Agilent-HPLC讲座20140107

AgilentTechnologiesHPLC日常维护&故障诊断安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部内容简介1.简单介绍2.在线脱气机(G1322/G1379)3.四元／二元/单元泵(G1311/G1312/G1310)4.手动／自动进样器(G1328/G1313/G1329)5.二极管阵列和紫外检测器(G1315/G4212)6.其它检测器检测（G1314)2简单介绍1堆放方式2仪器背面管线连接3不同厂家接头4不同颜色管线31220126012901100和1200堆放方式4典型LC1260的堆放方式5脱气机溶剂柜泵自动进样器柱温箱检测器优化流路减小死体积流路自上而下仪器背面连线每个模块有独立的电源LC1260各模块(脱气机除外)均由CAN线连接检测器与化学工作站之间用网线(LAN线)连接脱气机与泵之间用遥控线连接(错误信号输出)6网卡CAN线遥控线外设板管线接头7Agilent系统的所有连接口都与Swagelok兼容例外：手动进样阀的连接口G1328A/B/C(Rheodyne型号7725i)与Rheodyne兼容）如果接头过长，则可能漏液不能完全密合混合腔如果接头过短，则有死体积存在，相当于一个混合腔，导致色谱峰形变差0.090in.0.130in.0.090in.0.170in.SwagelokWatersParkerRheodyneValcoUptight0.090in.0.080in.2.3mm4.3mmAgilentLC毛细管的颜色8在线真空脱气机微量真空脱气机：G1379B/A标准真空脱气机：G1322A四元泵内嵌式真空脱气机9Agilent1100/1200/1260在线脱气机日常维护,故障诊断1011G1322脱气机示意图12控制组件及压力传感器电磁阀真空泵真空室G1379脱气机示意图13工作原理14何时需要使用在线脱气机Agilent1100/1200/1260在线脱气机日常维护,故障诊断标准脱气机（G1322).标准脱气机每个通道体积为12mL，建议排液操作：5mL/min排液10min以上。微脱气机（G1379).微脱每个通道体积为1mL，建议排液操作：3mL/min排液5min。谨慎用5mL/min流速去排液，切勿用注射器用力抽。集成脱气机(G1311内集成)每个通道体积为1.5mL，建议排液操作3mL/min15Agilent1100/1200/1260在线脱气机日常维护,故障诊断16使用在线脱气注意事项溶剂棕色玻璃瓶可以减缓藻类的生长。经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。避免使用下述可腐蚀钢铁的溶剂：碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)。低浓度无机酸，如硝酸、硫酸.可能含有过氧化物的色谱醇醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)。这些在使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物。含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。Agilent1100/1200/1260在线脱气机日常维护,故障诊断17防止堵塞溶剂过滤器污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH4至7)中表现更为突出。下列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。1使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长。2使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓冲液建议不超过两天。3如果应用许可，在溶剂中加人0.0001－0.001M的叠氮化钠。4避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。5用氩气或氦气置换流动相上层的空气。Agilent1100/1200/1260在线脱气机日常维护,故障诊断18检查溶剂过滤器－拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口30cm，此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。－查看过滤器是否变色．－临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常．清洁溶剂过滤器－将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸（35％）的烧杯里浸一小时。－用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。－将过滤器重新装好。－建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统．可能会严重堵塞系统Agilent1100/1200/1260在线脱气机日常维护,故障诊断19Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？Agilent1100/1200/1260在线脱气机日常维护,故障诊断20Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？打开Purge阀，设定泵的流速2mL/min，提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。21Agilent1100/1200/1260四元泵(G1311)1100/1200四元泵1260四元泵22Agilent1100/1200/1260四元泵工作原理23Agilent1100/1200/1260二元泵工作原理24DamperPurgevalveMixerABInletvalveOutletvalveWasteInletvalveOutletvalveAgilent1100/1200/1260二元泵工作原理Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断25Agilent1100/1200泵头(PumpHead)结构图26PTFE过滤芯阀体密封金垫出口单向阀入口单向阀冲洗阀密封金垫密封金垫PTFE过滤芯:p/n01018-22707Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断27Agilent1100/1200/1260系列密封垫冲洗－SealWash(可选)l当流动相中盐浓度0.01M时，可以减小密封垫的磨损。l对于Agilent1100系列泵为可选件。