61《医学微生物学》复习思考题参考答案

第1页共50页宜春学院医学院杨婧编写1《医学微生物学》绪论1、微生物的概念，微生物分哪三型八大类？微生物（microorganism）：是存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须藉助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。包括细菌、病毒、真菌等三类。按结构和组成不同，可分为三型八大类⑴非细胞型微生物：病毒⑵原核细胞型微生物（广义的细菌）：包括细菌（狭义的细菌）、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体及放线菌。⑶真核细胞型微生物：真菌第1章细菌的形态与结构1、名词解释：细菌L型；中介体；质粒；芽胞⑴细菌L型：是指细胞壁缺陷型的细菌。1935年Klieneberger首先在Lister研究所发现而得名。⑵中介体：细菌细胞膜向细胞质内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于G+菌。中介体参与细菌的分裂和能量的产生，有类似于真核细菌纺锤丝与线粒体的作用。⑶质粒：存在于细胞质中的带有遗传信息、控制细菌的某些特定遗传性状、能够自我复制的染色体以外的闭环双链DNA。或：细菌的胞质DNA。⑷芽胞：某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式，即为芽胞。其抵抗力强，衡量灭菌效果时，常以杀死芽胞作为判断指标。芽胞的大小、形态、位置等随菌种而异，有助于细菌鉴别。2、细菌的基本结构与特殊结构以及它们的主要功能、G+菌与G-菌的细胞壁的比较。基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细胞壁的功能：⑴维持菌体的固有形态，保护细菌抵抗外界低渗环境；⑵参与菌体内外物质交换；⑶带有多种抗原，决定细菌的免疫原性。诱发机体产生免疫应答并与血清分型有关。⑷G-菌外膜是一种屏障结构，阻止某些抗生素的进入，成为细菌耐药的机制之一。⑸某些G+有表面蛋白、G-菌内毒素等与细菌的致病性有关。⑹与细菌染色性密切相关。细胞膜的功能：⑴物质转运；⑵生物合成；⑶细胞呼吸；⑷形成中介体，参与细菌分裂等。细胞质的功能：是细菌合成蛋白质和核糖核酸的场所；是细菌进行新陈代谢的场所。核质的功能：是细菌的遗传物质，控制细菌的各种遗传性状。细菌的特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢。荚膜的功能：⑴抗吞噬作用；⑵黏附作用；⑶抗有害物质的损伤；⑷具有抗原性。第2页共50页宜春学院医学院杨婧编写2鞭毛的功能：⑴是细菌的运动器官；⑵有些鞭毛（如霍乱弧菌、空肠弯曲菌）与细菌的致病性密切相关；⑶具有抗原性，可籍此鉴定细菌及对细菌分类菌毛的功能：⑴普通菌毛：细菌的黏附结构，与细菌的致病性有关。⑵性菌毛：介导接合，细菌的毒力、耐药性等性状可通过此方式传递⑶为某些噬菌体的受体。芽孢的功能：⑴根据芽孢形态、大小以及在菌体中的位置，有利于细菌的鉴别；⑵杀死芽孢为灭菌的可靠指标；⑶可以成为某些传染病潜在的传染源：芽孢本身不致病，但当它发芽转变为繁殖体后，可引起疾病。在人类，有四种常见的严重的传染病是由能形成芽孢的细菌引起的——炭疽杆菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌和产气荚膜梭菌。革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁结构比较如下：细胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌组成聚糖骨架、肽侧链和肽交桥聚糖骨架、肽侧链结构类型三维空间结构二维平面结构强度较坚韧较蔬松厚度厚，20－80nm薄，10－15nm肽聚糖层数多，可达50层少，1－２层肽聚糖含量多，占细胞干重50－80%少，占细胞干重5－20%磷壁酸＋－外膜－＋对溶菌酶、青霉素的敏感性敏感不敏感革兰染色性紫色红色3、简述细菌L型的形成、主要生物学性状及其临床意义。形成：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素（溶菌酶、溶葡萄球菌素、青霉素、胆汁、抗体、补体等）的直接破坏或合成受到抑制后形成。G+菌原生质外仅有细胞膜包住称原生质体，G-菌尚有外膜保护称原生质球。