临床微生物学检验第五版第18章衣原体

第18章衣原体革兰氏阴性病原体，在自然界中传播广泛；专性细胞内寄生，一般寄生在动物细胞内；对多种抗生素敏感；能通过细胞滤器，有独特发育周期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物一、衣原体的定义导论二、衣原体特点具有DNA和RNA两种核酸，二分裂增殖，有核糖体和黏肽组成的细胞壁；具有独立的酶系统，能分解葡萄糖释放CO2，但缺乏产生代谢能量的作用，因而表现严格的细胞内寄生；其生活周期分为细胞外期（即有感染性的原体）和细胞内期（即增殖性的始体）两个时期；Giemsa或荧光抗体染色可在细胞核附近原浆查见衣原体包涵体；衣原体基因组的Mr为660×10６,比除支原体外的任何原核生物都小；可作涂片检查，补体结合试验及微量免疫荧光试验等检测方法，还可直接作细胞培养分离衣原体；对多种抗生素敏感二、衣原体特点衣原体与细菌的主要区别：缺乏合成生物能量来源的ATP酶，其能量完全依赖被感染的宿主细胞提供。衣原体与病毒的主要区别：具有DNA、RNA两种核酸、核糖体和一个近似细胞壁的膜，并以二分裂方式进行增殖，能被抗生素抑制。三、衣原体与其他微生物的区别原体（elementarybody，EB）：体积小，卵圆形电子密度大，直径为0.2～0.4微米，细胞壁厚。始体（initialbody）亦称网状体(reticulatebody，RB)：球状细胞，形体较大,呈圆形或不规则形，电子密度较小，直径约为0.3～0.5微米，细胞壁薄，壁中结构松散。中间体(Intermediatebody)：存在的一种过渡形态。四、衣原体结构N:细胞核;燕尾箭头:网状体;五角星:中间体;箭头:原体;Bar=1μm有感染性的原体（elementarybody，EB）一种不能运动的球状细胞，对外界不良环境抵抗力强。无感染性的始体（initialbody）亦称网状体(reticulatebody，RB)以二分裂进行繁殖，产生小细胞，当寄主细胞解体后，这些小细胞能被释放出来，再去侵染另一些寄主的细胞。五、衣原体的两相生活史衣原体发育周期第一节衣原体的分类衣原体目依据其表型、形态学和遗传学特性分类为1个科、1个属衣原体科(Chlamydiaceae)、衣原体属(Chlamydia)四种衣原体是引起人类和动物一系列疾病的病原沙眼衣原体(C.trachomatis)鹦鹉热衣原体(C.psitta)肺炎衣原体(C.pneumoniae)反刍动物衣原体(C.pecorum)衣原体目衣原体科(Chlamydiaceae)假衣原体科(Parachlamydiaceae)Simkaniaceae科Waddliaceae科衣原体属(Chlamydia)嗜性衣原体属(Chlamydophila)沙眼衣原体(C.trachomatis)猪衣原体(C.suis)鼠衣原体(C.muridarum)鹦鹉热嗜性衣原体(C.psittaci)肺炎嗜性衣原体(C.pneumoniae)反刍动物嗜性衣原体(C.pecorum)流产嗜性衣原体(C.abortus)猫嗜性衣原体(C.felis)豚鼠嗜性衣原体(C.caviae)Simkania属S.negevensisWaddia属WSU86-1044假衣原体属(Parachlamydia)P.acanthamoebae根据被检株全长16SrRNA和23SrRNA同源性第二节沙眼衣原体不仅能引起眼科的感染性疾病，还可以引起泌尿生殖道、呼吸道感染等。其中以沙眼最常见。而且是致盲的首位因素。人类是其主要的自然宿主。沙眼衣原体生物亚种性病淋巴肉芽肿生物亚种（biovarlymphogranulomavenereum，LGV）鼠生物亚种这两个亚种的自然宿主都是人，分别感染眼、生殖道和呼吸道以及淋巴结。