液相色谱仪日常维护

日常分析的注意点1：液相系统维护流程图吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器手动进样器检测器日常维护材料：不锈钢烧结，孔径10um故障：堵塞表现：管路中不断有气泡生成措施：用5％～20％的稀硝酸，超声波清洗，再用蒸馏水清洗注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断吸滤头日常维护单向阀LC-10ATvp泵：串联式往复泵LC-10ADvp泵：并联式往复泵日常维护单向阀结构抛光面透明塑料垫片宝石球吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头流动相单向阀原理吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头日常维护故障1：宝石球粘附于垫片表现：泵无法吸液或排液，流路不通措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，使宝石球与垫片分开2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗单向阀日常维护故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗单向阀日常维护故障：密封圈磨损而导致密封不良现象：系统压力波动大或漏夜措施：更换密封圈注意点：更换密封圈拆卸泵头前，柱塞杆复位（P－SET）柱塞密封圈流动相泵头清洗管路柱塞杆密封圈日常维护故障：堵塞现象：系统压力波动大或压力偏高措施：5％稀硝酸，超声波清洗判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速1mL/min，如压力3kgf/cm2，则可能堵塞。线路过滤器排液阀压力传感器线路过滤器流动相日常维护紫外检测器参比池样品池光线光电倍增管日常维护故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPLEN和REFEN，如两者相差较大，则样品池受污。措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重，拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。紫外检测器日常维护更换氘灯（紫外检测器）•判断氘灯能量：设定220nm波长，检查参比池能量，如能量低于800，需更换氘灯。•操作注意点：不要用手直接接触氘灯表面2：手动进样器的样品注入日常维护操作注意点：1）插针应插到底2）进样应使用液相色谱专用平头进样针3）清洗应使用专用针口清洗器手动进样器定子转子塑料箍弹簧不锈钢套3：有机溶剂的优与劣什么时候需要“HPLC”级有机溶剂1.等浓度洗脱法的微量分析用光谱进行判断2.梯度洗脱法分析3.1等浓度洗脱法的微量分析优级噪声噪声目的成分目的成分HPLC级优级HPLC级测试波长上的噪声水平与流动相的吸光度成正比乙腈3.2梯度洗脱法分析需要“HPLC”级有机溶剂理由：即使没有注入被测样品，因流动相的不纯物质，造成出峰。梯度洗脱法的注意点•1.流动相使用HPLC级有机溶剂。•2.查看空白实验的数据。•3.遵守分析周期。（最初的分析数据不采用）4:谈谈缓冲液4:谈谈缓冲液•选择缓冲液的步骤1.确定最佳分离状态时的流动相pH2.选择具有与流动相的pH相近的pKa的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）3.确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）代表性弱酸的pKapK1pK2pK3醋酸4.87柠檬酸3.134.766.40磷酸2.167.2112.325:关于脱气脱气的目的1.防止由气泡的产生引起的故障2.防止由溶解（在液体中的）气体量的变动引起的检测不稳定程度1）示差折射率检测器*使折射率变化2）UV检测器（200nm以下）*溶解氧气有吸收3）荧光检测器*溶解氧气有消光作用脱气的方法1.吸气器法*可以抑制制做流动相时产生的气泡*只是暂时的脱气法*不能解决因溶解气体造成的问题2.He清除法3.使用氟树脂膜的减压脱气法He清除法调压阀排气阀往送液泵流动相过滤器使用氟树脂膜的减压脱气法氟树脂膜真空室往送液泵真空泵控制器流动相6:予处理柱和防护柱予处理柱和防护柱的位置予处理柱防护柱泵进样器分析柱予处理柱的作用•用于免除流动相的影响例如1.在离子色谱分析中，免除多价离子的不良影响。2.在梯度洗脱分析中，使鬼峰后移，不影响目的成分的分析。3.防止硅胶载体的溶解。（使用碱性或含有胺的流动相时）防护柱的作用•代替分析柱捕集样品中的杂质，容易更换，降低成本。7:关于ODS柱补修峰的变形根部变宽有肩或分叉峰产生有肩或分叉的原因1.柱子劣化（进口处产生不均匀的空隙）2.样品劣化（生成氧化物、分解物等）判断标准所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化柱的补修用分析时的两倍流量定量送液填料的取出容器甲醇送液未污染的部分恢复例柱修补后