艾检2号《艾滋病抗体检测实验室操作文件》[3]SOP文件

1黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心艾滋病筛查中心实验室黑垦疾控艾检〔2009〕2号黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心艾滋病筛查中心实验室关于印发《艾滋病筛查中心实验室标准操作程序》的通知垦区各艾滋病筛查实验室：建立涵盖艾滋病筛查实验室全方位和艾滋病抗体检测全过程的艾滋病筛查实验室标准操作程序（SOP文件），是进行艾滋病筛查实验室质量管理的重要内容。根据《全国艾滋病检测技术规范》关于“艾滋病实验室要建立覆盖主要工作内容的SOP文件”的要求，为帮助各筛查实验室建立标准操作程序，提高垦区艾滋病抗体检测工作质量，现将总局疾病预防控制中心艾滋病筛查中心实验室建立的《艾滋病筛查中心实验室标准操作程序》印发你们，供你们在建立自身实验室SOP文件时参考。SOP文件是筛查实验室各项工作管理和抗体检测全过程各项2操作的依据，因此各单位要高度重视SOP文件的制定工作，本着既符合规范要求又符合自身实际的原则，认真负责地制定自己的SOP文件，并在今年7月底前完成筛查实验室SOP文件的建立工作。附：艾滋病筛查中心实验室标准操作程序二OO九年四月二十二日主题词：HIV实验室程序印发通知黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心2009年4月22日3艾滋病筛查中心实验室标准操作程序（SOP文件）农黑龙江省海林农场职工医院艾滋病筛查中心实验室2011年11月1日4目录00、艾滋病抗体筛查实验室标准操作文件说明………………301、HIV抗体检测采血标准操作程序………………………402、HIV血液样品接收登记处理程序………………………503、HIV抗体筛查检测标准操作程序………………………604、HIV抗体检测结果报告标准程序………………………705、HIV抗体筛查阳性标本送检程序………………………806、ELISA法HIV抗体检测操作程序………………………907、HIV胶体金标法HIV抗体检测操作程序………………1108、设备仪器保养维护校准标准程序…………………………1309、生物安全柜标准操作规程序………………………………1410、离心机标准操作程序………………………………………1711、酶标仪（中文系统）操作规程……………………………1912、洗板机标准操作程序………………………………………2113、微量可调移液器标准操作程序…………………………2314、实验室的消毒和废弃物处理程序………………………2515、实验室质量控制程序………………………………………2716、实验室意外和事故处理程序……………………………3117、实验室安全防护操作程序………………………………3218、人员进出实验室管理程序………………………………3419、HIV抗体筛查实验室保密程序…………………………3620、HIV抗体筛查实验室工作管理程序……………………3721.实验室检测数据记录与保存程序………………………3822.实验室药品（试剂）管理程序……………………………395艾滋病实验室标准操作程序文件说明1.《艾滋病实验室标准操作程序（SOP）》文件，由艾滋病实验室各岗位工作人员起草，实验室主任审定，并定期修订。2.修订应该在实验室主任领导下进行，每年至少修订1次。并注明修订负责人及修订日期。3.在日常艾滋病抗体检测工作中，工作人员有义务随时发现并报告《艾滋病实验室标准操作程序》文件中的不足和错误，实验室主任要及时组织人员调查核实后并进行修订。4.HIV实验室各岗位工作人员要在SOP文件上签名，表示已经阅读并掌握了《艾滋病实验室标准操作程序》文件有关内容和要求。工作人员签名：王爱群蒋永宏杨建华赵海华2010年3月10日文件名称：艾滋病实验室标准操作程序编写日期：2010-03-10编写人员：杨建华审定人员：蒋永宏修订人员：王爱群修改日期：2010年3月10日6001标题：HIV抗体检测采血标准操作程序一、目的：保证采血人员安全。二、范围：HIV筛查实验室HIV抗体筛查。三、样品：艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。