医学实验基本操作技能

《医学实验基本操作技能》讲稿供医学本科各专业使用基础医学院实验教学中心二○○八年九月第一篇医学实验基本要求第一章医学基本操作技能实验教学目的及一般规则【课程目的】了解开设《医学实验基本操作技能》课程的目的和意义；初步了解医学实验基本操作技能包括的主要内容；掌握实验室的一般规则及安全规则。【课程内容】一、课程简介（一）开设目的及意义医学实验基本操作技能是基础医学的重要组成部分。开设目的：1.加强医学实验基本操作技能的培训，提高中医院校学生的动手能力；2.学习医学实验和科学研究的基本方法，为后续实验课程的开设奠定基础；3.培养严谨的科学研究态度和实事求是的科学研究精神，为今后的科学研究工作培养良好习惯。（二）学时安排：共60学时。1．理论教授：1次课，4学时：----医学实验基本要求2．实验操作：11次课，52学时；（1）生物化学实验基本技能：1次实验（5+5学时）----生物化学基本技能、常用生物化学仪器操作（2）显微形态实验基本技能：3次实验（4学时/实验）----生物显微镜的结构、使用方法----石蜡组织切片、HE染色技术，血涂片制作及瑞特染色技术-----血细胞计数（4）机能实验基本技能：6次实验（5学时/实验）----实验动物基本操作1（捉拿固定、编号、给药、处死等）----实验动物基本操作2（麻醉、脱毛、取血、解剖等）----常用动物手术操作技术（手术器械、缝合、打结、拆线）----生物机能实验系统操作技术（BL410、BL420）----急性动物实验的基本技术--蛙实验----急性动物实验的基本技术--兔实验3．实验操作考试：1次课，4学时：进行单人、抽签考试。（三）课程内容1．医学实验基本要求本内容为该课程中的第一讲，也是唯一的一次课堂理论讲授，主要包括以下两个内容：（1）教学目的及实验规则本内容主要包括三个方面：一是开设本课程的主要目的及意义；二是进入实验室所必须遵守的规则；三是实验室安全守则（详细内容参考教材第一篇第一章）。（2）实验操作与实验报告本内容主要包括三个内容：一是实验操作过程及实验记录中注意的事项；二是实验结果及误差；三是实验报告的书写及要求（详细内容参考教材第一篇第二章）。2．生物化学实验基本操作技能本内容现被安排为一次实验，该实验主要包括以下内容：（1）生物化学基本技能本内容主要介绍生物化学实验所必须掌握的基本操作技能，主要包括：玻璃仪器的认领、使用和洗涤；常用溶液配制、混匀、沉淀及过滤（详细内容参考教材第三章第一节）。（2）常用生物化学仪器操作常用生物化学仪器操作主要介绍常用量器的操作使用；各式离心机的操作使用等（详细内容参考教材第三章第二节）。3．显微形态实验基本操作技能显微形态实验基本操作技能现在主要安排三次实验：（1）实验一、生物显微镜的结构、使用方法和镜下绘图要求本次实验包括两部分内容：①掌握OLYMPUSCH-20生物显微镜的结构、使用方法（详细内容参考教材第四章第一节实验一）。②掌握光镜下绘图要求（详细内容参考教材第四章第一节实验一）。（2）实验二、石蜡组织切片、HE染色技术，血涂片制作及瑞特染色技术。本次实验包括三部分内容：①了解石蜡组织切片、HE染色技术（详细内容参考教材第四章第二节实验一和第三节实验一）。②掌握血涂片制作及瑞特染色技术（详细内容参考教材第四章第二节实验三）。③人外周血涂片的镜下观察、绘图。（3）实验三、人外周血细胞计数。本次实验包括两部分内容：①掌握人外周血细胞计数——显微镜计数法（红细胞计数）（参考教材第四章第五节实验二）。②掌握人外周血细胞计数——显微镜计数法（白细胞计数）（参考教材第四章第五节实验二）。4．机能实验操作基本技能（1）实验动物的基本操作方法本节内容先被分为两次实验：实验动物基本操作一：主要让同学们学习掌握常用动物的捉拿固定、性别鉴别与编号方法，以及实验动物给药剂量的计算、给药方法及处死方法等（详细内容参考教材第五章第一节实验一）。