这种亚种为鼠间传播，不感染人，与鼠肺炎有关1.分类2.生物学特性•原体较小，Giemsa染色呈紫色；•始体较大，形状不甚规则；以二分裂方式繁殖，生成新的原体，在胞浆内形成包涵体；•包涵体可呈散在型、帽型、桑椹型或填塞型，Giemsa染色呈深紫色；•接种鸡胚卵黄囊中，鸡胚死亡后卵黄囊膜涂片可见衣原体颗粒，病理切片可见细胞内包涵体。3.致病性与免疫性•致病性：沙眼衣原体：沙眼亚种和性病淋巴肉芽肿亚种（1）沙眼：沙眼亚种引起。（2）包涵体结膜炎：同上。（3）泌尿生殖道感染；（4）性病淋巴肉芽肿：LGV生物亚种引起•免疫性：产生抗体，但维持时间不长。4.微生物学检测（1）标本直接检查显微镜检查1）Giemsa染色：原体染成紫红色，网状体呈蓝色。此法简单易行，但敏感性较低。酶免疫检测胶体金法检测衣原体核酸检测（2）抗体检测2）免疫荧光检查：第三节肺炎衣原体肺炎衣原体是衣原体属中的一个新种，只有一个血清型，其代表株为TW-183和AR-39，因两株衣原体的血清型完全相同，以这两株的字头合并后，称作TWAR组衣原体，98kD蛋白为其特异性抗原。1.分类只有一个血清型，在1989年正式被命名是一种重要的呼吸道病原体代表菌株——TWAR株2.临床意义寄生于人类，也寄生于马和考拉树熊体内；主要引起青少年急性呼吸道感染，可引起肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等；临床表现：咽痛、声音嘶哑等；慢性感染与急性心肌梗死和慢性冠心病有关；慢性肺炎衣原体感染可能是冠心病的一个重要因素。3.致病性与免疫性目前已新分离出10多株肺炎衣原体，是一种重要的呼吸道病原体。TWAR主要引起青少年急性呼吸道感染，可引起肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等。4.微生物学检测（1）标本直接检查：直接显微镜检查：Giemsa染色查找包涵体——参考价值TWAR特异性核酸检测：采用PCR技术（2）细胞分离、培养与鉴定：选用HEP-2和H-292细胞系进行分离培养。鉴定——直接或间接法荧光染色。观察并计算——包涵体数目。第四节鹦鹉热衣原体鹦鹉热衣原体首先从鹦鹉体内分离出来，可感染家禽、家畜（如牛、羊、猪、猫、豚鼠等）、和野生动物（如海貂、麝鼠、野兔、跳羚、树袋熊、苏门羚、野猪、袋鼠、野猴）等，主要引起动物肺炎、关节炎、流产和毒血症等多种疾病，也可感染人类引起非典型性肺炎等。1.分类可将鹦鹉热衣原体分为A、B、C、D、E、F、M56和WC8个血清型和至少9个基因型，每个血清型株均表现出一定的感染宿主的特异性。2.临床意义患者多呈急性发病，发冷、头痛及喉痛、不适，体温38℃，很快上升至39～40℃；典型临床表现为非典型肺炎，干咳、少量黏痰，有时为铁锈色痰，X线检查可见肺部有单个或多个实变性阴影，称为鹦鹉热或鸟疫。严重病例可累及心血管及神经系统，表现为心肌炎、心内膜炎、脑膜炎和脑炎等症状，可在心肌炎患者心肌内的巨噬细胞中检查到包涵体。也寄生于马和考拉树熊体内。4.微生物学检测（1）标本直接检查显微镜检查Giemsa或Machiavello染色法观察衣原体的原体和网状体。抗原检测以衣原体属、种或型的单克隆抗体与荧光素结合后，用免疫荧光的方法检测组织或细胞中衣原体抗原的存在或用于衣原体的分型；也可用酶免疫法（EIA）检测组织或细胞中的衣原体抗原。（2）核酸检测针对将衣原体MOMP基因、属特异LPS表位基因（3）抗体检测方法有补体结合试验(CF)、间接血凝试验(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等，常用CF和ELISA法。4.微生物学检测简述衣原体的主要特征。简述对衣原体引起的感染如何进行检验？名词解释：原体，始体，包涵体。作业：