试验显微镜油镜的使用和保养试验目的1学会显微镜油镜的使用

实验一、显微镜油镜的使用和保养[实验目的]1.学会显微镜油镜的使用与保养方法。2.学会认识细菌的基本形态与特殊结构。[油镜的原理]由于油镜的透镜很小，自标本玻片透过的光线因介质密度（从载物玻片到空气，再进入油镜）的不同，部分光线因发生折射而散失（如下图A—A‘），不能进入透镜，致使射入的光线较少，物像呈现不清。当在油镜与标本片之间加镜油后（镜油的折光率为1.515和玻璃的折光率1.52相近似），从而减少了光线通过标本片与油镜之间空气（折光率1.0）引起的散光现象，增加了进入透镜的光线（如下图中C—C‘），使视野的明亮度加强，物像可看清楚，此外，加用镜油能增加油镜的数值孔径，提高显微镜分辨能力。油镜加香柏油的原理[实验内容]（一）显微镜的使用材料显微镜，镜油（香柏油），擦镜纸，玻片标本。方法1．检查：使用前必须对所用显微镜进行详细检查，如发现问题应及时向老师报告。2．调光：检查未染色标本时，以弱光线为宜，此时可将集光器下降或缩小光栅，检查染色标本时，以光线强为宜，此时应适当升高集光器或将光栅打开。3．标本观察：将标本置于载物台上，先用低倍镜观察。用粗调节器调至看出物象后，再调节细调节器，使物像更加清晰。在换高倍镜观察前，鉴于高倍镜视野范围比低倍镜小，故须将被观察内容移至视野中央后再换之。（二）油镜的使用和保养1．油镜头的识别：油镜头上一般刻有100×、或Oil、油等标记。2．油镜的使用方法：（1）将显微镜直立于桌上，不要扳动倾斜关节，使载物台保持水平。（2）对光：用低倍镜对光，检查染色标本时光线宜强。要抬高集光器，放大光圈。（3）滴加香柏油一小滴于染色标本片上，将标本置于载物台上，移置待检部分于接物镜下。（4）换用油镜，眼睛从侧面看着物镜，转动粗调节器，使镜筒下降至油镜头浸入镜油并几乎接触标本片。（5）左眼看接目镜，一面观察，一面缓慢转动粗调节器，使镜筒上升，直到观察到模糊的物像时，再适当转动细调节器，使物像完全清晰，即可正式观察。注意切不可在眼看目镜时向下转动粗调节器，以免压碎标本片及损坏镜头。观察标本时养成左眼看接目镜的习惯。（三）油镜的保养1．标本观察完毕，向上转动粗调节器将镜筒提起，取下标本，用擦镜纸将镜头上的油擦净。若油已干，可用擦镜纸沾少许二甲苯擦去油迹，随即用擦镜纸擦去二甲苯。因二甲苯能溶解粘固透镜的胶质，如不擦去二甲苯，日久后镜片会脱落。2．将物镜转成“八’字形，以免损坏油镜。降低集光器，竖起反光镜，将显微镜放入镜箱。3．填写显微镜使用登记卡。注意事项：1．细调节器是显微镜最精细、最脆弱的机械部分，每旋转一周使镜筒上升或下降0.1毫米，只能做往返回转，不要向单一方向转动数周。2．观察滴片标本时，载物台应放平，注意勿将物镜镜头接触粪液。3．观察封片标本时，勿使镜头与盖玻片接触，以免压坏标本或损伤镜头。4．观察血涂片标本时，必须按一定顺序，逐个视野检查，以免遗漏。实验二、细菌的形态检查细菌在适宜的环境条件下，保持着一定的形态。细菌的正常形态基本上分为球菌、杆菌和螺形菌三类。球菌按其分裂方向与分裂后排列情况又分成双球菌、链球菌、四联球菌、八迭球菌、葡萄球菌等；杆菌也有球杆菌、链杆菌、分枝杆菌、棒状杆菌等之分；螺形菌中菌体仅有一个弯曲，呈逗点状者叫弧菌，菌体有2～3个回转，且较坚硬者为螺菌。细菌除具有基本结构外，某些细菌在一定条件下尚具有某些特殊结构，如荚膜、鞭毛、芽胞、菌毛。细菌特殊结构除菌毛须用电镜观察外，荚膜、鞭毛、芽胞均可用光镜观察。。材料葡萄球菌、链球菌、脑膜炎双球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌示教片。鞭毛（伤寒杆菌）、荚膜（肺炎链球菌）、芽胞（破伤风杆菌）示教片。方法1.细菌基本形态的观察注意细菌菌体大小、形状、排列特点及染色性。①球菌：葡萄球菌革兰染色标本片。②杆菌：大肠埃希菌标本片。③螺形菌：霍乱弧菌标本片。2.特殊结构的观察①荚膜：肺炎链球菌荚膜标本片。注意荚膜的厚薄。②芽胞：破伤风梭菌芽胞标本片。注意芽胞的大小、形状及其位置。③鞭毛：伤寒沙门菌鞭毛标本片。注意鞭毛的数量及其类型。【实验报告】1.记录显微镜油镜的使用与保养方法。2.绘出显微镜下细菌基本形态及特殊结构图。