cobas-c-702-工作原理

cobas®8000-c702工作原理李小龙–DEC,20141.光学检测原理2.ISE检测原理光路图BTTPhotometryv3光学原理当光通过溶液时，溶液中不同物质会吸收不同波长的光，吸收的越多，透过的越少。溶液中物质的浓度与吸收光的强弱（吸光度）呈一定的数学关系。BTTPhotometryv3朗勃-比尔定律(Lambert-Beer’sLaw)TheLambert-Beerlaw就是溶液中物质的浓度与吸光度呈线性关系A=ε*c*lc:溶液中测量物质的浓度ε:摩尔吸光系数l:光径由于εandl都是常量，所以能够得到Abs∝concBTTPhotometryv3Lambert-Beer’sLaw（朗勃-比尔定律）如果ε不知道，就需要计算测量物质的定标曲线。然后跟据未知浓度的物质的测量吸光度值，结合定标曲线计算该物质的浓度，如下图。Concentration(amountofsubstance)Absorbance(amountofcolor)40123456706050302010Calibrator/standard(cfas)UnknownsampleCobasc702定标概念•LotcalibrationReagentlotspecificCalibrationofacassette,whichis24honboard•Cassette/RackpackcalibrationCassetteorrackpackspecificCalibrationofacassette,whichis24honboard.•NewestcalibrationCalibrationtobetransferredCalibration(newest、Lot.Calibration)istransferredtocassette,whichdoesnothaveanycalibrationdata.Cobasc702定标类型定标品S1小数点位数与计算K值得关系如果修改了定标品1的小数点位数，该注意什么？CellBlankMeasurements1.StoredCellBlank：周保养杯空白数据，做为比色杯本底保存在系统内，每执行一次CellBlankmeasurement,杯空白数据自动更新。2.PassingCellBlank：每个比色杯用于分析测量之前进行的杯空白测量，该杯空白数据与StoredCellBlank比较不超过0.1ABS为合格。1）某个比色杯连续两次PassingCellBlank与StoredCellBlank超过0.1ABS，仪器报“Abnormalcellblank(twice)”,仪器自动启用该比色杯。2）连续10个比色杯连续两次PassingCellBlank与StoredCellBlank超过0.1ABS，仪器报“Abnormalcellblank(tentimes)”,仪器自动停下来，不能进行样本检测。（哪些情况会报10X？）光度计检查（PhotometerCheck）：包含在日保养维护组合里，是指第一个比色杯在12个波长的空白吸光度值。（解读）BTTAssayTypesPhotometricv.3C702反应顺序Cobasc70210分钟反应时间共测38个点，测光间隔为16.2秒。C702Samplepipetting0-11stT0=0minReagent10-1stT1≈0minR2reagent5-6thT2(≈1.5min)R3Reagent18-19thT3(≈5.0min)R4reagentn/aT4(≈10min)Timing两点终点法R3一点终点法两点速率法速率A法Lastmp1st.mpSampleReag.atR1timing1.光学检测原理2.ISE检测原理ModularISE检测所需要的电极1、ISE电极－Ref电极内部充满KCL凝胶，外部的KCL参比液流经电极内部，管路有微孔与凝胶相通，然后与样本流混合，提供稳定的参比信号Ref电极在机稳定性：至少6个月2、ISE电极－Na电极玻璃膜电极3、ISE电极－K电极PVC膜电极4、ISE电极－Cl电极PVC膜电极K、Na、Cl在机稳定性：3个月或9000个测试Ref.参比电极-每个电极所测得的信号都是相对于参比电极而言的-每个离子电极都与参比电极形成回路-电动势(EMF):是指参比电极和离子电极之间的电压盐桥混合液KCl样本-参比电极提供一个稳定的测定信号-参比电极液使用的是1mol的KCl溶液1.分注550µl的内标液(IS)进行冲洗2.冲洗完后，真空吸干内标液3.注射器抽取65µlKCl参比电极液通过参比电极形成盐桥4.分注500µl的IS进入TOWER用于1点定标5.其中300µl的IS被吸取通过电极进行1点定标6.真空吸干内标液TOWER内剩余的内标液7.15µl的标本被吸入TOWER内8.450µl的稀释液被吸入对标本进行稀释及混匀9.注射器再抽取65µlKCl参比电极液通过参比电极形成盐桥盐10.350µl被稀释好的样本被吸收通过电极进行检测11.真空吸走剩余的样本到废液系统PreparationInternalStandardSampleISE检测过程由此可知，每个标本消耗样15ul、DIL450ul、REF130UL、IS550ul（连续测量）/1100μL（单次测量）ISE定标在rackreception模式每10分钟执行一次or检测标本时。