PCR实验室SOP文件

芄肀莅前言肆肂我院是一所综合性三级医院。近年来，随着临床医学的不断进步，检验医学也得到了迅猛的发展。检验科为了更好的满足临床诊断的需求，根据卫生部临检中心制定的《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）、《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字2002第8号）文件，设立了临床基因扩增检验实验室，并于2009年6月着手编写实验室质量管理程序文件。经过试运行，反复讨论和修改第一版已定稿。从即日起开始实施。膀螆袀内蒙古第四医院袈检验科蚃前言芁编号：CG-JY-QY羀日期：2009年7月1日艿版本：2009-1莄共1页薄螁芀膇芆薀芀薈蚄编写人薃批准人荿生效日期蚅王宇飞蒆莂张惠彬葿2009-7-1肆袈肃1.质量方针袄内蒙古第四医院膁检验科蕿质量方针、目标蒇编号：CG-JY-FZ薆日期：2009年7月1日膄版本：2009-1虿共1页羃本实验室的质量方针是：准确、及时、可靠。蝿2.质量目标艿全面贯彻质量方针，建立科学、合理的实验室质量管理体系，严格按照程序规定做好检验工作，不段提高自身素质和技术水平，为临床和患者提供准确、可靠的诊断依据。螅螁衿蒅膃蒀衿袆羅薃羈芇莃节肈蚈肅肁膈聿编写人薃批准人肄生效日期芈王宇飞膆芅张惠彬袃2009-7-1莈蒈1.目的：文件管理有序和便于资料的查用莈2.范围：本质量管理手册及实验室相关资料膆3.负责人：王宇飞蒃4.规章薈4.1本质量管理手册分正副本，正本由主任保管于主任办公室；副本由实验室负责人保管于实验室；薅4.2本质量管理手册有电子文档，备有一份软盘，由主任保管；薇内蒙古第四医院羆检验科蚂文件管理程序蒈编号：CG-JY-Pro羇日期：2009年7月1日蒄版本：2009-1莀共1页薄4.3本质量管理手册不能外借，不能复印，不能抄写，只能在本室阅读；膂4.4临床基因扩增实验室的每区有相应的质量管理文件副本，由实验室工作人员保管；蚇4.5本实验室的相关资料由实验室工作人员填写，保管于相关实验室，超过一年的资料由主任保管。羆4.6实验原始数据电子文档每天保存于电脑中，一年的电子文档备于光盘中，保存五年；病人原始送检单及原始资料记录本保存两年；其它实验室的记录保存两年，超过保存期可按实际情况处理。莆羁肁莇螄羄膁编写人螈批准人蒆生效日期螃王宇飞膁腿张惠彬羄2009-7-1薂莃蒁1.目的：保证实验室工作规范而有序的进行肇2.范围：检验科临床基因扩增实验室袅3.负责人:王宇飞膂4.内容：薁4.1基因扩增检验实验室是检验科下设的，采用实时荧光定量PCR技术对临床标本进行基因扩增诊断的专业实验室。本实验室按《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）中临床基因扩增检验实验室基本设备标准结合本科实验室的条件进行配置、装修。并严格按《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字2002第8号）的要求开展临床基因扩增工作。蒈4.2实验室共分三个隔离区：一、试剂贮存和准备区，二、标本制备区，三、扩增、分析区。各区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识：试剂贮存和准备区――黄色；标本制备区――红色；扩增、芁内蒙古第四医院芆检验科蚅临床基因扩增实验室设置与管理莁编号：CG-JY-Pro-01莁日期：2009年7月1日蚆版本：2009-1膃共1页分析区――绿色。各种物品要有相应颜色标记，不得混用。各工作区配置、功能及管理见实验室平面图、各区工作制度及相关SOP文件。并设立标本接收区负责接收标本及提供咨询服务等。芃4.3进入实验室必须严格遵守试剂准备区→标本制备区→扩增及产物分析区的单一流向制度，严禁误入和逆行进入其他工作区。袁4.4按要求配置各种检验器械，并定期质检由专人维护以保证运转正常，性能可靠。蚁4.5实验室所开展的检测项目均系卫生部批准的项目，使用经国家药品监督管理局批准的试剂。蚅4.6制订有关的各种规章制度及操作程序，并严格执行,以保证工作规范而有序的进行。