教师许可，严禁携出室外，借物时必须办理登记手续。仪器损坏时，应随即向教师报告，如实说明情况并认真登记后方可补领。8．必须遵守和熟悉实验室安全规章及防护知识，不得违反和破坏。禁止在实验室内吸烟。使用电炉应有人在旁，不可擅自离开不管，用毕后切记断电。9．每次实验结束后，应各自立即将仪器洗净倒置放好，并整理好实验桌面上的物品。值日生要负责当日实验室的卫生和安全检查，做好全部清理工作，离开实验室前应关上水、电、煤气、门窗等，严防不安全隐患事故的发生。10．对实验内容和安排不合理之处可提出改进意见，做到教学相长。对实验中出现的一切反常现象可开展分析和讨论。11．洗净的仪器要放在架上或干净的纱布上晾干，不能用抹布擦试，更不能用抹布擦2试仪器内壁。12．挪动干净玻璃仪器时，勿使手指接触仪器内部。13．取出的试剂和标准溶液，如未用尽，切勿倒回原试剂瓶内，以免掺混。14．凡是发生烟雾、有毒气体及有臭味气体的实验，必须在通风橱内进行。15．用实验动物进行实验时，不许戏弄动物。进行杀死或解剖等操作，应按规定方法进行，绝对不能用动物、手术器械或药物开玩笑。16．一般容量仪器的容积都是在20℃下校准的。使用时如温差在5℃以内，容积改变不大，可以勿略不计。二、实验室安全及防护知识1．实验室安全知识在生物化学实验室中，经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触，常常使用易碎的玻璃和瓷质的器皿，以及在水、电、煤气等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作。因此，必须十分重视安全工作和具备一定的防护知识。（1）使用电器设备（如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等）时，严防触电，绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。凡是未装地线或漏电的仪器，一律不能使用。（2）使用煤气灯或酒精喷灯时，应做到火着人在，人走火灭。（3）使用浓酸、浓碱，必须极为小心地操作，防止溅失。用移液管吸量这些试剂时，必须使用橡皮球或洗耳球，绝对不能用口直接吸取。如果不慎溅洒在实验桌面或地面上，必须及时用湿抹布或拖布擦洗干净。（4）使用易燃物（如乙醚、乙醇、丙酮、笨等）时，应特别小心。不要大量放在桌上，更不应在靠近火源处放置。只有在远离火源时，或将火焰熄灭后，才可大量倾倒这类试剂。低沸点的有机溶剂不准在火焰上直接加热，仅限在水浴上利用回流冷凝装置进行加热或蒸馏。如果不慎倾出了相当量的易燃液体。应立即关闭室内所有的火源和电加热器，并打开窗门及通风设备迅速用抹布或毛布擦拭撒出的液体，转入适当的容器中后再作妥善处理。（5）用油浴操作时，应小心加热，随时用温度计观测，绝对不能使温度超过油的燃烧温度。（6）易燃和易爆物质的残渣（如金属钠、白磷、火柴头等）不得倒入水槽或废物缸中，应倾入或收集在指定的容器内。（7）毒物应按实验室规定及办理审批手续后领取，使用时严格操作，用后妥善处理。32．实验室灭火方法实验中一旦发生了火灾切不可惊慌失措，应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和电源。然后根据具体情况积极正确地进行抢救和灭火。常用的方法有：（1）在可燃液体燃着时，应立即拿开着火区域内的一切可燃物质，关闭通风器，防止扩大燃烧。若着火面积较小，可用石棉布、湿布或沙土覆盖，隔绝空气使之熄灭。但覆盖时要轻，避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿，导致更多的溶剂流出而再着火。（2）酒精及其它可溶于水的液体着火时，可用水灭火。（3）汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着水时，应用石棉布或砂土扑灭。绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积。（4）金属钠着火时，可把砂子倒在它的上面。（5）导线着火时不能用水及二氧化碳灭火器，应切断电源或用四氯化碳灭火器。（6）衣服被烧着时切忌奔走，可用衣服、大衣等包裹身体或躺在地上滚动藉以灭火。（7）发生火灾时应注意保护现场。较大的着火事故应立即报警。3．实验室急救措施在实验过程中不慎发生受伤事故，应立即采取适当的急救措施：（1）受玻璃割伤及其它机械损伤：首先必须检查伤口内有无玻璃或金属等物碎片。然后用硼酸水洗净，再涂以碘酒或红汞水，必要时可用护创膏或纱布包扎。若伤口较大或过深而大量出血，应迅速在伤口上部和下部扎紧血管止血，立即到医院诊治。（2）烫伤一般用浓的（90%—95%）酒精消毒后，涂上苦味酸软膏。如果伤处红痛或红肿（一级灼伤），可涂医用橄榄油或用棉花沾酒精敷盖伤处；若皮肤起泡（二级灼伤），不要弄破水泡，防止感染；若伤处皮肤呈棕色或黑色（三级灼伤），应用干燥而无菌的消毒纱布轻轻包扎好，急送医院治疗。（3）强碱（如氢氧化钠，氢氧化钾等），钠、钾等触及皮肤而引起灼伤时，要先用大量自来水冲洗，再用5%硼酸溶液或2%乙酸溶液涂洗。（4）强酸、溴等触及皮肤而致灼伤时，应立即用大量自来水冲洗，再以5%碳酸氢钠溶液或5%氢氧化铵溶液洗涤。（5）如酚触及皮肤引起鸭伤，可用酒精洗涤。（6）若煤气中毒时，应到室外呼吸新鲜空气。如严重时应立即到医院诊治。（7）水银容易由呼吸道进入人体，也可以经皮肤直接吸收而引起积累性中毒。严重中毒的征象是口中有金属味，呼出气体也有气味；流唾液，牙床及嘴唇上有硫化汞的黑色，淋巴腺及唾液腺肿大。若不慎中毒时，应送医院急救。急性中毒时，通常用碳粉或呕吐剂彻底洗胃，或者食入蛋白（如1升牛奶加三个鸡蛋清）或蓖麻油解毒并使之呕吐。4（8）触电：触电时可按下列方法之一切断电路。①关闭电源；②用干木棍使导线与被害者分开；③使被害者和土地分离。急救时急救者必须做好防止触电的安全措施，手或脚必须绝缘。三、实验用器皿的清洗及洗涤液的配制实验中所使用的玻璃仪器及塑料器皿清洁与否，直接影响实验结果，往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差，甚至会出现相反的实验结果。因此，实验用器皿洗涤清洁工作是十分重要的基本操作，是做好实验的前提及实验成败的关键之一。1．洗涤液的种类及配制（1）0.5%去垢剂溶液（常用洗涤液）。（2）铬酸洗液[又称重铬酸钾（或钠）——浓硫酸洗涤液，简称洗液]广泛用于玻璃仪器的洗涤。其配制方法如下：①称取5g重铬酸钾(或钠)粉末放入250ml烧杯中，加5ml水，尽量使其溶解。然后边搅拌，边缓缓注入浓H2SO4l00ml，待洗液温度冷却至40℃以下，将其转移到具玻塞的细颈干燥的试剂瓶内贮存备用。②称取10g重铬酸钾粉末置于500ml烧杯中，加水20ml，尽量使其溶解。然后慢慢注入浓H2SO4180ml，随加随搅拌。冷却后贮于具玻塞的细颈试剂瓶中备用。③量取100ml工业硫酸置于250ml烧杯中，小心加热，慢慢加5g重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解后，冷却并贮于具玻塞的试剂瓶中备用。（3）浓HCl（工业用）常用于洗去水垢或某些无机盐沉淀。（4）浓HNO3（常用于洗涤除去金属离子）。（5）1mol·L-1KOH溶液。（6）8mol·L-1尿素洗涤液（PH1.0）适用于洗涤盛蛋白质溶液及血样的器皿。（7）10-3mol·L-1EDTA溶液用于除去塑料容器内壁污染的金属离子。（8）5%—10%磷酸三钠（Na3PO4·12H2O）溶液（用于洗涤油污物）。（9）氢氧化钾（KOH）的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠（NaOH）溶液，适用于清除容器内壁污垢，但这两种强碱性洗涤液对玻璃仪器的侵蚀性很强，故洗涤时间不宜过长，使用时应小心慎重。