四、操作要求：采血液样品时要按照临床《真空采血法》技术规范操作。1、采血前检查真空采血管、采血针头的有效期限；2、采血者洗手、戴口罩，必要时戴橡胶手套；3、采血前的准备：采血管、针、止血带、棉签、皮肤消毒剂（安尔碘）、避污纸；4、核对患者姓名、性别、年龄、检验内容等；5、患者摆好体位（坐位/卧位），采血的肢体下面放避污纸；6、安尔碘消毒皮肤一次，扎止血带，再次用安尔碘消毒皮肤一次；7、连接采血针头和持针器；8、消毒剂干后，进针直接穿刺血管，左手固定针头，右手置入真空采血管；9、真空采血管中血流停止时，先退出采血管，后松开止血带，用棉签压住进针处，再退出针头，并告知患者持续按压10分钟后将棉签弃入医疗垃圾桶中。10、将针头弃入锐器盒中，将避污纸弃入医疗垃圾桶中。11、采血标本及时送检。五、注意事项：在采集HIV血液样品时应注意安全，直接接触HIV感染者/艾滋病病人血液的操作，应穿戴隔离服、口罩及双层手套。采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液。六、标本要求：、用真空采血管抽取4ml静脉血，室温下自然放置1～2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3000rpm离心10分钟，吸出上清液备用。文件编号：BWBJYK-AIDS-SOP001编写日期：2010-03-10编写人员：杨建华审定人员：蒋永宏修订人员：王爱群7002标题：HIV血液样品接收登记处理程序一、目的：保证实验室HIV检测结果准确性。二、适用范围：1、八五八农场职工医院各科室送检的HIV血液样品。2、其它医疗单位及个人委托的HIV抗体检测血液样品。三、操作步骤：1、送检的血液样品盒，必须在具有处理感染源设备的实验室内，由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹物应进行消毒处理。2、核对血液样品与“HIV抗体检测化验单”编号、姓名等是否相符，送检单填写要规范、完整，并加盖医生名章。对不规范的送检单嘱其补充、填写完整或限时补送。3、检查样品血清量应不少于4ml，过少者应嘱其立即补送。4、检查血液样品管是否有、无破损和溢漏，如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告科室领导，并做好记录。5、检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能接受，则应将样品安全废弃。并要将废弃样品情况立即通知送检者，并嘱其立即补送。6、打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中进行。7、对实验室自己采集的样品，最好将血液先自然存放1～2小时后，再用3000rpm离心10分钟，吸出上清备用。8、如需在几天内检测的血液样品，可放在2～8℃冰箱中。如用贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。文件编号：BWBJYK-AIDS-SOP002编写日期：2010-03-10编写人员：杨建华审定人员：蒋永宏修订人员：王爱群8003标题：HIV抗体筛查检测标准操作程序一、目的：保证实验室HIV检测结果准确性。二、范围：HIV筛查实验室HIV抗体筛查。三、筛查试剂：1、使用的试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批检合格、在有效期内的正规厂家生产的试剂。（黑龙江省艾滋病监测检测中心推荐的试剂）。2、使用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。3、本实验室分别采用厦门英科新创，“艾滋病抗体/抗原酶联免疫检试剂”和厦门英科新创生产的“HIV抗体金标快速诊断筛查试剂”。四、筛查方法：1、双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）。2、胶体金标法。五、HIV抗体筛查检测程序：1、自愿检测标本：先用ELISA法进行检测，如出现阳性，加做胶体金标法进行复检。2、HIV抗体疑似阳性复检标本：如ELISA法和胶体金标法都呈现阳性，填好《送检单》后由专人送省（市）疾病预防控制中心进行确认检测。