肅所引用图表：蚀附图1实验室平面图附表02实验室工作人员一览表螀附表01实验室主要负责人简历附表03实验室仪器设备一览表肆编写人蒃批准人蚃生效日期螀王宇飞蒇膅张惠彬蒂2009-7-1袀袈内蒙古第四医院蚃检验科芁实验室人员配置、管理及培训羀编号：CG-JY-Pro-02艿日期：2009年7月1日莄版本：2009-1芄共2页肀1.目的：规范实验室人员的管理，保证实验室具备开展该类实验的能力。莅2.负责人：王宇飞肆3.人员要求：肂3.1基因扩增实验室工作人员应具备较广泛的分子生物学知识，掌握相关学科知识及应用能力（实验技能、分析能力、沟通能力）。膀3.2实验操作人员应取得卫生部临检中心或内蒙古自治区临检中心颁发的上岗培训证书。螆3.3工作人员上岗前必须掌握PCR实验室管理文件及要求，并由实验室主任核查。薄4.人员配置：螁4.1实验室根据工作开展情况配备足够数量的工作人员。目前，实验室由实验室主任、两名青年技师组成。芀4.2实验室主任负责实验室全面管理、解决与临床沟通及技术疑难问题，组织工作人员参加相关知识培训，实验室主任不在岗时，应指定代理人负责。膇4.3两名青年技师负责实验室技术管理及临床标本的检验。芆5.人员管理：薀5.1按时上下班，不迟到、早退。不得擅离工作岗位，特殊情况需请假。芀5.2实验人员须保持仪表整洁，语言礼貌、举止文明，对待来访病人或电话应耐心细致，解释明确，不得推脱或生硬回绝。薈5.3进入实验室的工作人员必须遵守实验室的单一流向的规定，禁止逆向走动。蚄5.4非本室工作人员未经允许不得进入实验室。薃5.5实验室内不得吸烟、饮食及进行化妆。荿5.6实验室技术人员必须严格执行PCR实验室制定的各项操作规程，不得随意更改操作步骤。明确人员的责任分工，保证工作的顺利完成。蚅5.7所有仪器须有专人负责，有使用维护记录，保持仪器卫生整洁；实验人员必须熟悉仪器性能方允许操作，仪器使用前必须检查是否完好，一旦发现问题，需及时向科室负责人反映，不得擅自拆装；非仪器操作人严禁使用。蒆5.8实验室内使用的一次性物品如离心管、吸头等要做好无菌灭活准备。莂5.9每天了解仪器运转情况及试剂使用情况，检查电源，水龙头，负责安全工作。葿5.10实验室地面必须平整、干净，通道要利于通行，没有阻碍。肆5.11合理规划实验室内物品，抽屉、柜子、文件类物品要作好标记，以方便识别，做到摆放整齐、有序，容易寻找。袄5.12每日实验结束后及时记录，清洁实验台面和地面，用紫外灯消毒实验台面及实验室。报告单按时发送，原始记录存档清晰，以备查询。膁5.13每天下班前要关好门窗、检查空调和仪器的电源是否关闭，处理好废弃物，内务整理完毕，关闭实验区。蕿6.人员培训计划：蒇6.1实验室主任（或其指定代理人）每年必须参加卫生部中心PCR室间质评总结会议。薆6.2实验室主任督促指导本室工作人员通过继续教学或自学提高业务素质。膄6.3实验人员参加卫生部临检中心或省（自治区）临检中心举办的临床核酸扩增培训班；虿6.4安排未取得上岗培训合格证的工作人员在合适的时间内参加技术培训；袈6.5实验室工作人员每1～2年至少参加1次临床基因扩增检验技术的省级或国家级继续教育项目，参加相关学术交流会议；肃6.6定期对临床医护人员进行有关核酸扩增技术，标本采集、保存、运输知识的培训；羃组织科室人员学习核酸扩增相关知识，质量管理手册；组织科室人员学习讨论工作过程中出现的相关问题，并提出可行的解决方案。蝿艿螅所引用图表：螁衿附表02实验室工作人员一览表蒅人员培训计划及培训记录见“人员档案”艿薇羅袂羁蕿肅芃葿莈编写人膅批准人蚄生效日期膁王宇飞膇芄张惠彬膅2009-7-1虿内蒙古第四医院膀检验科莄临床基因扩增实验室各区的工作制度节编号：CG-JY-Pro-03莁日期：2009年7月1日罿版本：2009-1莄共3页蚃1.目的：保证实验室的良好工作环境和实验结果的准确性。肃2.负责人：王宇飞蚈3.程序：蒄实验室分标本接收区和三个隔离区:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增分析区。进入各区严格按照单一方向进行，即试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增、分析区。