液相色谱维护基础知识

11ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited第四部分维护基础知识22ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited日常维护目的：维持仪器处于正常运作状态，有效的降低仪器发生故障的频率，延长仪器的使用寿命。准备工作：使用&维护日志设备的耗材和备件维护工具盒试剂（甲醇、异丙醇、稀硝酸等）超声波清洗机33ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited液相系统维护流程图吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器手动进样器检测器色谱柱44ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited输液系统日常维护部件排液阀吸滤头线路过滤器柱塞清洗流路密封圈保险丝主进口单向阀辅助进口单向阀柱塞密封圈55ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited管线选择材料不锈钢特氟隆(Teflon)聚醚醚酮(PEEK)尺寸不锈钢材质管路PEEK材质管路0.1mmI.D.x1.6mmO.D.0.3mmI.D.x1.6mmO.D.0.5mmI.D.x1.6mmO.D.0.8mmI.D.x1.6mmO.D.0.13mmI.D.x1.6mmO.D.0.25mmI.D.x1.6mmO.D.66ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited管线材料不锈钢(可用于所有连接)能承受几百MPa压力酸性或高浓度盐环境中易腐蚀(尤其在pH小于2时)PEEK(可用于所有连接)能承受高达25MPa压力可在整个pH范围(pH1-14)内使用不适用高溶解性溶剂如三氯甲烷、四氢呋喃等Teflon(用于柱后阻尼管、反应管和排液管)化学惰性大仅能承受0.5MPa压力77ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited接头不锈钢接头/垫圈主要用于输液泵、进样器的管路连接能承受40MPa以上的压力一旦固定，垫圈不可再动PEEK接头主要用于色谱柱、检测器的管路连接易于安装能承受25MPa的压力容易产生死体积不锈钢接头垫圈PEEK接头88ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited死体积产生原因：由于管路连接不好产生的额外体积死体积可能会引起分离度下降和重现性变差等问题好的连接差的连接管线公螺母死体积色谱柱99ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited吸滤头材料：不锈钢烧结(或陶瓷），孔径10μm功能：防止较大固体不溶物进入液相色谱系统日常维护：定期使用异丙醇（或5％稀硝酸）清洗故障：吸滤头堵塞现象：管路中不断有气泡生成措施：用异丙醇（或5％稀硝酸）浸泡并进行超声波浴清洗，再用蒸馏水清洗至中性1010ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.LimitedLC-20ATLC-20AT选配件支架压力传感器泵头辅助进口单向阀主进口单向阀泵头固定座1111ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.LimitedLC-20AD选配件支架进口单向阀出口单向阀进液口泵头固定座泵头压力传感器LC-20AD1212ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited单向阀结构请不要分解阀心A和阀心B重新组装后性能不被保证，输液可能不稳定注意：1313ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited单向阀故障处理故障：宝石球或球座受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：1）打开排液阀，用泵输送或用注射针打入异丙醇进行清洗2）拆下单向阀，放入异丙醇中，超声波浴清洗注意：超声波清洗时开口端向上放置。1515ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited柱塞密封圈柱塞密封圈LC-20ADLC-20ABLC-10ADvp部件号228-35146柱塞密封圈LC-20ATLC-10ATvp部件号：228-35145取下和安装柱塞密封圈工具1616ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited柱塞密封圈故障处理故障：密封圈磨损导致密封不良现象：系统压力波动大或漏液措施：更换密封圈注意：拆卸泵头前，必须将柱塞杆复位（仪器面板上的P-SET界面）流动相泵头清洗管路柱塞杆密封圈1717ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited线路过滤器故障：堵塞现象：系统压力偏高判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速1mL/min，如压力0.3MPa，可以判定为线路过滤器堵塞。措施：以异丙醇(或5％稀硝酸)为清洗剂，超声波浴清洗。再用水洗至中性。排液阀压力传感器线路过滤器流动相1818ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited过滤器的更换旧过滤器的取出新过滤器的安装如果清洗无法解决故障，需要更换线路过滤器。1919ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited混合器混合器不同体积的连接方法2020ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited混合器故障处理常见故障：堵塞混合器堵塞往往是由于混合器过滤组件堵塞引起的。