24小时尿液成石危险因素(讲课)(1)(1)

欧莉莉分析方法24小时尿液成石危险因素2011广州医学院第一附属医院广东省泌尿外科重点实验室尿磷、尿尿酸、尿肌酐1.尿钙、尿镁、尿钠、尿钾3.尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室4.尿胱氨酸尿标本的留取、处理泌尿外科省重点实验室尿标本留取泌尿外科省重点实验室时间第一天晨起的第一次尿不要，开始计时。之后的尿都留在指定容器（由医院提供）里，直到第二天早上同一时间（24h）的尿。收集完成后，尽快送检。留取方法男性：直接排到容器中。如果不能，方法同女患者。女性：患者应准备一个干净的尿盆。每一次排尿时，将尿完全排入晾干的尿盆内，然后再将尿全部倒入指定的容器中。自来水充分洗净尿盆，晾干，准备下次使用。保存剂10ml甲苯，第一次小便后倒入。尿保存剂泌尿外科省重点实验室甲苯可在尿标本表面形成一层薄膜，阻止尿中化学成分与空气接触。常用于尿糖、尿蛋白等化学成分的定性或定量检查。浓盐酸用于定量测定尿17-羟、17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺等标本。浓酸会使尿中尿酸形成结晶。尿标本留取泌尿外科省重点实验室注意事项1.留尿期间需正常饮食。2.如需做造影，则当天不能留取标本；B超禁食者，也建议暂缓留取标本。3.手术前任何时候，在正常饮食情况下留取标本。如患者体内留置尿管，则建议于拔管后留取标本。4.血尿不能留取标本，待无肉眼血尿后再留取。5.如果患者术后想做24小时尿检查，应待患者正常饮食、无上述留尿禁忌后，才留尿。6.尿液留取不当，患者应告知检验人员。或检验人员怀疑尿液留取不当，应询问患者。7.留尿期间，尿桶盖必须盖严。标本处理：1.不开盖，把24h尿桶内的尿混匀。2.用吸管把混匀后的尿吸出10ml，分别装入2支试管。送检验科的试管装4ml，实验室留6ml。加盖室温保存。此处需注意的是，吸管必需穿过甲苯液层吸取尿液。3.把余下的尿倒入2L量筒内，读数，记录患者24h尿量。4.分装后的标本应及时检测。5.送检验科检测时，需在申请单上注明患者24h尿量。同时实验室也应保存此记录，用于实验室结果的计算。泌尿外科省重点实验室24h尿标本处理尿钙、尿镁、尿钠、尿钾泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁、尿钠、尿钾离子选择电极法（ISE）电位测量电路的一侧为测量电极(即离子选择电极),另一侧为参比电极，当被选择离子与ISE电极膜接触反应时，电位计电路中的电动势立即发生变化，产生电位差。电位差的大小，与溶液中离子活度呈正比。测定钠、钾、钙，暂时无镁的测定。泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁离子选择电极法优点：检验科常用方法，仪器比较简单，轻便，较易用于流动监测和自动化检测，适合大批量的标本检测。电极直接响应的是离子活度，不是浓度，故对生物，医学，化学更适合。缺点：损耗大，一种电极只能测定一种离子。泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁离子选择电极法泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁、尿钠、尿钾原子吸收分光光度计法（乙炔-空气火焰法）火焰光度分析是一种发射光谱分析法，是测定被测离子的发射光强度(这点正好与比色法相反；比色法是测定被测物质对光的吸收强度)。样品中的钾、钠、钙、镁离子接受火焰的热能而被激发处于激发态。激发态的离子不稳定，立即发射出特定波长的光线，迅速回到基态。发射光强度与样品中钾、钠、钙、镁离子的浓度呈正比关系。泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁、尿钠、尿钾泌尿外科省重点实验室注意事项稀释时，因稀释倍数较大，必须保证稀释准确。注意乙炔气瓶压力，及时更换气瓶。保持管路流畅。尿钙、尿镁原子吸收分光光度计法优点：检测限低，能测出ppm级。1ppm=1mg/kg=1mg/L是钙、镁、钠、钾测定的参考方法。多用于科学研究。检测快速，仅需10s出结果。泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁原子吸收分光光度计法缺点：尿中钠、钾含量均为g/L，故需稀释1000倍，稀释过程容易造成一定误差。每天检测前均需重新制定标准曲线，操作相对繁琐。仅能检测金属离子。并且仅在配有专用的金属离子元素灯情况下，才可检测。每测定一种元素前，需切换元素灯及预热20分钟以上。检测时间短，预热时间长。泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁化学滴定法尿钙：钙离子与钙指示剂结合成淡红色化合物，加入EDTA时，可与钙离子结合成不溶性之络合物，而使钙指示剂游离，在碱性溶液中，呈蓝绿色。尿镁：在pH10碱性溶液中，镁、钙与铬黑T指示剂结合成红色化合物，EDTA能与镁、钙结合成不溶性络合物，而使铬黑T游离而呈现蓝绿色，进行滴定。