抑制素B对精子发生障碍的诊断参考价值·综述·

窑窑窑窑国际生殖健康/计划生育杂志2009年11月第28卷第6期JIntReprodHealth蛐FamPlan，November2009熏Vol.28熏No.6抑制素B(INHB)是转化生长因子β超家族成员之一，属于糖蛋白激素；由α和βB两个亚单位通过二硫键相连组成异二聚体(α-βB)，仅二聚体才有生物学活性。男性体内INHB绝大部分源于睾丸。成年男性，INHB的α亚单位由支持细胞（Sertoli细胞）产生，βB亚单位大部分由从粗线期精母细胞到早期精子细胞的生精细胞产生或间质细胞（Leydig细胞）产生，电子显微镜证实其组装过程大部分在生精细胞内完成，而后释放到循环和精浆并随精液排出。此外，肾上腺皮质细胞、肾上腺腺瘤、前列腺也有分泌少量INHB的能力。INHB主要生理功能与分泌调控INHB既是内分泌激素，也兼有自分泌和旁分泌作用，通过其受体发挥作用。目前，已经在垂体促性腺激素细胞及睾丸间质细胞和支持细胞发现INHB的特异受体。认为抑制素结合蛋白(INHBP)和Ⅲ型转化生长因子β受体(TGFβRⅢ)是INHB受体[1]。INHB主要有以下功能：①通过拮抗Ⅱ型受体(typeⅡreceptors)调节活化素的生理功能[2]。但仅在活化素反应的情况下具有活性。②调控与反映支持细胞功能，作为监测睾丸功能及评估精子发生的指标之一[3-4]。③参与垂体功能的调节。从青春期开始血清INHB与卵泡刺激素（FSH）形成稳定的负反馈调控关系，而且在精曲小管功能正常情况下是主要的来自性腺的调节因素[5]。血清INHB水平有明显昼夜节律：早上最高，下午晚些时候最低，夜间逐渐上升或有下降趋势；但没有季节性的变化。血清INHB在男性胎儿期就可以检测到，出生后15个月后达到高峰，反映该阶段Sertoli细胞的增殖。然后缓慢下降，至6岁左右降至最低点，随后再随年龄上升，在青春期前后达到又一高峰。但低抑制素B对精子发生障碍的诊断参考价值蔡文娟综述谷翊群审校【摘要】抑制素B是睾丸分泌的一种糖蛋白激素，受垂体卵泡刺激素(FSH)特异调控，具有昼夜分泌节律性并随年龄增加而变化。成年男性抑制素B几乎全部来自于睾丸，且其组装过程大部分在生精细胞内完成，而后释放到循环和精浆，因此血清和精浆抑制素B水平与精子发生同步。由于使用高特异性抗体，酶联免疫吸附法（双抗体夹心ELISA法）可精确测定具有生物活性的抑制素B，满足科研和临床的需要。抑制素B的浓度在精子发生障碍时会出现变化，通过测定其浓度可对精子发生状态作出评估，在鉴别梗阻性与非梗阻性无精子症方面也具有较高的特异性与敏感性。【关键词】抑制素B；精子发生；卵泡刺激素；无精子症ApplicationValueofInhibinBLevelsinDiagnosisofSpermatogeneticMalfunctionCAIWen-juan，GUYi-qun.GraduateSchoolofPekingUnionMedicalCollege，Beijing100730，China（CAIWen-juan）；DepartmentofMaleClinicResearch，NationalResearchInstituteforFamilyPlanning，Beijing100081，China（GUYi-qun）【Abstract】InhibinBisoneofglycoproteinhormonessecretedbytestisandregulatedspecificallybyfolliclestimulatinghormonefrompituitary.Itssecretionhascircadianrhythmanditchangeswithaging.InhibinBinmaleadultalmostderivesfromtestisanditsassembleprocessismostlyfinishedinthespermatogeniccells.Thenitisreleasedtothecirculationandseminalplasma.Asaresult，thelevelsofinhibinBintheserumandseminalplasmaaresynchronizedtospermatogenesis.Enzymelinkedimmunosorbentassay（Double-antibodySandwichMethodofELISA）candeterminepreciselybiologicalactiveinhibinBduetotheuseofthehighspecificantibody，whichcouldmeettheneedsofscientificresearchandclinicaldiagnosis.TheconcentrationofinhibinBchangeswithspermatogeneticmalfunction.Therefore，spermatogenesisstatuscanbeassessedbymeasurementofinhibinBconcentration.Ithashighersensitivityandspecificityindifferentialobstructiveandnon-obstructiveazoospermia.【Keywords】InhibinB；Spermatogenesis；Folliclestimulatinghormone；Azoospermia渊允陨灶贼砸藻责则燥凿匀藻葬造贼澡蛐云葬皂孕造葬灶袁2009，28：362-364冤作者单位：100081北京，国家人口计生委科学技术研究所男性临床研究室（蔡文娟：北京协和医学院研究生院在读）·综述·362窑窑窑窑国际生殖健康/计划生育杂志2009年11月第28卷第6期JIntReprodHealth蛐FamPlan，November2009熏Vol.28熏No.6于出生15个月后的高峰值，并保持相对稳定。成年至老年期则呈现缓慢下降趋势[6]。青春期INHB的逐渐增长起初是由于FSH的刺激，而后是由于FSH和生精的刺激。成年男性，INHB的产生依赖于FSH和生精状态，间质细胞、支持细胞及生精细胞参与旁调节。因此，INHB和睾丸体积和精子计数呈正相关。分子实验证实，INHB受白细胞介素1α（IL鄄1α）、FSH/环磷酸腺苷（cAMP）的调控，前者下调INHB，后者促进INHB的分泌[7]。INHB的α亚单位的糖基化作用也会导致其生物活性的下降。INHB的检测方法临床上检测血清或精浆中INHB的方法有放射免疫分析（RIA）法和酶联免疫吸附法（双抗体夹心ELISA法）。由于RIA法不能区分INHA与INHB以及无活性的抑制素，因此实验结果无从分析。ELISA法使用一对高度特异的抗体，仅与有功能的INHB分子特异性结合。其检测原理是用微孔包被的βB亚单位的单克隆抗体捕获抗原，再与检测抗体（与酶耦联的α亚单位的特异性单克隆抗体）结合并显色；虽然与INHA会有0.5%的交叉反应[8]，其特异性与敏感性完全能够满足科研和临床检测需要。新的βB亚单位单克隆抗体46A/F使INHB的检测更加简化和灵敏，但尚未投入使用[8]。目前国外文献报道的血清INHB实验室正常参考值各家不一，集中在176.8～238ng/L区间，但与一些病理情况重叠，可能与受试者睾丸体积、测试样本量、FSH的波动及肥胖等有关[9]。在正常成年男性血清和精浆中可检出INHB，但不能在尿液中检出。INHB与精子发生障碍精子发生障碍是指精曲小管内精子发生不良，临床表现为少精子症、弱精子症和非梗阻性无精子症等；当睾丸病理Johnsen评分低于8分时，提示精子发生障碍，是引起男性不育的重要原因。因为INHB绝大部分来自睾丸支持细胞及各级生精细胞，因此INHB和精子发生状态、精子计数呈正相关[10]。认为血清中INHB是精子发生的血清标志物。