实验动物基本操作二：主要让同学们学习掌握实验动物常用的麻醉、脱毛方法，实验标本的采集方法，常用动物的取血方法以及脏器的辨认（详细内容参考教材第五章第一节实验二）。（2）机能基本实验常用技术本内容主要包括以下两个实验：①常用动物手术操作技术本实验主要让同学们学习掌握常用实验动物手术器械的辨认、使用，主要包括蛙类实验常用手术器械和哺乳类动物手术器械；以及常用手术的缝合、打结与拆线方法（详细内容参考教材第五章第二节实验一）。②生物机能实验系统操作技术生物机能实验系统是研究生物机能活动的主要设备和手段之一。它可以使研究人员、老师和学生通过该系统观察到各种生物机体内或离体器官中探测到的生物机能信号，同时还可根据使用者的命令对数据进行指定的处理和分析（详细内容参考教材第五章第二节实验二）。（3）急性动物实验的基本技术本容包括以下两个实验：①蛙实验本实验主要让同学们学习掌握蟾蜍或蛙的捉拿、脑和脊髓的破坏及手术器械的使用方法，同时通过该实验进一步加强对生物机能实验系统的操作练习（详细内容参考教材第五章第三节实验一）。②兔实验本实验主要让同学们学习掌握家兔的麻醉、脱毛、颈部解剖结构及插管术、血压的测定等基本实验方法，同时进一步掌握压力换能器和生物机能实验系统的使用（详细内容参考教材第五章第三节实验二）。5．考试（1）考试内容本课程为考试课，考试内容包括三个方面：一理论考试，所占比例为30%；二操作考试，所占比例为40%；三平时成绩，所占比例为30%。（2）考试方法①理论考试：根据教材和实验指导以及教学过程中教授的内容进行期末结束的笔试考试。考试时间由教务处统一安排；考试题型主要包括：单项选择题、多项选择题、名词解释和问答题等形式。②操作考试：根据实验课中开设的实验操作内容，进行单人、抽签考试。③平时成绩：主要包括三大部分，一是预习报告，占5%，二是实验报告，占20%，三是出勤情况，占5%。凡是迟到、早退者，每次扣0.5分；凡是旷课2次以上者，取消参加操作和理论考试。二、实验守则(一)实验一般规则（详细内容参考教材第一章第二节）1．实验前准备工作（1）思想准备：主要包括：①实验开设时间；②实验开设内容；③进行实验的地点；④充足的睡眠；⑤充足的体力；⑥预习实验内容；⑦实验中可能出现的问题以及解决办法；⑧实验室内、外环境等。（2）物质准备：主要包括：①实验学习用具；②白大衣；③预习报告；④实验教材或实验指导等。2．实验中注意事项（1）严格遵守实验室各项规定；（2）听从老师的安排；（3）认真听讲；（4）认真观察老师的示教操作；（5）积极主动参与实验；（6）规范操作；（7）注意安全；（8）认真记录；（9）注意实验的每一细节，培养严谨的科学态度和实事求是的工作作风；（10）加强团结协作的团队精神等。3．实验后工作（1）清点实验物品；（2）刷洗实验物品；（3）整理和清扫实验室；（4）填写各种实验使用纪录；（5）关闭水、电、气开关；（6）关闭门窗；（7）按时完成实验报告等。（二）实验室安全规则（详细内容参考教材第一章第三节）1．基本安全规程进入实验室所遵循的“十要”和“十不要”：十要：（1）要熟悉实验室内、外环境（2）要熟悉常用有害物质的表示（3）要保持实验台面的整洁（4）要将长发盘起（5）配制试剂要在实验台或实验架上进行（6）要在毒气柜内操作一些有毒试剂的操作（7）要严格遵守实验室各项规定（8）要服从实验室老师的安排（9）要按指定地点存放实验污物（10）离开实验室要洗手十不要：（1）未经批准不准进入实验室（2）单独一人不可作危险性实验（3）精神、身体状态不佳不要做实验（4）不可在实验室里打闹、奔跑（5）不可在实验室内进食（6）不可湿手摸电器（7）不可穿拖鞋、短裤进入实验室（8）未经批准不可将实验室物品带出实验室（9）不可俯视或嗅闻化学试剂（10）遇到紧急情况不可慌乱2．