l用10%异丙醇水溶液冲洗WasherSupportsealassemblySealAgilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断28如何更换溶剂出口过滤芯Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断29严重污染的溶剂出口过滤芯Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断30如何更换活塞杆密封圈Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断31多通道梯度阀（MCGV）操作要点当盐溶液和有机溶剂混合时，盐溶液可与有机溶剂完全混溶，而不会出现沉淀。但是在梯度阀的混合点，两相混合的界面可能出现微小的盐颗粒，重力作用可使盐颗粒掉下来。通常，阀的A通道用于水相/盐溶液，而泵的B通道用于有机溶剂。如果使用的是这样的配置，盐将落回到盐溶液中，并被溶解。当泵使用的不同配置（例如，B-盐溶液，A-有机溶剂）时，盐可能会落到有机溶剂中，从而出现问题。Agilent1100四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到下面的接头（A或D）上，有机溶剂接到上面的梯度阀接口（B或C）上。有机溶剂通道最好直接在盐溶液通道的上面。建议定期用水冲洗所有MCGV通道，以去除在阀口上可能出现的盐沉淀。Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断32更好地使用四元泵将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接在底部的梯度阀口上，将有机溶剂接在上面得梯度阀口上。有机相通道最好在盐溶液通道的上面。建议用水定期冲洗所有MCGV通道除去可能在阀口析出的盐结晶。操作泵之前，用至少两个体积（标准脱气机30mL，微脱气机10mL）冲洗真空脱气机,特别是当泵关闭了一段时间后（例如，过夜），以及在通道中使用挥发性混合溶剂时。防止溶剂过滤器堵塞及长菌，当虑器表面有黑色或黄色污染层说明虑器发生了堵塞，请立即清洗或更换之。定期检查排液阀的虑芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5mL/min，若压力大于10bar,则须立即更换。Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断33更好地使用泵当使用低流速时（不高于0.2mL/min）检查所有1/16英寸接头有无渗漏（用压力测试或漏液测试）。每当更换泵密封垫时排液阀虑芯也应更换。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕。有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并降低密封垫的使用寿命。应尽早更换有划痕的活塞。使用缓冲溶液时，关泵前先用水冲洗系统。当需要长时间使用0.1摩尔或更高浓度得缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件，以减少对密封垫及活塞杆的磨损。更换活塞密封垫后应按照密封垫安装步骤对其进行磨合，但磨合不适用于正相密封垫。Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10％异丙醇，并将其流速调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。10％异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。不要用其它溶剂代替。当泵头安装有冲洗附件而不使用，会使密封垫及活塞杆的寿命减短。34Agilent四元／二元/单元泵日常维护密封垫磨合操作：1.以异丙醇作为溶剂并将其管道直接连接到主动阀(四元泵需一接头，部件号0100－1847）。2.连接阻尼管（部件号5022－2159）于排液阀的出口，阻尼管的另一端置于废液瓶中。3.打开排液阀，并用异丙醇以2mL/min的流速冲洗系统10分钟。4.关闭排液阀，设置流速使压力达到350bar，并使系统在此压力下保持15分钟。5.关闭泵，缓慢打开排液阀释放压力，重新连接管路，然后冲洗系统中的异丙醇。注意，只有反相密封垫（5063－6589）才需此操作，而正相密封垫（0905－1420）因其最高只耐受200bar,所以此操作会损害它。35Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断1.更换排液阀虑芯2.清洗,更换主动阀阀芯3.清洗球形单向阀4更换密封垫，活塞杆36总结Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断37Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？2.何时应该更换Purge阀内的过滤白头？3.泵压力不正常可能由那些原因引起？Agilent四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断38Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？设定泵使用一个单独通路（A），打开Purge阀，流速5mL/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，观察这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。2.何时应该更换Purge阀内的过滤白头？使用纯水作流动相，打开Purge阀，流速5mL/min，观察系统压力，如果超过10bar，应该更换。3.泵压力不正常可能由那些原因引起？气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用比例阀混合时盐浓度太高39Agilent1100/1200/1260自动进样器(G1313/G1329)40Agilent1100/1200/1260自动进样器结构41Agilent1100/1200/1260自动进样器工作原理41计量泵六通阀(旁路位置)Bypass定量环来自泵系统至废液口计量泵活塞杆回归零位针座毛细管去往色谱柱去往色谱柱来自泵系统计量泵抽取样品六通阀(旁路位置)Bypass来自泵系统去往色谱柱六通阀(主路位置)Mainpass1.六通阀切换到旁路位置2.计量泵活塞杆回归零位3.抬起进样针4.将样品抓至针座上5.针扎入样品瓶6.计量泵抽取样品7.针从样品瓶中拔出8.将样品瓶抓离针座9.针扎入针座毛细管10.六通阀切换到主路位置11.将样品瓶放回样品盘42Agilent1100/1200/1260自动进样器使用须知43Agilent1100/1200/1260自动进样器使