主要生物学性状：⑴高度多形性；⑵着色不匀，大多染成革兰阴性；⑶培养条件要求高，必须在高渗低琼脂含血清的培养基中生长；⑷生长缓慢（2～7天），菌落呈荷包蛋样；⑸去除诱发因素后，有些L型可回复为原菌；⑹生化反应与原菌有明显差异；⑺存在于细胞壁的抗原减弱或丢失；⑻对作用于细胞壁的抗生素产生耐药性，而对作用于核酸或蛋白质合成的抗生素仍敏感。临床意义：可引起慢性和反复发作的感染，如尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等，并常在使用作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中发生。第3页共50页宜春学院医学院杨婧编写34、试述某些抗生素（青霉素、溶菌酶、红霉素、链霉素）的抗菌作用机制。青霉素的作用部位为：干扰四肽侧链与五肽交联桥之间的连接，使细菌不能合成完整的细胞壁，导致细菌死亡。溶菌酶的作用部位为：切断N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键的连接，破坏聚糖骨架，引起细菌裂解。红霉素的作用部位：能与细菌核糖体上的50S大亚基结合，干扰蛋白质的合成，从而杀死细菌。链霉素的作用部位：能与细菌核糖体上的30S小亚基结合，干扰蛋白质的合成，从而杀死细菌。5、革兰染色的原理、方法、结果判断与临床意义。革兰染色原理：⑴通透性说：主要是由于两类细菌的细胞壁成分和结构的不同。革兰阴性菌细胞壁中含有较多类脂质，而肽聚糖含量较少。当用酒精脱色时，溶解了类脂质，增加了细胞的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞脱色，经复染后，染上复染液(复红)的颜色；而革兰阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大，类脂质含量少，经酒精脱色后，肽聚糖层的孔径变小，通透性降低，酒精不易进入菌体脱色，故细胞仍保留初染液(结晶紫)的颜色。⑵化学说：G+菌菌体含有大量的核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的菌体不易脱色。⑶等电点说：G+菌（PI2-3）低于G-菌（PI4-5），G+菌带负电荷比G-菌要多，G+菌易与带正电荷的碱性染料（结晶紫）结合牢固，因而不易脱色。革兰氏染色的步骤（方法）如下：干燥1min1min15--30s①涂片②结晶紫③卢氏碘液④95%酒精固定水洗水洗水洗30s—1min⑤稀石碳酸复红待干后用油镜进行观察。结果判断：革兰阳性菌呈紫色，革兰阴性菌呈红色。革兰染色的临床意义：⑴鉴别细菌；⑵选择药物；⑶与致病性有关。第2章细菌的生理1、名词解释：IMViC试验；热原质；细菌素；内毒素；外毒素；培养基；菌落；纯培养⑴IMViC试验：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）及枸橼酸盐利用（C）四种试验，常用于肠道杆菌的鉴定，合称IMViC试验。如大肠埃希菌的结果是：++--；产气杆菌的结果是：--++。⑵热原质：又称致热原，是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。⑶细菌素（bacteriocin）：P19某些细菌菌株产生的一类仅对近缘细菌具有抗菌作用的蛋白质称为细菌素。⑷内毒素（endotoxin）：P18即革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性成分为脂质A，当菌体死亡裂解后才释放，是革兰阴性菌的主要致病物质。⑸外毒素（exotoxin）：P18是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质，其毒性强，为细菌重要的致病物质。第4页共50页宜春学院医学院杨婧编写4⑹培养基（culturemedium）：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品称为培养基。⑺菌落：单个细菌在固体培养基上生长繁殖形成的单一的肉眼可见的细菌集团，称菌落。许多菌落融合在一起形成菌苔。⑻纯培养：挑取一个菌落移种到另一培养基中，长出的细菌为纯种，该方法称为纯培养。2、简述细菌生长繁殖的基本条件有哪些？为什么专性厌氧菌在有氧环境中不能生长繁殖？细菌生长繁殖的基本条件：⑴充足的营养物质：包括水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等；⑵合适的pH值：大多病原菌的最适pH值为7.2-7.6；⑶适宜的温度：大多数病原菌的最适温度为37ºC；⑷必要的气体环境。专性厌氧菌不能在有氧环境中生长繁殖的原因：⑴缺乏Eh高的呼吸酶（细胞色素和细胞色素氧化酶）；⑵缺乏分解有毒氧基团的酶（超氧化物歧化酶SOD、触酶、过氧化物酶）3、细菌的合成代谢产物种类及其在医学上的意义？