仪器使用规程（1）在动用仪器设备前必须认真阅读仪器操作规程，经指导教师同意后方可使用；（2）使用仪器有疑问时应请教指导教师，不可自行勉强操作；（3）实验中要爱护仪器、设备，严格按照操作规程进行操作；（4）与当次实验无关的仪器及设备不得任意动手操作；（5）精密、大型仪器、公用仪器与试剂只能在原处使用，不得随意挪动；（6）实验过程中要注意安全，若仪器设备发生故障或损坏时，要及时报告指导教师，不可擅自拆卸和处理；（7）使用一切电器设备时，要确实检查线路是否正常，电压、电流与功率是否匹配，要小心操作严防触电；（8）凡损坏仪器设备者，应主动向指导教师说明原因并接受检查，填写报损单，根据情况按有关规定赔偿；（9）对违反操作规程或擅自动用其它设备造成损坏者，由事故人作书面检查，赔偿损失，视认识程度和情节轻重，酌情免予或给予处分；（10）仪器使用完毕后，关闭各项程序和开关，必要时填写使用记录。3．化学试剂使用规程（1）取试剂前应两次核对标签，以保证试剂或药品名称和浓度准确；（2）从试剂瓶中取出的试剂，不得再倒回原瓶中，若取了过量试剂，可分给其他同学或抛弃；（3）勿将试剂瓶盖接口内部朝下放置而接触到其他表面，以防污染；（4）绝对不允许随意混合各种化学试剂和药品，以免发生意外事故；（5）不可擅自携带化学试剂和药品外离实验室；（6）若需要用吸量管量取试剂时，必须使用橡皮球或定量加液器吸取，严禁用嘴直接吸取；（7）使用剧毒、麻醉、致癌，放射药品等，应严格按照规定的审批手续领取，规范操作，注意安全，废液要妥善处理，用剩的毒、麻药品应如数交还；（8）一切能产生烟雾、毒性、刺激性气体、挥发性有毒物质的实验或腐蚀性气体试剂应放在通风橱内，如实验室无此设备，则必须开窗通风并在远离火源的地方进行等。4．易燃易爆物品使用注意事项（1）使用加热的电器(电炉、电热套、电热板)或燃气时要作到火着人在，人走火灭；（2）点燃的火柴用后立即熄灭，不得乱扔；（3）使用易燃试剂时要特别注意远离火源，加强空气流通，用毕立即盖紧瓶塞；（4）严禁在有火源的地方倾倒易燃试剂；（5）严禁把这些易燃试剂放在烧杯等广口器皿内直接在火上加热；（6）钾、钠和白磷等暴露在空气中易燃烧，所以钾、钠应保存在煤油中，白磷则可保存在水中；（7）酒精灯在添加酒精时，应将灯焰先行熄灭，酒精添加切勿过满；引燃酒精灯时，必须用火柴或纸片引燃之，切勿将酒精灯直接持至另一已燃着的灯焰上引燃；（8）不纯的氢气遇火易爆炸，操作时必须严禁接近明火。在点燃前，必须先检查并确保纯度；（9）银氨溶液不能留存，因久置后会变成氮化银也易爆炸；（10）某些强氧化剂(如氯酸钾、硝酸钾、高锰酸钾等)或其混合物不能研磨，否则将引起爆炸。5．放射性实验室的安全防护规则（1）进入实验室前一般应先通风；（2）进入实验室必须穿戴防护衣帽、眼镜等；（3）严格遵守放射源领用制度和专人专管制度；（4）实验室内应明显划分活性区和非活性区，严禁在实验室内进食、饮水、吸烟和存放食物；（5）所有操作要规范，放射性物质必须作好放射性标志；（6）在进行强放射性操作前，一般都要作无放射性物质的模拟实验(又叫冷实验)，待操作熟练之后才能进行放射性的实验；（7）放射性废物必须同普通垃圾分别存放，并严格标识；（8）实验中发生放射性事故时，应保持镇静，立即报告指导教师，在教师的指导下进行放射性去污；（9）工作人员的皮肤暴露部位有伤口未愈时，一般要暂停放射性操作；（10）实验室要保持经常的清洁和整齐，要定期用剂量仪进行检测，发现沾污要及时去污、清洗；（11）工作人员离开实验室前，必须仔细洗手，洗完后要经仪器测量，达到本底水平方可离开。（三）实验室废物处理1．实验室废物处理应遵循的原则（1）集中回收，分类处理；（2）降低毒性或腐蚀性，减少污染，达标排放；（3）尽量重新回收和再利用。2．实验室废气排放的主要办法物理处理方法：(1)吸附法；(2)溶解法；(3)回流法；(4)袋装法；(5)稀释法；(6)掩埋法等。化学处理方法：(1)燃烧法；(2)沉淀法；(3)中和法；(4)还原法；(5)生物法等。3．实验室废液处理原则及办法（1）实验室废液处理原则：分类存放；严格标示；分类处理；严禁直接注入下水道。（2）实验室废液标示的内容