（10）有机溶剂：丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗脱油漆类污垢。2．玻璃仪器的清洗5（1）初用玻璃仪器的洗涤新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用去垢剂（0.5%水溶液）或肥皂水洗刷，再用自来水洗净。然后浸泡1%—2%HCl溶液中过液，次日取出用自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水漂洗数次，置烘箱内烘干或倒置晾干备用。（2）使用过的玻璃仪器的洗涤①一般玻璃仪器洗涤许多污染物（包括有机物及金属离子等）易粘附于玻璃容器的内壁上，故每次使用均须及时清洗。通常情况下先用自来水冲洗至无污物，再用去垢剂洗涤或浸泡于0.5%去垢剂水溶液中，将器皿内外（特别是内壁）仔细刷洗后，用自来水充分洗净，最后用蒸馏水漂洗数次，置烘箱（或微波炉）烘干或倒置在清洁处晾干备用。凡洗净的玻璃器皿，其壁上不沾有水珠，否则表示尚未洗净，应按上述方法重新洗涤。量具玻璃仪器不能烘烤，只能晾干或风干。对于进行高灵敏度的分析及检测实验所用的器皿，除用上述方法清洗外，还需采用其他特殊洗涤方法彻底清除污染物，使器皿洗得十分洁净是非常必要的。一般是把玻璃器皿浸泡于铬酸洗液中4—6h或过夜，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，烘干或晾干备用。通过洗液处理的玻璃器皿，在其器壁上的有机污物会被完全清除。如有必要还可用浓HNO3洗涤及处理玻璃器皿，最后用双蒸馏水充分漂洗，这样将使器壁上污染的金属离子得以清除。具有传染性样品的容器，如病毒、传染病患者的血清等沾污的容器，应先进行消毒处理后再进行清洗。盛过毒物的容器，特别是剧毒药品和放射性同位素物质的容器，必须经过专门处理，确知没有残余毒物或放射性存在方可进行清洗。②移液管（吸量管）的洗涤移液管每次使用后须及时用流水冲洗或浸泡于冷水中，特别是吸取粘滞性较大的液体（全血、血浆、血清等）后应立即用流水充分冲洗，以免物质干涸和堵塞移液管。通常使用过的移液管经自来水冲洗后，可浸泡于0.5%去垢剂溶液中或铬酸洗液中过夜（不少于4h），然后分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干备用。③玻璃比色皿和石英比色皿的清洗比色皿使用后应立即用蒸馏水充分冲洗，倒置在清洁处晾干备用。所有比色皿均可用0.5%去垢剂溶液洗涤，必须用脱脂棉小心地清洗，然后用大量蒸馏水充分漂洗干净，倒置晾干。但不能用氢氧化钾的乙醇溶液及其他强碱洗涤液清洗比色皿，因这样导致比色皿的严重腐蚀。3．塑料器皿的洗涤6聚乙烯塑料制品容器在生物化学实验室中的应用与日俱增，因此塑料器皿的清洗也是非常重要的。新购买的塑料器皿一般先用自来水清洗后，应以8mol·L-1尿素溶液（PH1.0）洗涤，再用蒸馏水漂洗。随后用1mol·L-1KOH溶液洗涤，再用蒸馏水漂洗。然后用10-3mol·L-1EDTA溶液洗涤，以除去污染的金属离子，最后用双蒸馏水充分漂洗，倒置晾干备用。经过上述洗涤步骤处的器皿，每次使用后可以0.5%去垢剂溶液洗涤，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干后即可使用。如果必要也可按碱→尿素→EDTA洗涤顺序处理，以除去器皿上的污染物。多数塑料器皿可在烘箱中干燥，但温度不宜过高，硝酸纤维制品离心管不能置烘箱中干燥，因硝酸纤维是一种易爆物。四、实验室常用仪器的使用（一）容量玻璃仪器的使用方法容量仪器有装量和卸量两种。量瓶和单刻度管为装量仪器。滴定管、一般吸管和量筒等均为卸量仪器。近年来，自动取样器已广泛应用于生物化学教学和科学研究中，是一种取液量连续可调的精密仪器，使用极为方便。1．吸管吸管是生物化学实验中最常用的卸量容器。移取溶液时，如吸管不干燥，