处理方法：按图中结构卸下过滤组件，5%稀硝酸或其他溶剂超声波浴清洗或更换新的组件标准或半微量混合器用部件号：228-18872-932121ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited检查/维护项目6个月1年2年3年备注更换柱塞密封圈×清洗并检查（更换）柱塞×更换清洗流路密封圈×检查（更换）辅助进口单向阀并做超声波浴清洗×检查（更换）主进口单向阀并做超声波浴清洗×检查（更换）并清洗线路过滤器×检查（更换）并清洗吸滤头×更换排液阀×泵组件润滑×请咨询岛津各办事处维修部保险丝更换×LC-20AT各部件定期检查和维护清单2222ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited检查/维护项目6个月1年2年3年备注更换柱塞密封圈×清洗并检查（更换）柱塞×检查（更换）膜片×更换柱塞时同时更换检查（更换）出口单向阀并做超声波浴清洗×检查（更换）进口单向阀并做超声波浴清洗×检查（更换）并清洗线路过滤器×检查（更换）并清洗吸滤头×更换排液阀×泵组件润滑×请咨询岛津各办事处维修部保险丝更换×LC-20AD各部件定期检查和维护清单2323ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited手动进样器2424ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited手动进样器操作注意事项定子转子针头密封垫弹簧不锈钢套1.进样请使用液相色谱专用平头进样针2.进样时，进样针应插入针导管到底3.清洗请使用专用进样口清洗器4.样品溶液pH小于10,常用密封垫的Vespel材质（适用pH10）,否则换Tefzel或PEEK材质的密封垫（pH0-14）5.不使用手动进样器时将针头留在进样器内2525ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited手动进样器维护要点1.将附件进样口清洗器装在注射器上2.用注射器吸入清洗液(试样溶液或者不含盐的流动相等)3.在进样（INJECT）状态下，将进样口清洗器压接在针导管上，注入清洗液约1mL4.使用缓冲溶液后，用纯化水清洗流路和针导管5.不能使用微型注射器清洗手动进样器6.请缓慢推压注射器，以免引起清洗液反喷进样口清洗器手柄组件针导管针管2727ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited检查/维护项目1年2年3年6年备注更换针管密封圈×在大约40000次进样后更换更换柱塞密封圈×更换计量泵柱塞×更换低压阀转子×在大约60000次进样后更换更换低压阀定子×更换高压阀转子×在大约100000次进样后更换更换高压阀定子×更换定量环×在大约40000次进样后更换清洗并检查（更换）溶剂过滤器×针管更换×在大约40000次进样后更换保险丝更换×面板更换（仅适用于SIL-20AC）如果样品冷却器存在过的冷凝则更换润滑油×请咨询岛津各办事处维修部清洗泵×6年后更换（大约700000秒）自动进样器各部件定期检查和维护清单2828ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited思考题现象：在分析样品过程中，系统压力不断升高。问题：如何确认压力升高的原因？如果确认是由色谱柱引起的压力升高，应如何处理？在实验过程中，如何避免这种情况出现？故障根源的确认：分段排除法2929ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited色谱柱常见故障分类柱压过高不同色谱柱有差异不同系统有差异不同色谱条件有差异柱效低重复性差回收率低甚至不出峰3030ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited柱压过高解决方法1.正向冲洗色谱柱2.反向冲洗色谱柱3.超声清洗色谱柱筛板日常使用注意点1.过滤流动相和样品2.恰当的样品前处理方法3.使用保护柱4.注意冲洗系统原因微粒堵塞不可逆吸附细菌生长3131ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited柱效低解决方法1.正向冲洗色谱柱2.反向冲洗色谱柱3.超声清洗色谱柱筛板4.柱内死体积增加，需更换新柱日常使用注意点1.定期冲洗色谱柱2.防止机械震动和柱压急剧变化3.关注色谱柱柱效变化原因色谱柱被污染筛板堵塞柱内死体积增加3232ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited例子：溶解样品的溶剂选择不当建议使用流动相溶解样品，不要选择高溶解性的试剂甲醇作为溶剂20uLCaffeine乙醇作为溶剂20uLCaffeine乙醇作为溶剂10uLCaffeine注意：方法开发阶段，请选择合适的进样量3333ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited色谱柱的使用注意点购买新柱后请务必仔细阅读说明书，确认柱的使用条件以及清洗再生步骤。按照说明书条件测试色谱柱柱效，保留所得色谱图，记录使用压力定期检测柱压和柱效不同流动相之间转换时应注意溶剂的互溶性确认样品在流动相中有好的溶解度；进样前请使用0.45μm或0.2μm的一次性滤膜过滤样品，或者进行其他前处理为了延长色谱柱使用寿命，请使用保护柱。定期用合适的溶剂（说明书推荐的溶剂）清洗或再生色谱柱长期不用色谱柱时，应在彻底清洗后使用说明书中指明的溶剂保存柱子。然后从仪器上卸下色谱柱，用堵头密封保存定期用合适的流动相清洗保存的柱子，避免干涸3434ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited紫外检测器3535ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited紫外检测器参比池样品池光线硅光电池板3636ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited检测器基线异常基线噪音异常大