减去钙滴定读数，计算镁的含量。泌尿外科省重点实验室尿钙、尿镁化学滴定法优点：需要的设备简单，可不配备仪器操作，基层医院可进行检测。缺点：肉眼判断误差大，专门仪器读取结果相对较好。滴定管量程大，造成误差大。泌尿外科省重点实验室尿磷、尿尿酸、尿肌酐泌尿外科省重点实验室尿磷化学法尿磷：无蛋白样本中磷酸根与钼酸铵在酸性条件下合成磷钼酸，再以氢化亚锡还原成钼兰，比色测定，在5-120min内显色稳定。注意事项：试剂使用前需预先室温放置。仪器需预热后才能测定。泌尿外科省重点实验室尿尿酸化学法尿尿酸：去蛋白尿液，在碱性条件下能还原磷钨酸生成蓝色化合物，比色测定。注意事项：试剂使用前需预先室温放置。仪器需预热后才能测定。显色稳定性一般，标本多要分批进行检查。泌尿外科省重点实验室尿肌酐化学法尿肌酐：去蛋白样品中，肌酐与苦味酸在碱性溶液中反应，生成黄红色苦味酸肌酐，用以比色测定。注意事项：试剂使用前需预先室温放置。仪器需预热。显色稳定性差，需做完一个再添加试剂做下一个。严格执行30秒上机检测。泌尿外科省重点实验室半自动生化分析仪仪器小、占地少。用于小批量标本检测，适用于实验室、基层医院。有配套的试剂盒，无需自己配液，按说明书操作即可。实验操作方法见材料。泌尿外科省重点实验室半自动生化分析仪尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸离子色谱法（Ic）借助离子在离子交换柱上，迁移率的差异，而进行离子分离的一种离子定量的分析技术。泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸离子色谱法（Ic）流动相——我们配的液体固定相——分离柱上的填充物泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室分离柱检测的重要组成部分之一。柱子越长，分离效果越好，但所需时间也会越长。尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室色谱分离尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室色谱分离尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室尿液标本泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室保护分离柱的三件套：保护柱C18注射器注射器滤头尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室保护柱、C18注射器、注射器滤头因分离柱昂贵、寿命受检测标本影响大。使用此3项，目的均为阻隔大分子物质进入分离柱，起到保护分离柱、延长分离柱寿命的作用。尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室连续自动再生柱抑制器三根高容量、长寿命和易操作的微填充抑制柱。一根在流路工作一根用硫酸再生一根用水冲洗尿草酸、尿枸橼酸离子色谱法（Ic）当注入欲分离的样品时，流经进样器贮液器的流动相将样品同时带入色谱柱进行分离，然后依先后顺序进入检测器，记录仪将检测器送出的信号记录下来，由此得到液相色谱图。泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸泌尿外科省重点实验室阴离子分离柱：用于化学抑制测量阴离子。柱大小：150X4.6mm尿草酸、尿枸橼酸实验操作1.尿标本用纯水稀释20倍。2.启动检测程序后，把稀释后的样本倒入C18注射器内，加20μl的滤头，注射入仪器的加样孔内。3.进行检测。4.若结果不理想，排除仪器及配件干扰后，重测标本。5.硫酸峰影响过大，建议重新留取标本再测。泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸注意事项1.开机后、关机前，均需用淋洗液冲洗仪器30分钟以上。2.检查压力，若压力过高，则需冲洗保护柱、分离柱，寻找原因。3.检查所有配液是否足量，切勿造成空吸。4.新配制的淋洗液必须加入过滤器内过滤方可使用。5.加样需使用有C18过滤柱的注射器，且注射器必须加滤膜。泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸6.抑制器使用过久，致电导升高，需立即切换抑制器。如在做样品，则需等样品测定完一次后重新测定。不能在测定中途停机并立即测定下一次，否则影响结果。7.C18注射器使用后，需用高效液相纯的甲醇润洗（即再生），再用纯水冲洗3次，自然风干待下次使用。泌尿外科省重点实验室尿草酸、尿枸橼酸离子色谱法优点：前处理简单，检测限量低，达到(0.01-0.1)×10-6。检测速度快，准确性高，干扰少，重复性好。缺点：某些样本草酸受硫酸峰的影响大；配件昂贵：分离柱：1.5-2.3万RMB保护柱：3000-4000RMBC18注射器：1000RMB（30-50个）