精子发生功能受损时，血清INHB水平下降[11]。此外，不育男性的间质细胞受损，功能降低，其产生INHB的βB亚单位较少，也是血清INHB水平下降原因之一。Pierik等[12]研究不同生育力男性血清INHB的含量，结果表明：血清INHB水平下降的程度与精子发生障碍的严重程度相关。精子发生障碍患者血清INHB含量低于正常男性；且精子发生障碍程度越重INHB值越低，其顺序是：中度少精子症、严重少精子症、原发性非梗阻性无精子症。Pierik用Johnsen睾丸活检评分方法作为精子发生的金标准评价INHB对精子发生正常或障碍的准确性。结果表明，INHB水平与双侧睾丸活检Johnsen评分之间的相关性有统计学意义（P=0.001）。经接收者工作特征曲线（ROC）分析显示：抑制素预判精子发生障碍的准确率为95%。当INHB＜139ng/L时，对精子发生障碍诊断的敏感性和特异性分别是83%和90%。INHB与FSH结合对诊断精子发生障碍的预测率可达100%（INHB80ng/L，FSH10IU/L）[13]。目前认为，以抑制素B极显著降低和FSH3倍以上增高作为标准，可能取代睾丸活检判断精子发生障碍。鉴别梗阻性与非梗阻性无精子症的价值无精子症约占男性不育人群的10%。通常分为梗阻性无精子症(OA)和非梗阻性无精子症（NOA）。通过睾丸活检诊断精子发生障碍的NOA大约占40%～60%，病理改变通常不可逆转。由双侧输精管梗阻造成的OA，其睾丸精子发生正常，有可能使用外科手术重建或采用辅助生殖技术予以治疗[14-15]。临床对OA和NOA的鉴别诊断意义重大。既往临床上采用血清FSH测定作为评估精子发生障碍的首选方法，但其敏感性与特异性均相对较低，约为75%和80%（血清FSH4.9IU/L）［12］。输精管造影术及睾丸活检属于有创性检查，易对患者造成继发性损伤。临床亟需发现一种敏感性和特异性都很高的非创伤性检测方法对两者做出鉴别诊断。研究结果表明：NOA患者睾丸精子发生功能降低，血清和精浆INHB随之也降低［血清INHB浓度为（48.43±60.74）ng/L］；OA患者血清中的INHB浓度正常或略有升高（156.8±380.14）ng/L，但两者在测定数值上有重叠，存在诊断灰区，单独血清INHB浓度在个体样本精子发生损伤的诊断及预测上意义有限。精浆中INHB可能更直接反映支持细胞的分泌功能及输精管道的通畅情况。然而，很少有关于应用精浆INHB区分OA和NOA的报道。也有研究发现，OA患者与生精细胞阻滞患者的血清INHB水平接近［16］；局灶性唯支持细胞综合征（SCOS）患者血清INHB水平在正常范围。因此，血清INHB是否可单独作为无精子症的鉴别诊断指标还有待进一步研究。近年，一些研究结果表明：INHB可作为NOA363窑窑窑窑国际生殖健康/计划生育杂志2009年11月第28卷第6期JIntReprodHealth蛐FamPlan，November2009熏Vol.28熏No.6患者睾丸晚期精子细胞抽吸（TESE）的预测指标[17]。ronEckardstein等[18]报道，以睾丸活检形态学为金标准，发现血清INHB作为预测精子发生状态的指数比血清FSH更具敏感性，但两者都不能精确预测个体精子发生损伤的类型。两者结合比任一单独使用有较高的诊断敏感性与特异性，特别是在睾丸穿刺寻找晚期精子细胞进行辅助生殖技术时更有价值。此外，INHB水平还可用于诊断儿童隐睾和性早熟、青春期延迟；并可评估隐睾术后男性的精子发生功能、评估精液质量等[19-20]。正常成年男性INHB几乎全部源于睾丸。血清INHB水平可直接反映睾丸功能和生精上皮状态，是评价精子发生状态的血清学标志物。精子发生障碍时，血清和精浆INHB水平明显降低；但OA时血清INHB水平并没有明显改变或略有升高，而精浆INHB降低甚至检测不到。当精液常规分析确认为无精子症时，可通过测定INHB分析精子发生状态。INHB对精子发生障碍具有一定诊断价值