3、对省、市疾病预防控制中心确认阳性的标本，按有关要求及程序时上报上级疾病预防控制中心。文件编号：BWBJYK-AIDS-SOP003编写日期：2010-03-10编写人员：杨建华审定人员：蒋永宏修订人员：王爱群9文件编号：BWBJYK-AIDS-SOP004编写日期：2009-04-28编写人员：杨建华审定人员：蒋永宏修订人员：王爱群004标题：HIV抗体筛查结果报告程序一、目的：保证实验室HIV检测结果报告准确性。二、范围：HIV筛查实验室结果填写报告。三、检测结果报告方式：HIV抗体阴性结果报告：1、对HIV抗体筛查试验呈阴性反应者，签发“HIV抗体筛查报告”一份。2、于《HIV抗体筛查报告》“检测结果”栏处填写“阴性”。3、检验者、审核者用碳素笔或中性笔手写体签名，并加盖“HIV抗体筛查实验室”公章。HIV抗体疑似阳性结果报告：1、对HIV抗体筛查试验呈阳性反应者，先电话通知送检单位，再报送省疾病预防控制中心HIV抗体确认实验室。2、详细填写“HIV抗体筛查报告”一式复写两份。于“检测结果”栏处填写“阴性”或“疑似阳性”。于“结论”栏处填写“HIV抗体待复查”。3、同时详细填写“HIV抗体复检化验单”一式复写两份。4、报告单和送检单均由检测者、审核者用碳素笔或中性笔手写体签名，并加盖HIV抗体筛查实验公章。5、送样者按“HIV抗体筛查阳性标本送检程序”要求执行。6、待收到省疾控中心《HIV抗体确认检测报告》后，于“备注”处签收姓名和日期，同时复印3～4份，分别转交送检单位。10005标题：HIV抗体筛查阳性标本送检程序一、目的：保证实验室HIV检测标本送检安全。二、范围：HIV筛查实验室阳性标本送检。三、标本送检要求：样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。四、标本包装要求：应采用WHO提出的三级包装系统。1、第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显标记，标明样品的编号或送检者姓名、种类和采集时间。在试管周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单,送检单应与样品分开放置。2、第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。3、第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量、收、发件人）五、标本运送要求：1、血清和血浆样品应置于冰壶中，在2～8℃条件下由专人运送。2、每一包装的体积以不超过50ml为宜。3、详细填写《HIV抗体疑似阳性标本运送记录》。4、送检人员携“HIV抗体复检化验单”（两份）与送检标本一并亲自送达省疾控中心HIV抗体确认实验室。请收样者于送检单“备注”处签收姓名和日期后，复写件带回存档。文件编号：BWBJYK-AIDS-SOP005编写日期：2010-03-10编写人员：杨建华审定人员：蒋永宏修订人员：王爱群11006标题：ELISA法HIV抗体检测操作程序（北京万泰生物）一、目的：保证HIV抗体筛查结果准确性。二、检测范围：自愿咨询、术前筛查等检测，根据特殊需要进行的其他检测。三、抗体检测意义：HIV感染人群筛查、临床诊断、防止输血传播HIV。酶联免疫吸附实验（ELISA）是最常用的HIV抗体检测方法，通过实验室检测人体的HIV抗体,如检测结果呈阳性反应，提示为HIV感染，再经有关权威部门确证并结合流行病学史和现病史对检测结果做出诊断。并将检测结果向国家规定的有关部门报告。四、样品数量要求：血液样品3毫升血，最低采血2毫升。五、仪器和设备：生物安全柜、酶标仪、洗板机、37度恒温水浴箱、离心机（4000转/分转速）、医用电冰箱、移液器等。六、试剂生产单位：北京万泰生物药业股份有限公司。七、检测方法与原理：应用双抗原夹心酶联免疫法原理，（ELISA）检测血清或血浆样品中人类免疫缺陷病HIV（1+2型）抗原，可与样品中抗HIV抗体反应，加入HRP标记HIV（1+2型）抗原，然后用TMB底物做显色。通过酶标仪检测吸光度（A值），从而判定样品中HIV抗体的存在与否。八、检测工作前的准备：1HIV酶标板4X12孔2HIV-Ⅰ型阳性对照1mlx1瓶3HIV-Ⅱ型阳性对照