⑴与致病性有关的合成代谢产物：热原质/致热原、毒素和侵袭性酶；⑵供治疗用的合成代谢产物：抗生素、细菌素、维生素；⑶与鉴别细菌有关的合成代谢产物：色素。4、细菌的生长曲线可分为几期？各自的主要特点是什么？细菌生长曲线：是将一定量的细菌接种于适宜培养基中进行培养，连续检测细菌在不同培养时间的活菌数目（以菌落形成单位cfu表示），以cfu为纵坐标，培养时间为横坐标，可以作出一条反映细菌生长数变化规律的曲线，即生长曲线。包括迟缓期、对数期、稳定期、衰退期这四个时期。⑴迟缓期：代谢活跃，菌体增大，积累酶、辅酶和中间代谢产物，不分裂繁殖，为细菌大量繁殖作好物质准备。⑵对数期：细菌繁殖迅速，菌数呈几何级数增长，细菌的生物学性状典型，对外界环境作用敏感，适用于研究细菌的生物学性状和进行药物敏感实验，一般在培养后8-18小时。⑶稳定期：细菌数仍在增加，死菌数与活菌数形成一种动态平衡。其特点：形态、染色性等生物学性状常有改变；芽孢，毒素、抗生素等产生；若向培养系统补充营养物质，取走代谢产物，改善培养条件则可延长稳定期。⑷衰亡期：死亡菌数增多，超过活菌数，细菌形态显著改变，生理活动趋于停止。一般不用该期细菌作鉴定和研究工作。5、按物理性状不同可将培养基分哪几种？各有何主要用途？培养基按其物理性状可分为固体培养基、半固体培养基与液体培养基三种。分别观察下列生长现象：⑴固体培养基：细菌得以分离培养生成菌落从而获得纯种，主要用于细菌的分离和纯化。菌落分为三型：①光滑型菌落（S型菌落）；②粗糙型菌落（R型菌落）；③粘液型菌落(M型菌落)。⑵半固体培养基：多用来检查细菌的动力和短期保存细菌。有鞭毛的细菌可由穿刺线向四周运动播散，培养后穿刺线模糊不清，呈羽毛状或云雾状混浊生长；无鞭毛的细菌，不能运动，仅沿穿刺线生长，穿刺线清晰，穿刺线以外的培养基仍透明澄清。第5页共50页宜春学院医学院杨婧编写5⑶液体培养基：主要用于大量繁殖细菌和观察某些细菌的生化反应。细菌在液体培养基中生长呈三种状态。①混浊生长，见于大多数细菌；②沉淀生长；③菌膜生长，多为专性需氧菌，在培养液表面生长，形成菌膜。6、按用途不同可将培养基分为哪几种？请各列出一种常用的培养基。⑴基础培养基：如营养肉汤、营养琼脂、蛋白胨水等⑵增菌培养基：①通用增菌培养基：如血平板、血清肉汤等。②专用增菌培养基：如碱性蛋白胨水用于霍乱弧菌的增菌。⑶选择培养基：如SS平板、伊红-美兰琼脂平板、亚碲酸钾血琼脂平板、TCBS等。⑷鉴别培养基：如糖发酵管、双糖铁培养基等。⑸厌氧培养基：如庖肉培养基、硫乙醇酸盐肉汤等。7、根据细菌代谢时对分子氧的需求与否，可将细菌分为哪几类？根据细菌代谢时对氧气要求的不同，可将细菌分为专性需氧菌；微需氧菌；兼性厌氧菌；专性厌氧菌四大类。第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全1、名词解释：消毒；灭菌；无菌；无菌操作⑴消毒：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。但不一定能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。⑵灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。⑶无菌：不存在活的微生物的意思。⑷无菌操作：防止微生物进入人体或其他物品的操作技术。2、常用湿热灭菌方法的种类及其效果与适用范围。⑴巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物（如结核杆菌）、保持物品中所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。持续法:61.1-62.8℃30分钟；瞬间法:71.7℃15-30秒；常用于消毒牛奶、酒类。⑵煮沸法：常用于消毒食具、刀剪、注射器等繁殖体：煮沸100℃，5min；芽孢：煮沸100℃，1～3h。⑶流动蒸气消毒法：阿诺蒸锅或蒸笼。繁殖体：煮沸100℃，15～30min⑷间歇蒸气灭菌法：如血清培养基的灭菌。⑸高压蒸气灭菌法：一种最有效、最彻底的灭菌方法。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸气压下，温度121.3℃，维持15-20min，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。是普通培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的最佳灭菌法。3、高压蒸汽灭菌法所要求的条件和