各区及其设备、物品必须有明确的标记，严禁混用。肄3.1试剂贮存和准备区蒁，及专用的工作鞋或使用一次性鞋套，操作中须戴手套。蒇，每项记录书写工整详细。薄，绘制冷柜温度图，打开排风扇，提前开启洁净工作台紫外灯和风机组工作15-30分钟。蒅，使用时应在消毒有效期内。节，检查是否有过期或将近到期的试剂，作报废处理或排列优先使用，避免浪费；取出当天实验须使用或配制的试剂，其余试剂要立即收好放回冷柜内，然后记录试剂的详细保存情况。蒀，将准备好的试剂分装到PCR反应管中，放入专用的试剂管架中，填写工作流程表及相关仪器使用维护记录表，还原实验台面，将本区所有废弃物分类装入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录。蚄，清洁实验台及地面，打开紫外灯消毒30～60分钟并记录。薁，白色工作服留在本区。蚀3.2标本制备区芈，戴手套，手套在实验过程中疑有污染应立即更换。螄，每项记录，书写工整详细。羂，绘制冰箱温度图，打开排风扇，开启生物安全柜20分钟后使用。莂，并将冰箱内一周前的已测标本取出，丢入废液垃圾桶，然后记录标本的保存情况。肇，将处理后的标本加入分装有试剂的相应PCR反应管中。处理后的标本放入冰箱冷藏室标本存放专区暂存，实验结束后装入塑料袋内密封后放入生物垃圾袋内。肈，还原实验台面，关闭所有仪器。莃，实验结束后方丢入生物垃圾袋内，患者样品应按有生物传染性危险品对待。袀，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录。肀，实验结束后，清洁实验台及地面，打开紫外灯消毒30～60分钟并记录。膈，工作流程表，检验申请单及垃圾带出本区，将蓝色工作服留在本区。螄3.3扩增、分析区薂，戴手套。衿，每项记录，书写工整详细。芇，打开排风扇，打开扩增仪预热30分钟。膅肀，保存检测结果后关机，立刻取出反应管装入塑料袋内密封后放入生物垃圾袋内。分析并记录检测结果，填写工作流程表，绘制质控图，记录仪器使用时间和运行状态。薈莇，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录。莂，实验结束后清洁该区打开紫外灯照射30～60分钟，记录紫外灯使用情况。螂，粉红色工作服留在本室再离开实验室。莇，原始报告单保存在科室统一存放处。蒇3.4标本接收区螃本临床基因扩增检测实验室配备两名实验员，在以下描述中分别称为第一实验员和第二实验员。膀，不能返回的情况下，第二实验员在此接收、传递标本，接待来访。蒀，验收登记后，将标本通过缓冲区送入标本制备区。薇，应书写工整详细。膄，封口，交医院统一处理，在垃圾筒上套好新的垃圾袋。袁，记录紫外灯使用情况。腿薇所引用图表：薅荿附表04.干式恒温器使用记录表羇附表05.应急处理记录表蚇附表06.离心机使用记录表蚁附表09-1.检测后标本保存记录表肁附表09-2.待检标本保存记录表螆附表10.基因检测结果记录表螇附表12.BIO-RADiCycler荧光定量扩增仪使用记录表肂附表17-1.生物安全柜使用记录表蕿附表17-2.洁净工作台使用记录表蝿附表21实验室温度、湿度、水浴箱温度记录表袇附表22垃圾处理记录表蒃附图3.冰箱温度记录图芁附图2.室内质控图薈基因检验报告单格式羆袄虿芇肆芅蒁莀膆蒂膃聿膆袃编写人薀批准人袈生效日期芆王宇飞芃节张惠彬蚆2009-7-1莆内蒙古第四医院蚄检验科螀内务管理制度虿编号：CG-JY-Pro-04蒆日期：2009年7月1日螁版本：2009-1蒂共4页蒈1.目的：使实验室日常内务管理工作顺利进行，工作专人负责。薆2.范围：实验室相关人员膂3.负责人：王宇飞羀4.制度：膇本核酸扩增荧光检测实验室配备两名实验员，在以下描述中分别称为第一实验员和第二实验员。实验室每周二安排做HBV-DNA、TB项目检测（定性），周五进行实验室的卫生清洁、离心管、吸头的高压灭菌及仪器的维护保养等工作。蚅4.1标本接收区内务管理制度薃4.1.1设立标本接收区的主要目的：接收待检测的标本，认真填写记录，并提供咨询服务。蚂4.1.2每天工作开始前，第二实