GB_4789.4沙门氏菌检验

沙门氏菌检验马群飞福建省疾病预防控制中心GB4789.4－2010食品安全国家标准食品微生物学检验PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建－－20102010沙门氏菌检验沙门氏菌检验本标准代替GB/T4789.4－2008《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》。本标准与GB/T4789.4-2008相比，主要变化如下：——修改了标准的中英文名称；——修改了标准的范围；——修改了培养基和试剂；——修改了设备和材料；——修改了附录A。PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建－－20102010沙门氏菌检验沙门氏菌检验本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准所代替的历次版本发布情况为：——GB4789.4-84、GB4789.4-1994、GB/T4789.4-2003、GB/T4789.4-2008。PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建修订内容–前增菌–选择性增菌–分离平板–生化鉴定–血清学鉴定–报告主要内容主要内容PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建分类•肠道细菌•革兰氏染色阴性•兼性厌氧•葡萄糖发酵•2～3µm有鞭毛短杆菌PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建人类沙门氏菌感染的临床类型主要有三类：1.伤寒型：由伤寒、副伤寒沙门氏菌引起；PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建……2.败血症型：最常由猪霍乱、鼠伤寒和肠炎沙门氏菌引起；……PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建……3.胃肠炎型：主要由沙门氏菌I的各种血清型引起，最常见的是沙门氏菌食物中毒和感染性腹泻，是由于沙门氏菌在食品中大量繁殖，侵入肠道后继续繁殖并释放出大量肠毒素，引起剧烈的胃肠炎。PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建版本是随着检测技术的发展，对于沙门氏菌的快速检测方法层出不穷，有些方法已通过国际权威机构认证（如AOAC）成为了国际标准方法。为了更加快速准确检验而修订的。随着食品安全法出台后，对于饰品检验很标准有了更新的要求，2010年1月份在北京，进行了专家审定会。必要性必要性PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建修订任务由卫生部全国食品卫生标准委员会下达，由微生物标准协作组具体实施。2.兄弟单位、企业、公司为参与单位。任务来源任务来源PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建结合目前的国际标准和原标准的实际使用情况，遵循以下的修订原则：1．以原国标为基础，保持与原标准的连续性；2．参照AOAC、国际标准组织（ISO）及美国食品药品管理局（FDA）的有关标准；3．结合食品安全法的要求。修订原则修订原则PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建－－20102010沙门氏菌沙门氏菌检验流程检验流程PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建样品（20类）25g225mL乳糖肉汤（LB）or胰酪胨大豆肉汤（TSB）or煌绿溶液（BG）or通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or再造脱脂奶粉or四硫酸盐煌绿（TT）pH6.8±0.224±2h35℃RVTT43±0.2℃or35±2.0℃24±2h24±2h42±0.2℃BS&XLD&HE24±2h35℃TSI&LIA非沙门氏菌沙门氏菌非沙门氏菌LIA+LIA－TSIK/ALIA－TSIA/A尿素酶，H抗原（多价H抗血清或Spicer-Edwardsflagellar(H)test），赖氨酸脱羧酶，酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN，丙二酸盐，吲哚），O抗原酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐（API20E,EnterotubeII,EnterobacteriaceaeII,MICRO-ID,orVitekGNI）+O抗原&H抗原细菌学分析手册（FDA/BAM）PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建样品BPWorBPW（含结晶紫）35±1℃20-24hBGS&DMLIAorXLT442±0.5℃22~24h0.5±0.05mL＋10mLTT0.1±0.02mL＋10mLmRV42±0.5℃22~24h35±1℃18~24h&48hTSI&LIA血清学试验商业生化试剂盒或自动鉴定系统or传统生化鉴定报告结果PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建－967.28处理样品沙门氏菌1mL+10mLSC1mL+10mLTT35℃24±2hXLD&HE&BS35℃24±2h（BS24h&48h）35℃24±2hTSI&LIA35℃24±2h纯培养物不纯培养物纯培养物MACorXLDorHE尿素酶－尿素酶＋非沙门氏菌H抗原，LIA，酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN，丙二酸盐，吲哚），O抗原非沙门菌补充生化试验酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐非沙门菌食品中沙门氏菌检验方法食品中沙门氏菌检验方法PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建℃or37℃16~20h0.1mL+10mLRV10mL+100mLSC42℃24h35℃or37℃24h,48h酚红煌绿琼脂（亮绿琼脂）&第二种选择性平板35℃or37℃20~24h无典型菌落再培养18～24h典型菌落（pinkred）营养琼脂纯化可疑菌落35℃or37℃18~24hTSI，尿素酶，赖氨酸脱羧酶，ONPG，VP，吲哚血清学试验（O抗原，Vi抗原，H抗原）报告结果送参考实验室分型ISO6579:1993(E)微生物－沙门氏菌检测的通用方法PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建、修改了标准的中英文名称；2、修改了标准的范围；3、修改了培养基和试剂；4、修改了设备和材料；5、修改了附录A。沙门氏菌检验沙门氏菌检验PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建文件使用pdfFactoryPro试用版本创建修订的主要内容修订的主要内容——修改了标准的中英文名称；——修改了标准的范围；——修改了培养基和试剂；——修改了设备和材料；——修改了附录A。PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建范围本标准规定了食品中沙门氏菌（Salmonella）的检验方法。本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。修改了标准的范围PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建全自动微生物生化鉴定系统。修改了培养基修改了培养基和试剂和试剂PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建沙门氏菌属显色培养基。3.18生化鉴定试剂盒。修改了培养基和试剂修改了培养基和试剂修改了附录修改了附录AAPDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建多价菌体抗原（O）鉴定5.5.3多价鞭毛抗原（H）鉴定5.5.4血清学分型（选做项目）PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建（mL）样品放入盛有225mLBPW的无菌均质杯中，以8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或置于盛有225mLBPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。……PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建前增菌前增菌……若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH值，用1mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2。无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8h～18h。如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃～5℃不超过18h解冻。PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建沙门氏菌前增菌培养基沙门氏菌前增菌培养基缓冲蛋白胨水(BPW)肉汤：是基础增菌培养基，不含任何抑制成分，有利于受损伤的沙门氏菌复苏。使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。2003版本标准仅用于加工食品或冷冻食品的前增菌。PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建增菌增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL，转种于10mLTTB内，于42℃±1℃培养18h～24h。同时，另取1mL，转种于10mLSC内，于36℃±1℃培养18h～24h。PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建、SC2003版本国标还有MMAOAC：TT、SCFDA：RV、TTISO：RV、SC选择性增菌的目的是最大可能的检出沙门氏菌，原则上必须使用两种选择性分离增菌液，一种是抑制除沙门氏菌以外其肠道菌的生长，一种是在不影响其他肠道菌生长的情况下