每24h执行一次一点定标全点定标补偿内部系统的变化Full-pointcalibration:-电极老化(slop)-当前系统条件或试剂的偏差(offset)-系统污染导致的电极响应速率和携带污染1-pointcalibration:-在样本测量之间的IS测量考虑基于系统的漂移(如:温度变化，电极膜的改变)ISEStandard1(Low)aqueousISEStandard2(High)aqueousISEStandard3(Compensator)proteinbasedISEStandard3(High)CalibratorsS1-LowandS2-HigharemeasuredforNa,KandClS1-Lowmmol/LS1–Highmmol/LNa120160K37Cl801202pointcalibrationInternalstandardsolution•每次检测之前•补偿电极相应的偏移和改变S1–Lowmmol/IS2–Highmmol/IInternalStandardmmol/INa120160140K375Cl80120100ISE的电动势测量S1、S2、S3分别测量三次，每次测量取5个点的电动势，在这5个点的值中会去掉一个最高和一个最低值，取剩下的三个点的平均值作为结果。如果在这三个值中最大偏差超过以下范围：Na0,7mVK1,0mVCI0,8mV仪器将产生一个NOISE的报警。3–780-120120-160LogTransformationSignaltoconcentrationrelationship010cEMF1001000Logofconcentration)10(.SlopeEMFEMFISSampleISsampleCvalueCompCISE定标斜率计算SlopesTargetmV/decadeMarginmV/decadeFailed(Slope?)Na+50-6845–49.945K+50-6845–49.945Cl--68to-40-39.9to35.0-3512log121log2log12CSCSEMFSEMFSCSCSEMFSEMFSSlope由以上公式可知，在ISE硬件无故障的情况下，斜率是由S1和S2定标品EMF和浓度决定。内标的计算1点定标•内部定标在每次定标和做每个标本前进行.•飘移得到纠正-电导线的连接电势变化、膜、试剂，系统温度ISE3.Internalstandardcalculation•内标液浓度由斜率决定•IS的EMF‘s必须在S1和S2的EMF均值附近•由于IS浓度须用于每次病人结果计算，•所以更换内标液后应该重新定标补偿值的计算•现有补偿液用完后，将使用S2替代作为S3。•补偿值（C.value）在每次结果计算时自动对结果进行纠正S1K+:-45.4S2K+:-26.1S3的浓度是由斜率（Slope）tS3的EMFIS的浓度及电动势所共同决定的.ISE定标补偿值的计算ISE3.CompensationValueCalculationTESTIS.EMFS1EMFS2EMFS3EMFSLOPEIS.CONC.S3CONC.C.VALUENa-33.6-37.3-30.6-34.153.6141138-2K-33.3-45.4-26.1-36.852.45.14.37-0.12Cl131.8134.4127.1131.4-41.592947ISE3.CompensationValueCalculation)10(.SlopeEMFEMFISSampleISsampleCvalueCompC•定标监测报告中的补偿值是给定的靶值减去测定的浓度值所得•每一个标本检测的结果都将加上相应的补偿值，得到最后的标本结果CIS:内标液浓度EMFSampl样本中特定离子的电压差EMFIS内标液中特定离子的电压差ISEcheckNaEMFKEMFClEMFREFEMF-32.0-34.4132.80.2-32.0-34.4132.70.2-32.0-34.5132.70.2-32.1-34.5132.70.2-32.1-34.5132.80.2-32.0-34.5132.80.1-32.1-34.6132.80.2-32.0-34.6132.80.2-32.0-34.6132.90.2-32.0-34.5132.90.3-32.1-34.5133.00.3-32.1-34.5132.90.3-32.1-34.6132.80.3-32.1-34.6132.80.2-32.1-34.7132.80.2-32.1-34.7132.80.2-32.0-34.8132.90.2-32.1-34.7132.90.2-32.0-34.8132.80.1ISECHECK是只检测IS液流经ISE检测单元时，各电极的电动，势，不用DIL，如右图。执行ISECheck了解ISE的管路状况总结ThankyouforyourattentionRocheDiagnostics(Shanghai)LimitedShanghai200031ChinaThispresentationisourintellectualproperty.Withoutourwrittenconsent,itshallneitherbecopiedinanymanner,norusedformanufacturing,norcommunicatedtothirdparties.COBASandLIFENEEDSANSWERSaretrademarksofRoche